磷对体外大鼠成骨细胞增殖分化及钙化功能的影响

在体外培养大鼠成骨细胞的过程中添加磷(0、1、2、4 mmol/L),检测不同时间内的细胞增殖能力、碱性磷酸酶活性、骨桥蛋白表达及钙化功能,探讨了磷对成骨细胞增殖分化及钙化的影响。结果表明,磷能促进成骨细胞增殖,随着磷浓度的增加,增殖作用减弱,只在添加磷后第6、7 d极显著高于对照组;磷能显著或极显著地抑制碱性磷酸酶活性,即作用第5 d时,4 mmol/L磷组显著低于1 mmol/L磷组;作用第8 d时,4 mmol/L磷组显著低于1 mmol/L磷组,2 mmol/L磷组极显著低于4 mmol/L磷组;磷能诱导骨桥蛋白的表达(P<0.01),12、mmol/L高于4 mmol/L磷组;磷能诱导钙化,钙化结节个数极显著高于对照组,钙化结节平均面积只有1 mmol/L磷组显著高于对照组,随着磷浓度的变大,钙化结节平均面积逐渐减小而钙化结节个数则逐渐增多。表明添加不同浓度的磷均能抑制成骨细胞的早期分化,促进其增殖,诱导细胞基质成熟及钙化,利于新骨的形成,但4 mmol/L磷组效果较差。     

铜对软骨细胞外基质胶原含量的影响

对仔猪软骨细胞进行了分离、培养 ,并在软骨细胞培养液中添加不同水平的铜 ,以观测铜对软骨细胞外基质胶原含量的影响。结果表明 ,在软骨细胞培养液中添加铜能显著增加细胞培养液中的胶原含量 ,其中以添加 31.2 μmol/L铜的效果最明显。证实铜能促进细胞产生胶原 蛋白     

复方丁氨丙磷溶液对小鼠免疫机能的影响

为研究复方丁氨丙磷溶液对机体免疫机能的影响,将48只小白鼠随机分成阴性对照组、阳性对照组、低剂量给药组和高剂量给药组共4组。连续给药7d后,采用碳廓清法、流式细胞术和分光光度法分别检测各组小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、外周血淋巴细胞CD4 、CD8 和CD19 细胞百分含量以及血清溶血素。结果表明,高剂量给药组小鼠吞噬指数显著(P<0.05)高于阴性对照组;各给药组小鼠外周血淋巴细胞CD4 细胞百分率和CD4 /CD8 值均明显(P<0.05)高于阴性对照组,且血清溶血素含量均极显著(P<0.001)高于阴性对照组和阳性对照组。试验结果表明,复方丁氨丙磷溶液是通过增强机体非特异性防御机能和特异性细胞免疫反应以及特异性体液免疫功能来增强机体免疫功能的。     

纤细背孔吸虫的卵黄细胞发育和虫卵超微结构观察

应用透射电镜和扫描电镜观察纤细背孔吸虫 (Notocotylusattenuatus)的卵黄细胞发育和虫卵超微结构。结果显示 ,纤细背孔吸虫卵黄细胞的发育过程分为 3个时期 :Ⅰ期为未发育的卵黄细胞期 ,细胞外形不规则 ,核大 ;Ⅱ期为发育中的卵黄细胞期 ,细胞增大 ,胞质内出现大量粗面内质网 ,卵黄颗粒明显增加 ;Ⅲ期为成熟卵黄细胞期 ,胞质内可见单个类脂滴并充满卵黄球 ,卵黄球内含卵黄颗粒 9～ 3 7个 (X =2 0 .45 ,n =2 0 )。虫卵两端具有卵丝 ,一端具有卵盖 ,卵盖与卵壳交接处有 2条环状隆起 ,卵内含有胚细胞和脂滴。胚细胞的胞质内含有核仁样的细胞质体和线粒体     

藏药对脑缺血大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构的影响

采用夹闭大鼠双侧颈总动脉制作全脑缺血再灌流损伤动物模型,对比观察藏药五根散治疗前、后对其海马CA3区锥体细胞超微结构改变的影响.结果,未治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞出现核膜内陷,核染色质分布不均且集聚成块状向核膜边集,胞质水肿,细胞器减少,粗面内质网扩张,核糖体脱失,线粒体膜轮廓不清,嵴断裂或空泡化,而治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构大致正常.表明脑缺血后血供恢复期海马CA3区锥体细胞发生明显的超微结构改变,藏药五根散治疗可使海马病变向正常逆转,为藏药五根散防治脑血管病引起认知功能障碍后遗症提供了形态学依据.     

中药"球康"对柔嫩艾美球虫超微结构的影响

利用透射电镜对中药"球康"作用下柔嫩艾美球虫超微结构的变化进行了观察.结果发现,在"球康"作用下,球虫裂殖子形态结构发生明显变化,表现为哑铃形、畸形和不规则形状,裂殖子的顶体肿胀变圆;裂殖子外膜破损,外膜与细胞质分离,出现大的空腔.球虫微线消失,内部出现环状结构;线粒体内出现空泡和致密的电子团块;球虫死亡,完全失去超微结构,仅留下许多支链淀粉颗粒.推测中药"球康"抗球虫的作用机理可能是,通过破坏虫体结构的完整性,抑制虫体物质代谢及能量代谢等生理机能,从而杀死球虫或者抑制球虫的生长和繁殖.     

猪伪狂犬病病毒变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞的病毒形态发生和细胞超微结构观察

应用超薄切片和透射电子显微镜技术,研究猪伪狂犬病病毒(PRV)MQ18变异株感染绵羊胚胎鼻甲上皮细胞(OFTu)的病毒形态发生和超微结构变化。结果显示:病毒在细胞核内复制、增殖,形成核内包涵体,装配好的病毒通过核内膜获得初始囊膜,以出芽方式出核进入细胞质,在高尔基体区域进行加工修饰、二次获得囊膜后形成完整病毒粒子,以包裹有病毒粒子的空泡与细胞膜相互融合方式,将病毒释放到细胞外;细胞超微结构主要表现为细胞质内空泡增多,线粒体增生、肿大,空泡样变,粗面内质网扩张,高尔基体形态异常,细胞核染色质浓缩、边集,最后细胞破坏、裂解,可见细胞早期凋亡及自噬小体结构。本研究结果为阐明PRV的感染和致病机制提供了理论依据。     

钙磷对体外培养SD大鼠破骨细胞生成和活化的影响

通过成骨细胞与脾细胞共培养,在体外诱导脾细胞转化为破骨细胞,转化过程中分别加入3、5mmol/L的钙或磷及不同比例的钙、磷,设不添加钙、磷因子对照。经形态学观察、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色计数、扫描电镜观察象牙片吸收陷窝研究钙、磷因子对大鼠破骨细胞生成和活化的影响。结果表明,培养液中钙、磷浓度分别为35、mmol/L时对破骨细胞的生成及活化均有显著抑制作用(P<0.05),5mmol/L Ca对破骨细胞生成活化的抑制与对照组差异极显著(P<0.01)。CCa∶CP=2∶1组对破骨细胞生成和活化的抑制作用最强。证实钙、磷通过抑制破骨细胞的生成和活化抑制破骨细胞的骨吸收活性。     

缺磷日粮对笼养蛋鸡生产性能及内分泌的影响

将 12 0只 19周龄依莎蛋鸡随机分成A、B、C组 ,分别饲喂总磷含量为 5 .8、4 .4和 3.0g/kg的日粮 (相应的有效磷含量分别是 4 .0、2 .5和 1.0 g/kg) ,进行缺磷日粮对蛋鸡生产性能及内分泌的影响试验。结果表明 ,B组与A组间生产性能无显著差异 ;与A、B组相比 ,C组产蛋率、体重、蛋壳品质及骨密度 (BMD)均显著下降 (P <0 .0 1) ;各组间血钙、血磷含量无显著差异 ;C组碱性磷酸酶 (AKP)活性和血液骨钙素 (BGP)含量均比对照组显著提高 (P <0 .0 1) ;从试验开始到产蛋高峰期 (33周龄 ) ,A、B和C组雌二醇 (E2 )水平随年龄增长而上升 ,但随后E2 水平则呈下降趋势。试验结果表明 ,日粮总磷含量为 4 .4 g/kg时有助于提高和改善蛋鸡生产性能 ,若日粮总磷含量低于 4 .4 g/kg ,则会降低产蛋率、蛋重、蛋壳品质及骨量。     

镉对BRL 3A细胞缝隙连接通讯功能的影响

为探讨镉对大鼠肝细胞(BRL 3A)缝隙连接通讯功能的影响,以0、2.5、10μmol/L醋酸镉溶液分别处理BRL 3A细胞12h,采用实时分析技术测定细胞指数,显微镜观察细胞形态,划痕染料标记示踪法检测细胞缝隙连接通讯(GJIC),激光共聚焦观察缝隙连接蛋白Cx43的分布,免疫印迹测定Cx43的表达及其磷酸化水平。结果显示,随着镉浓度的增大(2.5、10μmol/L),细胞指数值降低,细胞间荧光黄两侧扩散距离极显著减少(P0.01),Cx43在细胞膜上分布减少、胞内增多,Cx43的表达及其磷酸化水平极显著降低(P0.01)。结果表明,镉对BRL 3A细胞有明显细胞毒性,可抑制GJIC,其机制可能是镉诱导BRL 3A细胞Cx43分布异常、表达减少及磷酸化水平降低。     

硝基苯对小鼠肝微粒体混合功能氧化酶活性的影响

采用灌胃的方法对试验小鼠进行硝基苯(NB)染毒,染毒剂量分别为26 mg/kg、52 mg/kg、105mg/kg,每天染毒1次,共30 d,观察小鼠肝显微及超微结构的变化,并检测了肝微粒体混合功能氧化酶活性.结果显示,主要表现为光镜下肝细胞水变性,电镜下线粒体肿胀,脊断裂;内质网脱核糖颗粒;细胞核发生形变;次级溶酶体、脂滴数量增多,糖原颗粒减少等一系列的病理学变化.随着染毒剂量的加大,肝微粒体混合功能氧化酶中的细胞色素P450的含量呈波动性变化;细胞色素b5和EROD酶的活性逐渐升高;NAD-PH细胞色素C还原酶的活性逐渐降低.表明NB对小鼠肝毒性作用随染毒剂量的增加而加强;EROD可以作为检测环境中NB污染水平的生物标志物.     

弓形虫Ⅰ/Ⅱ型ROP16蛋白对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡和周期及增殖的影响

为了探讨刚地弓形虫Ⅰ（RH）、Ⅱ（Me49）型ROP16蛋白对SH-SY5Y细胞凋亡、周期及增殖的影响,本研究通过表达Ⅰ、Ⅱ型ROP16蛋白（HBLV-ROP16Ⅰ、HBLV-ROP16Ⅱ）和空载（HBLV-NC）的慢病毒感染SH-SY5Y细胞以获得稳转株,实时荧光定量PCR (RT-PCR)和Western-blot验证SH-SY5Y细胞内ROP16过表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,CCK-8法检测细胞增殖情况,RT-PCR和Western-blot分别对凋亡相关因子（Bax、p53、Bcl-2、Caspase-9）及细胞周期相关因子（p21、CDK6）的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果显示,相比于空白组（Control）和空载体组（HBLV-NC）,过表达组（HBLV-ROP16Ⅰ、HBLV-ROP16Ⅱ）细胞的ROP的16 mRNA和蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）,说明稳转株构建成功;过表达组细胞的凋亡比率、G1期细胞比率均显著升高（P<0.05）,而细胞增殖率显著降低（P<0.05）,凋亡相关因子（Bax、p53、Caspase-9）及...     

三聚氰胺对小白鼠内脏器官及其细胞凋亡的影响

为研究三聚氰胺急性中毒对小白鼠内脏器官的损害及对细胞凋亡的影响,将18～22g昆明种小白鼠40只随机分为4组,分别经口灌喂蒸馏水和不同剂量的三聚氰胺(370、739和1 479mg/kg)。染毒后第36小时处死小白鼠,观察肺等内脏器官的病理变化;用流式细胞术检测三聚氰胺对肺、肝、脾和肾组织细胞凋亡的影响。病理学观察显示,三聚氰胺各剂量组小白鼠肺充血,肺泡腔有少量红细胞和炎性细胞浸润。1 479、739mg/kg组小白鼠脾、肝轻度淤血,肾小管上皮细胞肿胀和蛋白管型。流式细胞仪检测结果显示,三聚氰胺各剂量组肾和肺的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),而各剂量组肝和脾的细胞凋亡率与对照组无显著差异(P>0.05)。证实,三聚氰胺急性中毒会造成小白鼠肾、肺、肝和脾损害并诱导肾和肺细胞的凋亡。     

猪流行性腹泻病毒M蛋白对Ⅰ型干扰素产生的影响

为探索猪流行性腹泻病毒(PEDV)结构蛋白M对Ⅰ型干扰素(IFN)产生及其信号通路的影响,将PEDVM蛋白表达质粒转染HeLa细胞后用poly(I∶C)刺激,应用双荧光素酶分析系统对IFN-β-Luc、IRF3-Luc表达水平进行检测,应用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)对IFN-β、IFN刺激基因15(ISG1...     

孕酮对大鼠小肠黏膜结构及其相关细胞的影响

为了研究孕酮对小肠黏膜屏障结构的影响,将24只Wistar健康雌性大鼠进行同期发情处理后,于发情间情期随机分为4组。对照组:只做假手术;OVX组:双侧卵巢摘除;OVX P1组:双侧卵巢摘除 孕酮2 mg/kg;OVX P2组:双侧卵巢摘除 孕酮10 mg/kg,连续用药7 d后宰杀,观察小肠黏膜上皮细胞、上皮内淋巴细胞、杯状细胞形态结构和数量的变化。结果表明,和对照组相比,OVX组大鼠的小肠黏膜结构有明显损伤,绒毛萎缩,绒毛高度和隐窝深度的比值(V/C)明显降低,上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量减少;补充2种剂量的孕酮后,各项指标比OVX组有不同程度的改善,其中OVX P1组与OVX组差异显著,且好于OVX P2组。证实,卵巢摘除对大鼠小肠黏膜屏障结构有严重影响,补充适量孕酮可以在一定程度上减轻对黏膜屏障结构的影响。     

胰岛素样生长因子Ⅰ和胰高血糖素样肽Ⅰ对体外培养的脂肪细胞HSL mRNA表达的影响

为阐明胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、胰高血糖素样肽Ⅰ(GLP-Ⅰ)在乳牛脂肪代谢过程中的调控作用,应用荧光定量PCR法检测IGF-Ⅰ、GLP-Ⅰ对体外培养的脂肪细胞激素敏感脂肪酶(HSL)mRNA丰度的影响。结果显示,随着IGF-Ⅰ、GLP-Ⅰ添加浓度的升高,脂肪细胞HSL mRNA表达逐渐下降。结果表明,IGF-Ⅰ、GLP-Ⅰ直接调控脂肪细胞HSL mRNA的表达。     

镉对小鼠生精细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组,每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6 mg/kg(按体重给药),对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9 d用原位末端标记法(TUNEL)测定睾丸内生精细胞的凋亡率,并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示,各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05),并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升,而bcl-2基因的表达水平明显下降。表明,镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡,其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。     

抗坏血酸和NAC对水牛卵泡颗粒细胞存活的影响

体外培养水牛卵泡颗粒细胞(BFGCs),待一定阶段后撤除胎牛血清,在对照组培养基中不加任何抗氧化剂,在试验组培养基中分别加入不同浓度的抗坏血酸(AA)和N乙酰L半胱氨酸(NAC),培养6h后观察细胞生长变化,并用噻唑蓝比色法进行细胞计数,探讨了AA和NAC对撤除血清后BFGCs存活的影响。结果表明,对照组和试验组的BFGCs都有不同程度的体积变小、细胞浓缩、变圆、离壁等类似凋亡的特征。其中0.5和1.0mmol/LAA组凋亡细胞最少,150.0mmol/LAA组无存活细胞,0.5mmol/LAA组的细胞存活率显著高于对照组和除1mmol/LAA组以外的其他AA组(P<0.05)。5mmol/LNAC组凋亡的BFGCs最少,其余5个试验组随NAC浓度升高,凋亡细胞逐渐增多,5mmol/LNAC组BFGCs的存活数量显著高于对照组和其他各组(P<0.05)。说明抗氧化剂AA、NAC在低浓度时能抑制撤除血清后体外培养BFGCs的凋亡,而高浓度时可促进其凋亡,它们的作用都是双向的、剂量依赖性的。     

犬腺病毒1型感染普通级比格犬中Ⅰ和Ⅲ型干扰素及其受体分子表达量的比较

比较普通级比格犬感染犬腺病毒1型(CAV-1)后外周血和肝内Ⅰ型和Ⅲ型干扰素(IFN)及其受体分子的转录水平,同时评估CAV-2疫苗免疫对CAV-1感染试验的影响.对3只2月龄普通级比格犬后肢肌肉注射1057TCID50CAV-1纯化病毒,在攻毒后12 d内记录体温变化,每日采集咽拭子和肛拭子,于攻毒后第3、6、9、1...     

重组牛IFN-α对亚洲Ⅰ型口蹄疫亚单位疫苗免疫小鼠的影响

在大肠杆菌BL21(DE3)中分别表达了牛IFN-α基因、亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(FMDV)VP1和VP1 C末端基因,并纯化了所表达的蛋白。用透析的方法进行蛋白复性后制成油乳剂疫苗,经皮下多点注射免疫小鼠,以MTT法检测小鼠脾淋巴细胞经植物血凝素(PHA)刺激后的增殖反应活性;以液相阻断ELISA检测血清FMDV特异抗体的变化。结果表明,重组VP1(rVP1)和rVP1 C末端蛋白能单独诱发小鼠的体液免疫反应和微量的细胞免疫反应,而与重组牛IFN-α(rBoIFN-α)共同接种的小鼠,体液免疫反应和细胞免疫反应更为明显。