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相似文献
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1.
自从PCR(聚合酶链反应)技术问世以来,已有许多基因位点的分型系统开始应用于法医物证的DNA分析[1],其中应用最为广泛,技术最为成熟的则是HLA-DQ。基因分型系统。此系统应用PCR技术扩增HLA-DQα基因特异片段,结合等位基因特异性寡核着酸(ASO)探针杂交技术检测HLA-DQα位点的四个等位基因,具有特异性好、灵敏度高、结果稳定、准确可靠等优点。本文应用姜先华等人[2]报告的方法,对88例刑事案件的物证进行了HLA-DQα基因的PCR扩增与分型。现报告如下:材料和方法一、检材233份检材来自于全国十九个省市送检的88例刑…  相似文献   

2.
应用PCR和等位基因特异性寡该苷酸(ASO)探针杂交技术对中国北方汉族人群的HLA-DQα基因进行分型。在246例无关个体中观察到4种等位基因组成的10种基因型。等位基因频率分布在10.0~31.9%之间。基因型的分布符合Hardy-Weinberg定律。DP值为0.8669。对6个家系49个个体的调查表明,HLA-DQα基因按孟德尔方式遗传。不同人群HLA-DQα的DP值比较,中国人群高于其它人群。  相似文献   

3.
用PCR-SSCP法进行亲子鉴定及个体识别   总被引:2,自引:0,他引:2  
HLA-DR位点是一个具有高度遗传多态性的基因位点。到目前为止已发现其具有68个等位基因,此外还有7个假性基因。从国内外DRll基因频率调查来看,各基因频率的分布比较均衡。因此通过检测HLA-DRB基因位点进行亲子鉴定能获得较高的父权排除率,进行个体识别时能达到较高的个体识别率。以往用RFI,P(限制性片段长度多态性)或SSO(序列特异性寡核着酸)方法进行HI,A-DRB基因的定型所需时间较多,而且不能同时对其假性基因进行分析。根据单链构象多态性(polymerasechainreaction-singlestrandconformatlonPoly-mornhism,PC…  相似文献   

4.
HLA是迄今发现的最复杂的人类遗传标记,具有高度多态性。由于用传统的淋巴细胞毒试验检验HLA分型,对检材要求很高,因此很难应用于法医学领域中。随着分子生物学技术的迅猛发展,HLA分型已深入到基因水平。国内陆续研究报道了应用PCR一特异性寡核着酸探针(SSOP)及PCR-单链构象多态性(SSCP)对HLAⅡ类抗原的DQ-A及DQ-B等位基因进行分型,使HLA在法医学中的应用成为现实。本文应用1992年瑞典Olerup和Zetterquist首创的PCR-序列特异引物(PCR-SSP)方法对HLA-DRB基因分型在法医学中的应用进行了初探,认为在法医…  相似文献   

5.
多标记系统(polymarker、PM)位点检测技术包括有低密度脂蛋白的受体(LDLR)、血型糖蛋白A(GYPA)、血红蛋白G球蛋白(HBGG)、型特异性成分(GC)及D7S8等5个位点,分别位于第19、4、11、4、7号染色体上。HLADQA1位点位于HLAⅡ类基因HLA-DQ亚区中的DQA1基因座,在其第三个外显子中存在一个等位基因变异区,该区经克隆和序列分析已确定有8个等位基因。PM系统和HLADQA1可用PCR反向斑点印迹杂交技术进行检测,由PE公司生产的PM+HLADQA1试剂盒正是采取以上PM与HLADQA1位点联合扩增技术使在同…  相似文献   

6.
人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)存在于人体有核细胞的表面,在不同种族、不同个体间呈现高度多态性。HLA个体遗传学差异的本质是在编码其抗原产物的基因水平上,因此HLA基因型检测优于血清学和细胞学方法,能直接从基因水平反映HLA的多态性。  相似文献   

7.
生物素掺入反向杂交法在法医学中应用的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
建立了一套快速、准确检测人类 HLA- DQA基因的反向杂交检测技术,可准确判定 HLA- DQA基因位点的 6个等位基因即 0101、 0102、 0103、 0201、 0301、 0401。调查了中国北方汉族人群中 200例无关个体的 HLA- DQA基因频率及基因型的频率分布,杂合度 (H)为 0.75,个体识别能力 (DP)为 0.928。采用生物素直接掺入 PCR扩增的方法, 1ng的 DNA样品即可准确判型。对血液、血斑、精斑、精液与阴道液的混合斑、肌肉组织等检材进行检测,效果良好。在刑事案件及亲子关系鉴定中应用,准确地判定了检材的 HLA- DQA基因型,为侦察破案提供了科学依据。将此项技术商品化,完成了试剂盒的研制。  相似文献   

8.
PCR法对HLA-DQ_α基因的分型及其在性犯罪鉴定中的应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文应用 PCR 法及 ASO 探针斑点杂交技术,对100例无关个体血液 DNA 及10例性犯罪案件混合斑中精子 DNA 进行了 HLA-DQα基因的扩增及其 DNA 分型。结果正常人0.1~0.3μgDNA 就能满足 DQα基因扩增的需要。在100例个体中可以观察到由4种等位基因组成的10种 DQα基因型。10例不同条件的混合斑中精子 DNA 经30~60次扩增后与 ASO 探针杂交均能准确地判定 DQα基因型。HLA-DQα是个体识别能力较强的遗传标志。本文为性犯罪中精子来源的个体识别提供了一个新方法,具有一定的实用价值。  相似文献   

9.
pMCT118(又称DIS80)是一个高度多态性的VNTR位点(重复单位16bp,核心序列为GNNGTGGG),位于1号染色体上。用PCR方法分析其多态性,国内外已有报道ti,2]K。s。i等人(‘]通过对pMCTlls位点碱基序列进行分析,发现该位点扩增物正链5’端第61个碱基由C转换成T,引入了Hinfl的酶切位点,使其产生了两种多态性Hinfl十和Hinfl-。本文对中国人pMCTlls位点扩增产物Hinfl限制性片段长度多态性进行了研究,现报告如下。材料与方法1.样品48例中国人无关个体血样由本实验室日常积累,DNA提取用Chelex快速提取法[’]。2.pMC…  相似文献   

10.
采用Amp-FLP技术研究人类血液、组织VNTR位点D1S80(pMCT118)、D17S30(pCNZ-22)和ApoB3’位点的遗传多态性,并应用于亲权鉴定案件,获得满意结果。D1S80、D17S30和ApoB3’的DP值分别为0.962、0.956和0.960,累积父权排除率(EPP)为94.51%,远远高于传统血型的DP值和EPP值,是亲权鉴定和个体识别有效方法。  相似文献   

11.
中国汉族人群 8个 STR位点荧光标记同步检测及其频率分布   总被引:5,自引:1,他引:4  
Jiang XH  Li J  Yu J  Huang B 《法医学杂志》2001,17(2):89-92
目的 对血液等微量生物学检材进行 8个 STR多态性位点及一个性别鉴定位点的复合检测 ,并调查了 350名中国汉族无关个体上述基因位点等位基因分布情况。方法 所选位点为 vWA、 TH01、 TPOX、 CSF1PO、 D5S818、 D13S317、 D7S820、 D16S539及性别鉴定位点 Amelogenin,应用荧光染料标记引物,利用 PE- 377 DNA片段分析仪对扩增产物进行基因分型。结果 共检出 63个等位基因及两个性别决定基因 ,总鉴别机率( TDP)值达 99.999 999 98%,对法医学常见极微量生物学检材的检测获得成功, DNA模板需要量为 0.5~ 1.0ng,通过家系调查,证明上述位点遗传稳定,符合孟德尔遗传规律。结论 上述 8个 STR多态性位点具备了个体认定能力 ,是对微量生物学检材进行个体识别鉴定的理想方法。  相似文献   

12.
目的研究中国北方汉族群体色胺酸羟化酶(TPH)基因座T3792A位点的遗传多态性及其法医学应用价值。方法应用等位基因特异性PCR的方法,检测173例中国北方汉族无关个体TPH基因座T3792A位点的遗传多态性。结果TPH基因座T3792A位点在中国北方汉族群体中的多态性分布符合Hardy—Weinberg平衡定律,等位基因A及T的频率分别为0.486和0.514。结论TPH基因座T3792A位点具有较好的遗传多态性.可应用于个体识别与亲权鉴定。  相似文献   

13.
HLA-A位点DNA分型及其法医学应用   总被引:1,自引:1,他引:0  
应用聚合酶链反应0寡核苷酸探针(PCR-SSO)斑点杂交技术,对222名辽宁地区汉族人群无关个体进行HLA-A基因检测,研究中国辽宁地区汉族群体的HLA-A座位基因分布状况。共检出HLA-A等位基因24个,其中以等位基因HLA-A0201最为常见,频率为0.2635;依次是2402101和1101,等位基因频率分别为0.1847和0.1262.理论杂合度为87%,个人鉴别机率为92%,非父排除率为73.3%。在中国辽宁汉族中检出73种基因型,对观察值和期望值进行X2检验,符合Hardy-Weinberg平衡定律(x2=6.28,df=9,0.5<P<0.75)。家系分析结果表明按照孟德尔方式遗传。提出的中国辽宁汉族HLA-A等位基因的遗传基因情况,可用于法医学个人识别和亲子鉴定。人类学,HLA相关疾病,及器官移植研究。  相似文献   

14.
单核苷酸多态性与DNA芯片技术在法医学中的应用   总被引:7,自引:1,他引:6  
80年代中期,Jeffreys建立的DNA指纹技术是法医学DNA分型的里程碑。针对人类基因组小卫星VNTR位点靶序列作RFLP分析,获得高度个体特异性DNA指纹图,使法医学第一次能够作出认定同一性,认定亲生关系的鉴定结论。此为第一代法医DNA分型技术。80年代后期,Mullis建立PCR技术,以基因组内STR位点多态性位点为靶序列作PCR扩增,利用电泳分离,分析STR位点多态性。PCR-STR分型结合了PCR高效扩增和STR位点高度多态性的特点,成功地解决了检测灵敏度问题,采用复合扩增多STR位点的办法,鉴别能力达到或接近DNA指纹水平…  相似文献   

15.
用DNA芯片技术检测HLA-DRB1-ABO基因型。根据HLA和ABO不同基因亚型的独特序列设计探针,制成分型芯片;待检测样品经PCR反应标记上荧光之后,与探针在芯片上进行杂交,通过对杂交产生的荧光信号值进行分析,确定样品DRB1位点和ABO位点的基因亚型。将这一方法应用于111份样本的HLA-DRB1-ABO基因分型并将部分样品进行基因测序。检测结果证明本实验研制的HLA-DR-ABO基因分型芯片可准确分辨出DRB1位点30个等位基因、ABO位点6种基因型。该方法分辨率高、特异性强、重复性好、操作简便,对比常规的PCR-SSP方法,HLA-DR-ABO基因芯片方法更为直观,并具有集成化优势,可以在一张芯片上同时检测HLA和ABO位点,并实现一张芯片多人份,不仅适用于法医学亲子鉴定和个体识别,亦可应用于移植配型、HLA相关疾病及人类遗传学研究。  相似文献   

16.
上海,光复西路的苏州河东畔,宋慈楼中。当“法医学DNA芯片技术研究”课题以全票通过验收的喜讯从会议室内传出时,静候佳音的全体课题组成员都忍不住欢呼起来。由公安部、司法部组织的、以杨胜利院士为组长的验收专家组,在评价意见中,有两段评价最为耀目——“……(课题组)选取了合适的多态性DNA位点用作中国人群的遗传学标志,自主设计了引物和寡核苷酸探针,应用和优化了微量DNA提取和复合扩增方法,编制了芯片分析软件,建立了HLA-DR、ABO、SNP位点的法医学芯片系统,比预计提前并超额完成了攻关目标,达到了国际先进水平。…  相似文献   

17.
目的建立基于pyrosequencing和Pooling技术进行SNP位点的法医学多态性分析技术。方法对50名无关个体样本建立一适合pyrosequencing检测的组池;采用PyroMark Assay Design 2.0软件进行SNP位点等位基因定量分析的引物设计;对组池样本PCR产物进行焦磷酸测序检测。结果检测的3个SNP位点多态性良好,其中位点rs220028与以往人群调查后频率数据无显著差异。结论采用pyrosequencing和Pooling技术对SNP位点进行多态性分析,适合于位点的初筛及大规模群体调查。该技术准确可靠,方便快捷。  相似文献   

18.
目的 建立基于pyrosequencing和Pooling技术进行SNP位点的法医学多态性分析技术.方法 对50名无关个体样本建立一适合pyrosequencing检测的组池;采用PyroMark Assay Design 2.0软件进行SNP位点等位基因定量分析的引物设计;对组池样本PCR产物进行焦磷酸测序检测.结果 检测的3个SNP位点多态性良好,其中位点rs220028与以往人群调查后频率数据无显著差异.结论 采用pyrosequencing和Pooling技术对SNP位点进行多态性分析,适合于位点的初筛及大规模群体调查.该技术准确可靠,方便快捷.  相似文献   

19.
亲子鉴定DNA分型亲权指数的简化计算法   总被引:26,自引:6,他引:20  
PCR扩增DNA片段长度多态性位点,如AmP-FLP、PCR-STR分型技术,在亲子鉴定中应用日益增加。由于被选择应用的DNA位点均具高杂合度、高非父排除率,以及PCR技术取材广泛、灵敏度高等特点,PCR-DNA分型有。逐步取代常规血型检测的趋势。PCR-DNA分型结果表明,杂合子个体呈2条片段,纯合于及条片段,等位基因为共显性遗传,位点均具有不连续基因频率分布。所以,亲权指数计算并不复杂。本文依据单位点DNA分型特发,根据Esse。M6ller计算理论,提出一套简明亲权指数计算公式。同时对父子单亲亲子鉴定的亲权指数计算公式也作…  相似文献   

20.
ABO位点限制性扩增片段长度多态性的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
建立了PCR扩增、限制性酶切、8%(T)、5%(C)聚丙烯酸胺凝胶垂直电泳和银染检测ABO位点的限制性片段长度多态性的方法体系。应用Amp-RFLP技术对185名中国人(哈尔滨)ABO位点的基因频率和基因型分布进行了调查和统计分析。ABO位点特异片段长度为140~200bp,基因频率为0.2000~0.5568。6种基因型频率为0.973~0.3135,杂合度0.5838,Dp值0.7146。经H-W平衡吻合度检测,完全符合群体遗传多态分布。通过对11个家庭33名相关个体的分析,证明完全符合孟德尔遗传定律。ABO基因型检验适用于法庭科学的个体识别和亲权鉴定。  相似文献   

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