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| 高致病性PRRSV Nsp2变异株Power SYBR Green real time RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 郭杨,陈世界,林华,郭万柱,徐志文,颜其贵.高致病性PRRSV Nsp2变异株Power SYBR Green real time RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(5). |
| 作者姓名： | 郭杨 陈世界 林华 郭万柱 徐志文 颜其贵 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物生物技术中心,四川,雅安,625014;四川出入境检验检疫局,四川,成都,610041 2. 四川出入境检验检疫局,四川,成都,610041 3. 四川农业大学,动物生物技术中心,四川,雅安,625014 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划，教育部长江学者和创新团队发展计划 |
| 摘 要： | 根据高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2变异株Nsp2基因保守区的核苷酸序列设计合成了1对引物,建立了Power SYBR Green模式的实时荧光定量RT-PCR方法,用于检测高致病性PRRSV Nsp2变异株.以pMD-Nsp2质粒为阳性对照制作标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价.结果显示,该方法只能检测到高致病性PRRSV Nsp2变异株的特异性扩增信号;检测线性范围广,在模板浓度为3.15×109～3.15×100copies/uL具有良好的线性关系,相关系数(r2)为0.998;最低检测限为3.15 copies/uL.对25份疑似高致病性PRRS猪病料的检测结果显示,该方法与病毒分离的符合率为100%.表明,建立的Nsp2-Power SYBR Green RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性. |
| 关 键 词： | 高致病性PRRSV Nsp2变异株 Power SYBR Green实时荧光反转录聚合酶链式反应 |
Development of a Power SYBR Green real time RT-PCR assay for detection of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus Nsp2 mutant strain |
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| GUO Yang,CHEN Shi-jie,LIN Hua,GUO Wan-zhu,XU Zhi-wen,YAN Qi-gui.Development of a Power SYBR Green real time RT-PCR assay for detection of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus Nsp2 mutant strain[J].Veterinary Science in China,2009,39(5). | |
| Authors: | GUO Yang CHEN Shi-jie LIN Hua GUO Wan-zhu XU Zhi-wen YAN Qi-gui |
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