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猪CD8分子α链胞外区基因片段在毕赤酵母中的表达
引用本文:崔青,王生富,房永祥,陈国华,孙晓林,景志忠.猪CD8分子α链胞外区基因片段在毕赤酵母中的表达[J].中国兽医科学,2010,40(5).
作者姓名:崔青  王生富  房永祥  陈国华  孙晓林  景志忠
作者单位:崔青,孙晓林,景志忠,CUI Qing,SUN Xiao-lin,JING Zhi-zhong(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部兽医公共卫生重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046;甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070);王生富,房永祥,陈国华,WANG Sheng-fu,FANG Yong-xiang,CHEN Guo-hua(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部兽医公共卫生重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046) 
基金项目:国家自然科学基金,甘肃省农业生物技术专项,甘肃省科技支撑计划项目 
摘    要:为了给猪CD8α分子单克隆抗体的研制提供高生物学活性的抗原,采用PCR方法从pGEM-T-pCD8α重组质粒中克隆了pCD8α分子的胞外区基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pCD8α-ED,在毕赤酵母中进行表达,并对重组基因工程菌的发酵时间、pH值进行了优化。结果表明,表达出约20ku的目的蛋白,诱导表达的最适pH值为5.0,诱导表达的最佳时间是120h。Western-blot分析结果显示,表达产物能被鼠抗人CD8α多克隆抗体识别,在20ku左右出现目的条带,说明表达的目的蛋白具有免疫活性结构。

关 键 词:猪CD8α分子  胞外区基因片段  真核表达  毕赤酵母

Expression-in-Pichia pastoris of gene fragment encoding porcine CD8α extracellular domain
CUI Qing,WANG Sheng-fu,FANG Yong-xiang,CHEN Guo-hua,SUN Xiao-lin,JING Zhi-zhong.Expression-in-Pichia pastoris of gene fragment encoding porcine CD8α extracellular domain[J].Veterinary Science in China,2010,40(5).
Authors:CUI Qing    WANG Sheng-fu  FANG Yong-xiang  CHEN Guo-hua  SUN Xiao-lin  JING Zhi-zhong
Institution:CUI Qing1,2,WANG Sheng-fu1,FANG Yong-xiang1,CHEN Guo-hua1,SUN Xiao-lin1,JING Zhi-zhong1,2 (1.Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province/Key Laboratory of Veterinary Public Health of the Ministry of Agriculture/State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China,2.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China)
Abstract:
Keywords:
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