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猪流行性腹泻病毒细胞适应毒LJB-03株在三种Vero细胞上增殖效果的比较
引用本文:郭卫龙,解伟纯,侯星宇,李智力,姜艳平,崔文,王丽,乔薪瑗,周晗,徐义刚,李一经,唐丽杰.猪流行性腹泻病毒细胞适应毒LJB-03株在三种Vero细胞上增殖效果的比较[J].中国兽医科学,2019(3):301-308.
作者姓名:郭卫龙  解伟纯  侯星宇  李智力  姜艳平  崔文  王丽  乔薪瑗  周晗  徐义刚  李一经  唐丽杰
作者单位:东北农业大学动物医学学院;上海源培生物科技股份有限公司
基金项目:"十三五"国家重点研发计划项目(2017YFD0501105);国家自然科学基金资助项目(31472226)
摘    要:为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)细胞适应毒LJB-03株在3种Vero细胞上的增殖特性,分别以正常Vero细胞、适应无血清培养基的Vero细胞和稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2 (TMPRSS2)的Vero/TMPRSS2细胞(繁殖PEDV时无须添加胰酶)为宿主细胞,繁殖PEDV LJB-03株,观察这3种细胞接毒后的病变特点和病变时间,利用空斑法比较其增殖特性,并以间接免疫荧光和电镜技术鉴定病毒的增殖。结果表明,PEDV LJB-03株在正常Vero细胞和适应无血清培养基的Vero细胞上增殖时需添加的胰酶最佳质量浓度为7ug/m L;在这3种细胞上增殖时的最佳感染复数均为0.01;PEDV LJB-03株在3种细胞上效价达到峰值的时间均为36 h,其中在正常Vero细胞上病毒效价最高为7.17×10~7PFU/m L,在Vero/TMPRSS2细胞上病毒效价为3.33×10~7PFU/m L,在无血清Vero细胞上的病毒效价为2.85×10~7PFU/m L。综上所述,正常Vero细胞上PEDV LJB-03株的病毒效价可达其他2种细胞的2倍以上,但在培养病毒时正常Vero细胞需添加胰酶和血清,因此,适应无血清培养基的Vero细胞与Vero/TMPRSS2细胞在培养PEDV LJB-03株时更具有潜力。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  细胞适应毒  VERO细胞  增殖

Comparison of effects of cell-adapted porcine epidemic diarrhea virus strain LJB-03 proliferated on three kinds of Vero cells
Institution:(College of Veterinary Medicine,Northeast Agriculturcd University,Harbin 150030,China;Shanghai Basal Media Technologies Co.,LTD.,Shanghai 201499,China)
Abstract:GUO Wei-long;XIE Wei-chun;HOU Xing-yu;LI Zhi-li;JIANG Yan-ping;CUI Wen;WANG Li;QIAO Xin-yuan;ZHOU Han;XU Yi-gang;LI Yi-jing;JANG Li-jie(College of Veterinary Medicine,Northeast Agriculturcd University,Harbin 150030,China;Shanghai Basal Media Technologies Co.,LTD.,Shanghai 201499,China)
Keywords:porcine epidemic diarrhea virus  cell-adapted virus  Vero cell  proliferation
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