不同制备方法对鸡胚成纤维细胞产量的影响

采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞 (CEF)单层 ,在同等条件下均以成纤维细胞为主 ,并伴有少量的上皮细胞 ,仅有全胚法含有极少量的肝细胞 ;培养时细胞贴壁和生长状况 3种方法无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;CEF的产量 ,半胚法明显高于其他 2种方法     

转染βG基因 HHCC细胞的裸鼠转移模型的复制

将人肝癌细胞株(HHCC)细胞和转染β-葡萄糖苷酸酶(βG)基因HHCC细胞体外培养,观察细胞形态结构,用流式细胞仪测定细胞周期,并采用裸鼠脾种植法研究转βG基因HHCC细胞的转移特性;接种后60 d收集转移灶,常规制片,HE染色镜检.结果,转染βG基因HHCC细胞内多见颗粒性物质,微绒毛及突起增多,溶酶体增多,内质网及核糖体丰富,糖元颗粒堆积,某些细胞出现变性、坏死.转染βG基因HHCC和HHCC相比较,其细胞周期发生明显改变,S期细胞增多(P＜0.05),G2期细胞减少(P＜0.05);裸鼠脾种植后60 d,发现试验组出现广泛转移,在肝、肾、肠系膜淋巴结肉眼可见转移灶,而对照组仅在肝细胞中有个别散在的瘤细胞.试验结果表明,转染βG基因可增强HHCC细胞在裸鼠体内的转移能力.     

肉毒梭菌C型及诺氏梭菌B型的透析培养

透析培养的原理是利用半透膜调节相隔开的两个液体之间的物质转移。常用的透析器分两个部份即培养基贮存室和细菌培养室,两室之间由半透膜进行营养物质与代谢产物的扩散与交换。决定因素是半透膜(常用的是玻璃纸)的质地、孔径及单位面积上微孔的数量。     

小鼠附植前胚胎超薄切片的琼脂糖预包埋制备方法

将小鼠附植前胚胎分别经戊二醛-锇酸固定后,采取琼脂糖预包埋法使胚胎凝聚成团,然后对含胚胎的琼脂糖块进行脱水、渗透和包埋.结果显示,Epon812包埋块中的胚胎排列紧密,半薄切片胚胎的整体形态完整,胚胎超微结构保存良好.说明琼脂糖预包埋法是制备小鼠附植前胚胎超薄切片的有效方法.     

转染βG基因HHCC细胞裸鼠转移模型的转移特性改变机理研究

采用脾种植法复制裸鼠肝癌模型,待60 d转移灶形成后分别取肝、肾、肠系膜淋巴结等,以常规方法制成组织切片,ABC免疫组化染色,同时用人肝癌细胞株(HHCC)作对照.结果,试验组30例标本中β-葡萄糖苷酸酶(βG)表达阳性率达100%,PCNA指数阳性率为96.7%,nm 23表达阳性率高达13.3%;而对照组30例标本中βG表达阳性率为3.3%;PCNA指数阳性率为33.6%;nm 23表达阳性率高达100%.试验数据经统计学处理,具有显著性差异(P＜0.01).表明βG改变PCNA、nm 23等肿瘤相关因素在体内的表达是肝癌细胞转移能力增强的原因之一.     

山羊成骨细胞的体外培养和鉴定

采用初生山羊羔股骨骨膜,通过植块培养法、完全消化法和半消化植块法分离、培养成骨细胞。结果表明,植块培养法、完全消化法和半消化植块培养法的贴壁时间分别为4、24、4 h;培养4 d时的细胞数量分别为少量细胞、少量细胞、大量细胞,细胞汇合时间分别为21、19、10 d。传代后第7 d即可汇合,第14 d出现矿化结节,茜素红染色呈橘红色,Von Kossa染色呈黑色;姬姆萨和HE染色后可见体外培养的细胞呈三角形、多角形,胞质丰富,胞核卵圆形,单核,有1~3 个核仁;碱性磷酸酶染色后胞质呈黑色颗粒或块状沉淀;扫描电镜观察胞突发达,伸出的突起与临近细胞的突起相连。体外培养传至15代时细胞的生物学性状未发生变化。试验结果显示,半消化植块培养周期短,细胞损害小,有利于细胞贴壁,是一种可行的骨组织工程研究方法。     

环境容量与能源创新——国际气候变化谈判的二元博弈视角

新世纪是人类发展史上的重要里程碑,全球一半人口正在或已经进入资源密集型工业化社会,传统的南北关系和资源环境体系受到严重冲击.资源环境危机的直接后果是全球环境危机与治理困境,潜在后果则引发主要力量在责任分配、未来发展权益竞争等方面的较量,进而影响国际体系权力转移.在全球气候变化外交中,西方国家既要平衡内部矛盾,吸引发展中国家参与全球环境治理,又要主导气候变化谈判机制建设,实现能源分配和环境容量的垄断.西方国家一方面对新兴大国冲击既有环境资源和未来容量格局的担忧,另一方面也希望通过"软法"和"硬法"来约束中国等新兴发展中大国,进而在经济分工和权力转移中继续保持主导优势.中国应以共进策略参与全球气候变化谈判,即一方面在不同谈判联盟之间及内部,积极协调环境资源和容量博弈引发的冲突和竞争,另一方面推动全球共享能源创新成果,用共同进步的思路解决目前国际环境政治困境.     

利用酶谱法测定Ⅳ型胶原酶判断大熊猫自发脂肪肉瘤侵袭转移性的研究

为探讨Ⅳ型胶原酶含量及活性比值判定大熊猫自发脂肪肉瘤侵袭、转移性的意义,用明胶酶谱法和英国产UVP的Gelwords ID intermeditaes version 3.01软件对1例熊猫脂肪肉瘤组织和肿瘤旁组织进行酶活性分析.发现肿瘤组织中MMP-2的72 ku和62 ku均显著高于肿瘤旁组织,MMP-9在2种组织中的差异性不大;肿瘤旁组织中MMP-2的活性比值可作为脂肪肉瘤侵袭、转移的有效指标;明胶酶谱法作为Ⅳ型原酶的检测手段是可行的.     

权力和平转移的条件与中国和平崛起的外部条件

奥根斯基权力转移理论中关于权力和平转移条件的观点--从维护国际体系既存主导大国的利益和地位出发,竭力防止崛起国家改变国际权力分配的基本格局,并未从根本上回答权力如何和平转移的问题.权力转移理论的最新发展对权力和平转移的条件提出了不同观点.本文将评介这些观点并进一步研究崛起国家实现和平发展的条件,并将其运用于对中国和平崛起的考察中.     

阿维菌素对体外培养王鸽神经细胞内游离钙离子浓度及CaM mRNA表达的影响

提取美国王鸽8～9日龄鸽胚脑神经细胞进行体外培养,按照阿维菌素(AVM)染毒的剂量分成4组,分别为0ìg/L(Ⅰ组)、2.5 ìg/L(Ⅱ组)、5 ìg/L(Ⅲ组)和10 ìg/L(Ⅳ组),染毒24 h后,用MTT法进行细胞活性检测,应用荧光探针法检测细胞内游离Ca2+浓度,应用半定量RT-PCR法检测细胞内CaM mRNA的表达水平.结果显示,AVM能够引起王鸽神经细胞内游离Ca2+浓度升高,CaM mRNA表达水平下降.表明AVM能影响王鸽体外培养神经细胞内的钙稳态.