磁贴穴位敷贴对哮喘患者肺功能及Th1/Th2细胞因子的影响

目的:研究曼吉磁贴对哮喘患者肺功能及辅助性T淋巴细胞1(T helper cell 1, Th1)/辅助性T淋巴细胞2(T helper cell 2, Th2)细胞因子的影响.方法:将80例支气管哮喘患者随机分为2组.对照组40例,用丙酸倍氯米松及沙丁胺醇治疗,疗程30 d;治疗组40例,在对照组治疗基础上用曼吉磁贴穴位敷贴治疗,疗程30 d.于1个疗程后判断疗效,观察两组患者给药前后咳嗽症状、昼夜发作次数的变化,并以美国AS-500型肺功能检查仪测定肺功能各项指标,包括一秒钟用力呼气容积(forced expiratory volume in one second,FEV1)、最大呼气流量(peak expiratory flow,PEF)、最大肺活量(forced vital capacity,FVC);采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组外周血白介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)水平,采用免疫荧光法检测血清总免疫球蛋白E(total immunoglobulin E, TIgE) 水平变化.结果:治疗组支气管哮喘的总有效率为95.00%, 其疗效优于对照组(P<0.05).与治疗前比较,治疗组治疗后症状和肺功能改善明显优于对照组(P<0.05).两组治疗后IL-4、TIgE水平均显著下降,IFN-γ水平均显著升高.结论:改善患者的肺功能及调节Th1/Th2细胞因子的水平是磁贴穴位敷贴治疗哮喘的可能机制.     

宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响

目的:观察宣痹汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠Th1/Th2细胞漂移的影响。方法:将大鼠随机分为正常组(N组)和模型复制组,模型复制组经成功复制CIA大鼠模型后,随机分为模型组(M组)和宣痹汤组(X组)。X组灌胃给予宣痹汤3周,同时M组和N组给予9.0 g/L氯化钠注射液3周。其间测量非致炎足踝关节直径,并进行关节炎指数评分。灌胃结束后,经股动脉取全血,使用ELISA法测定血清INFγ和IL-4水平;使用流式细胞术,以外周血CD4 INFγ 和CD4 IL-4 T细胞分别代表Th1和Th2细胞,测定各自在淋巴细胞所占比例,计算Th1/Th2比值,并将CIA大鼠踝关节直径与Th1/Th2比值进行相关性分析。结果:与M组相比,CIA大鼠关节直径、关节炎指数评分均有改善(P<0.05);血清INFγ和IL-4水平,Th1所占比例以及Th1/Th2比值均显著下降(P<0.01),Th2所占比率显著上升(P<0.01),且CIA大鼠临床症状的改善与Th1/Th2比值降低具有相关性(r=0.846,P<0.01)。结论:宣痹汤能有效缓解CIA大鼠临床症状,恢复Th1/Th2漂移,这可能是其临床治疗类风湿关节炎的机制之一。     

白头翁汤正丁醇提取物对白念珠菌作用下Caco- 2细胞中细胞因子、防御素及Toll样受体表达的影响

目的 从细胞因子、人β- 防御素（human beta defensin,HBD）及Toll样受体（toll- like receptors,TLRs）途径探究白头翁汤正丁醇提取物（butyl alcohol extract of Baitouweng Decoction,BAEB）抗白念珠菌的机制。方法 以Caco- 2细胞为实验模型,先以BAEB作用Caco- 2细胞24 h,再加入热灭活的白念珠菌SC5314孢子(Candida albicans,C.A)共培养24 h,以MTT法测定Caco- 2细胞存活率;采用酶联免疫吸附试验检测Caco- 2细胞上清液白细胞介素- 6（interleukin- 6, IL- 6）、IL- 8、IL- 1β、HBD- 2、HBD- 3水平;采用普通PCR法检测Caco- 2细胞TLR1、TLR2、TLR4、TLR5 mRNA的表达水平。结果 与对照组比较,C.A单独作用的Caco- 2细胞中IL- 6、IL- 8、IL- 1β、HBD- 2、HBD- 3表达水平显著升高（P<0.05）,TLR1、TLR2、TLR4、TLR5 mRNA表达水平显著上调（P<0.05）;与C.A单独作用相比,BAEB预保护Caco- 2细胞后,Caco- 2细胞中IL- 6、IL- 8、IL- 1β及HBD- 2、HBD- 3表达水平明显降低（P<0.05）,TLR1、TLR2、TLR4、TLR5 mRNA表达水平也显著下调（P<0.05）,BAEB高剂量的效应最明显。结论 BAEB抗白念珠菌的机制与下调细胞因子、HBD及TLRs表达有关。     

芪玉三龙汤调节小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化及其对CD4+、CD8+T细胞的影响

目的 探讨芪玉三龙汤在体外条件下对小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化的调控作用及其对CD4+T、CD8+T细胞的影响。方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并通过流式细胞术（PE-CD11b/和FITC-F4/80染色）鉴定其纯度。采用白细胞介素（interleukin,IL)-4刺激小鼠腹腔来源的巨噬细胞构建M2型巨噬细胞模型,芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞,分别于不同时间点应用流式细胞术检测细胞表面膜分子CD16/32、CD206、CD155、PD-L1、Galectin-9的表达水平;qRT-PCR检测诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、IL-12p40、IL-1β、精氨酸酶1（arginase1,Arg1）、FIZZ1、IL-10 mRNA的表达水平。采用芪玉三龙汤处理后的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T细胞体外共培养,流式细胞术检测TIGIT的表达水平。结果 成功分离出小鼠腹腔巨噬细胞,并鉴定其纯度高达89.8%。芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞后,细胞表面膜分子CD16/32的表达水平升高,而CD206表达水平降低;处理24 h后细胞iNOS、IL-12p40及IL-1β mRNA表达水平上升,Arg-1、FIZZ-1、IL-10 mRNA表达水平降低;处理24 h后细胞表面CD155、PD-L1、Galectin-9表达水平降低。经芪玉三龙汤处理的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T淋巴细胞共培养后,CD4+、CD8+T细胞表面TIGIT的表达受到明显抑制。结论 芪玉三龙汤能够诱导小鼠腹腔M2型巨噬细胞向M1型极化,并且极化后的细胞能够抑制T细胞负性调节分子的表达。     

槐耳清膏对荷瘤小鼠瘤细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨槐耳清膏治疗肿瘤的作用机制。方法将雄性昆明小鼠分为对照组、5-Fu组、槐耳清膏组和槐耳清膏+5-Fu组。用H22细胞给小鼠皮下注射,复制皮下瘤模型。观察各组移植瘤质量和抑瘤率,采用免疫组织化学法检测各组瘤组织Bcl-2、Bax蛋白表达。结果3个用药组小鼠的移植瘤质量和瘤组织Bcl-2阳性率显著低于对照组(P<0.05);与5-Fu组和槐耳清膏组比较,槐耳清膏+5-Fu组小鼠瘤质量和瘤组织Bcl-2阳性率显著降低,Bax阳性率显著升高(P<0.05)。结论槐耳清膏有明显的抑制肿瘤生长的作用,其机制可能是通过下调Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡。     

消化复宁汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠ERK1/2和p-ERK1/2的影响

目的 研究消化复宁汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis,CAG）大鼠细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）信号通路的影响,探讨消化复宁汤防治CAG的机制。方法 将80只雄性Wistar大鼠随机取10只为正常组,其余大鼠随机分为模型组,消化复宁汤高、中、低剂量组和维酶素组。采用脱氧胆酸钠及30%和60%无水乙醇灌胃联合施压束缚和饥饱失常法复制肝郁脾虚证CAG模型。实验结束后,观察各组大鼠一般情况的变化,采用ELISA法检测大鼠血清ERK1/2水平,采用Western Blot法检测大鼠胃组织ERK1/2、p-ERK1/2的表达水平。结果 消化复宁汤能明显改善CAG大鼠肝郁脾虚证候表现。消化复宁汤中剂量组与维酶素组血清ERK1/2水平较模型组显著升高（P<0.05）,消化复宁汤中、低剂量组与维酶素组大鼠胃组织ERK1/2水平显著高于模型组（P＜0.05）;消化复宁汤高、中、低剂量组及维酶素组大鼠胃组织p-ERK1/2表达水平较模型组显著降低（P＜0.05）;消化复宁汤高、中、低剂量组血清ERK1/2水平和胃组织p-ERK1/2表达水平相比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 消化复宁汤可通过激活ERK1/2,抑制p-ERK1/2的水平防治CAG发生,其作用无明显的剂量依赖性。     

针灸督脉对骨质疏松模型大鼠血清相关细胞因子和骨密度的影响

目的:探讨针灸督脉对维甲酸所造成的骨质疏松的影响。方法:通过给大鼠灌服维甲酸14 d后,复制骨质疏松大鼠模型,并进行针灸及药物干预,采用放射免疫分析法和双能X线骨密度测定法等,检测实验大鼠血清骨代谢相关细胞因子以及骨密度。结果:针灸督脉可明显提高实验大鼠血清转化生长因子-β(TGFβ)水平,降低白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNFα)水平,升高骨密度(BMD)。结论:针灸督脉可通过调节机体相关细胞因子网络平衡,改善骨代谢负平衡状态,降低骨的转换率,增加骨密度,有效治疗维甲酸导致的骨质疏松症。     

吴茱萸碱对大鼠肝癌细胞缝隙连接细胞通讯功能及连接蛋白表达的影响

目的探讨吴莱萸碱抗肿瘤的作用机制。方法用终浓度为0．1，0．2，0．3μmol／L的吴茱萸碱作用于CBRH7919细胞，同时设不加吴茱萸碱的空白对照组。采用划痕标记染料示踪技术检测各组细胞缝隙连接细胞通讯（gap junctional intercellular communication，GJIC）功能；异硫氰酸荧光素间接免疫荧光法检测连接蛋白（connexin，Cx）26、Cx32表达的变化。结果与空白对照组相比，吴莱萸碱各浓度组CBRH7919细胞Cx26、Cx32表达显著增加，GJIC功能增强，并呈一定的剂量效应依赖关系。结论吴茱萸碱上调CBRH7919细胞Cx26和Cx32的表达及促进CBRH7919细胞的GJIC功能，可能是其抗肿瘤的机制之一。     

固本抑癌方对Lewis肺癌kiss-1、nm23基因表达的影响

目的 研究中药固本抑癌方对荷Lewis肺癌的C57小鼠瘤组织kiss-1、nm23基因表达的影响.方法 以荷Lewis肺癌的近交系C57小鼠为模型,分为生理盐水组,固本抑癌方低、中、高剂量组,阿霉素组,阿霉素+固本抑癌方组,测定并比较各组肿瘤细胞kiss-1、nm23基因的表达水平.结果 与生理盐水组比较,阿霉素+...     

基于CD40/NF- κB通路丹皮酚调控miR- 145抑制小鼠动脉粥样硬化泡沫细胞炎症反应

目的 观察丹皮酚基于白细胞分化抗原CD40/核转录因子-κB(clusters of differentitation 40/nuclear factor kappa-B,CD40/NF-κB)通路调控miR-145抑制小鼠动脉粥样硬化血管巨噬细胞源性泡沫细胞炎症反应的作用机制.方法 高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠20...     

千金藤碱抑制非小细胞肺癌A549细胞生长和转移以及对血红素加氧酶-1和表皮生长因子受体基因表达的影响

目的 探讨千金藤碱抑制肺癌细胞A549生长、迁移和侵袭的作用以及对血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1, HO-1）和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）基因表达的影响。方法 甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色法检测千金藤碱对肺癌细胞的细胞毒性,观察其对A549细胞生长的抑制作用,并用倒置显微镜观察千金藤碱处理不同时间内A549细胞的形态变化;Transwell和侵袭实验检测A549细胞迁移和侵袭能力;RT-PCR和Western blot法分别检测A549细胞内HO-1和EGFR基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 千金藤碱能够抑制肺癌细胞A549细胞的生长,细胞活力随着作用浓度的增加和时间的延长明显降低;10 g/ml千金藤碱处理24 h后,A549细胞发生体积变小、皱缩变圆和染色体固缩等现象;与对照组相比,千金藤碱（>5.0 g/ml）可使穿过隔膜和穿过基质胶的A549细胞数明显减少（P<0.05）。10.0 g/ml千金藤碱明显降低A549细胞中HO-1和EGFR基因的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论 千金藤碱可抑制肺癌细胞的增殖,降低A549细胞的迁移和侵袭能力,下调A549细胞的HO-1和EGFR基因的表达水平,且作用效果具有一定的时间和浓度依赖性。