用醛化猪红细胞进行猫泛白细胞减少症病毒血凝试验

猫泛白细胞减少症(FPL )的病原是猫泛白细胞减少症病毒(FPLV),系细小病毒成员,又称为猫细小病毒(FPV)。本病在我国,据报道(张振兴等,1984)已成为当前最严重的猫病之一,本病可用血凝(HA)试验检测病猪粪便中的病毒而作出诊断。然而,应用新鲜猪红细胞作HA试验存在着不易长时间保存,不同个体的红细胞间有差异,以及有些个体的红细胞存在自凝现象等缺点。所以,我们进行了醛化猪红细胞的HA试验,得到了较好的效果。     

用醛化鸡红细胞检测鸡减蛋综合征病毒的试验

用醛化鸡红细胞检测鸡减蛋综合征病毒的试验郑厚旌，夏艳勋，乔传玲，袁秀芬（河南农业大学郑州４５０００２）检测鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）时采用的血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验中，通常使用的是新鲜鸡红细胞，新鲜红细胞保存时间短，需使用前临时采血洗涤，...     

用醛化红细胞分离抗禽流感病毒独特型多克隆抗体

用纯化的鸡抗禽流感病毒(AIV)抗体免疫家兔,制备抗独特型多克隆抗体;用戊二醛醛化的红细胞固定非特异性鸡抗体,再吸附兔抗鸡抗体,获得了纯的抗独特型抗体。经鉴定,该抗体既有弱的血凝性又有弱的血凝抑制性,并能与原病毒竞争性地和鸡抗AIV抗体结合。     

鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒双重nano-PCR检测方法的建立及初步应用

为快速鉴别诊断鹅星状病毒(GoAstV)和鹅坦布苏病毒(TMUV),本研究根据 GenBank 上公布的GoAstV 和 TMUV 基因保守区设计了 2 对特异性引物,结合金纳米材料,通过对反应条件的优化,建立了一种可同时检测这两种病毒的双重 nano- PCR 诊断方法。 结果显示,该方法对鹅细小病毒(GPV)、鹅圆环病毒(GoCV)、新城疫病毒(NDV)和禽腺病毒(FAdV)这 4 种鹅常见病毒的扩增结果均为阴性。 该方法对 GoAstV和 TMUV 的最低检测浓度分别为 1.21×10¹copies/ μL 和 1.21×10³ copies/ μL,敏感性较普通 PCR 分别高100 倍和 10 倍。 对 42 份临床样品的检测结果显示,共检出 GoAstV 13 份,TMUV 1 份。 上述结果表明,本研究建立的双重 nano- PCR 方法快速、特异、敏感,可用于鹅星状病毒和鹅坦布苏病毒的临床检测和流行病学调查。     

鹅副黏病毒的分离和鉴定

鹅副黏病毒病是由禽副黏病毒引起的一种急性高度接触性传染病 ,表现为发病急 ,传播快 ,发病率高 ,病死率高 ,在我国屡有发生 ,造成了一定的经济损失。我国学者已对该病做了详尽的研究 ,认为是由Ⅰ型禽副黏病毒即新城疫病毒引起的 ,基因型为Ⅶ型。 2 0 0 1年以来海南省发生了该病 ,笔者对此开展了流行病学调查 ,临床症状、解剖病变观察和病原分离鉴定。1　材料1.1　试验动物　 9～ 10日龄非免疫鸡胚 ,非免疫种鸡所产。 1日龄雏鸡 ,用非免疫鸡胚自行孵化。 6周龄小鸡 ,2 0日龄以上小鹅 ,严格隔离饲养 ,试验前测定新城疫HI效价为 1.0lb以下。 …     

鹅细小病毒免疫血清的制备及其应用

应用鹅细小病毒 (GPV)弱毒疫苗及灭活疫苗免疫 111只 2月龄鹅群 ,制备了GPV免疫血清 ,第二次免疫后 6 8d采取血清 ,经检测ELISA抗体效价达 1∶80 0 0以上 ,经保护试验后初步应用于鹅细小病毒感染的田间防治 ,收到了良好的疗效。     

用氯化铬联结病毒与绵羊红细胞的被动血凝试验

建立的用低浓度氯化铬溶液作联结剂将蛋白质抗原联结于绵羊红细胞表面，用于被动血凝试验（ＰＨＡ）的方法显示，绵羊红细胞在联结前用０．２５％胰酶处理，可显著提高抗原与红细胞的联结效力；用联结蛋白相对应的抗血清检测，滴度可达１：２６２１４４０；被联结蛋白浓度由前人试验所获得的最低３ｍｇ／ｍｌ降低到０．２ｍｇ／ｍｌ，从而可用于低蛋白浓度的病毒的联结。     

免疫程序与母源抗体对H5禽流感疫苗免疫鸭和鹅HI抗体水平的影响

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用;加强免疫鸭和鹅所产生的H5HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异;鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25~30dH5HI抗体水平达到高峰。     

口蹄疫病毒抗原与红细胞化学联结的方法及其应用

病毒或病毒蛋白抗原以及免疫球蛋白抗体与红细胞通过化学联结剂结合形成复合物,作为免疫反应的指示系统,在免疫测定中已经得到广泛应用。病毒抗原-红细胞复合物已经用于凝胶溶血试验(Charan等,1981;Jochim和Jones,1981)、被动血凝(Ikram和Prince,1981)及被动血凝抑制试验(Tokuda和Warrington,1970)检测病毒抗体,Johnson(1974)、Kim(1975)和Mclaren(1978)等用溶血斑试验(Hemolytic plaque assay)检测了淋巴细胞产生的抗体。将免疫球蛋白抗体与红细胞偶联可用于检测相应的抗原。H.A.等(1972,1973)用反向被动血凝反应鉴定了口蹄疫病毒型和亚型。M.M.Rweyemanu等(1980)用单辐射溶血技术(Single Radial Hemolysis Technique)检测了口蹄疫病毒的抗体和抗原。     

应用酶联免疫吸附试验检测实验感染绵羊进行性肺炎病毒的山羊血清抗体

用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）在接种绵羊进行性肺炎病毒（ＯＰＰＶ）的山羊血清中可测到ＯＰＰＶ抗体。抗体的最早检出时间是接毒后的第１５ｄ，且４只接毒山羊都呈阳性反应。检测结果表明，ＯＰＰＶ可在山羊体内诱生较强的体液免疫应答反应。试验所用的ＥＬＩＳＡ除可用于ＯＰＰＶ通过山羊体的传代研究之外，还可应用于绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）的诊断     

鹅细小病毒和鸭瘟病毒复合PCR检测方法的建立

根据GenBank中的鹅细小病毒(GPV)和鸭瘟病毒(DPV)基因序列,分别设计合成了针对GPVVP3和DPV UL6基因片段的2对引物,以GPV-GZ1株鹅胚尿囊液和DPV-SD株鸭胚尿囊液的核酸提取物混合液作为模板,经优化反应条件,成功建立了检测GPV和DPV 2种病毒的复合PCR方法.特异性试验结果显示,该方法对GPV-GZ2株与DPV-SC株病毒核酸的扩增均获得550 bp和376 bp的2条特异性目的片段,而对鹅副黏病毒、鸭肝炎病毒、鸭源沙门菌、鸭源巴氏杆菌和鸭疫里默氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对GPV核酸的最小检出量为1.66 Pg,对DPV核酸为0.166 Pg;对人工感染雏鹅的肝组织进行PCR扩增,结果可检测到相应的特异性病毒核酸片段.表明,建立的复合PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于GPV或/和DPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断.     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟病毒抗体的试验

本实验室曾研究报道了应用HRP-SPA-ELISA检测猪瘟病毒抗体的方法[见曾医大学学报7(4),391～396,1987],在此基础上,我们进一步探索适于基层兽医单位推广应用的血清学手段,建立了斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测猪瘟病毒抗体的方法。试验结果表明,该法敏感性高、特异性强,与兔体中和试验及HRP-SPA-EIISA呈极其显著的正相关。     

卫可和泛福露益消毒剂抗猪瘟病毒试验

卫可 (Ｖｉｒｋｏｎ’ｓ)和泛福露益 (Ｆａｒｍｆｌｕｉｄ’ｓ)是英国生产的 2种兽用消毒剂 ,本试验仅在实验室条件下检测了其对猪瘟病毒的杀灭效果。1　试验材料1 .1　消毒剂卫可和泛福露益为Ａｎｔｅｃ产品 ,均由中国台湾省府泉实业有限公司提供。本试验按产品使用说明操作。1 .2　猪瘟兔化弱毒用农业部兰州生物药厂生产的猪瘟弱毒疫苗毒(Ｃ株 ) ,2 0倍稀释后用于本试验。1 .3　试验动物体重 2～ 3ｋｇ的健康兔 ,由中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物场提供。1 .4　传代细胞和试剂ＰＫ 1 5细胞购自中国兽药监察所。培养细胞的营养液为…     

应用间接免疫荧光试验检测猪圆环病毒抗体

用猪肾传代细胞系PK 15增殖猪圆环病毒 2型 (PCV 2 )毒株制备抗原 ,建立了检测PCV抗体的间接免疫荧光试验 (IFA)。应用该方法对 64份临床送检血清样品进行了检测。结果 ,3 8份血清呈现PCV抗体阳性 (5 9% )。IFA方法的建立为临床上进行PCV流行病学调查及相关疾病的诊断提供了另一种检测手段。     

应用琼脂免疫扩散试验检测番鸭细小病毒抗体

将分离的番鸭细小病毒通过正常发育的番鸭胚传代,分别取不同代次的病毒尿囊液经氯仿、聚乙二醇浓缩处理后制成不同代次的抗原.该抗原与抗番鸭细小病毒抗血清在含有20 g/L PEG 6000的琼脂平板上作用,可见有明显的沉淀线.     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒(EAV)免疫SPF豚鼠,4周后采血做血凝抑制试验(HI),其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应,抗原和抗血清在4℃感作24 h后可以检测到最高的HI抗体效价,同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关.对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验(NT)进行EAV抗体检测,HI和NT阳性符合率为94.7%,血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关.     

快速检测鸡新城疫病毒的聚乙二醇单抗夹心ELISA试验的建立和应用

以抗鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验为基础，在酶标抗体（ＨＲＰ－Ｆ＿（２３））稀释液中加入４％（ｗ／ｖ）聚乙二醇（ＰＥＧ）６０００，建立了ＰＥＧ－ＥＬ１５Ａ法，使用此法检测临诊样品，与单抗夹心ＥＬＩＳＡ相比，时间缩短７０分钟且提高了ＯＤ＿（４９０）值，易于识别。结果表明，ＰＥＧ－ＥＬＩＳＡ法具有实际应用价值。ＰＢＧ能加强抗原－抗体反应的速率和强度，这种效应在固相夹心ＥＬＩＳＡ第二步表现尤其明显。ＰＥＧ的这种非特异性效应对于检测其它抗原或抗体的ＥＬＩＳＡ试验可能具有普遍意义。     

鹅裂口线虫感染性幼虫对干燥光线和消毒药的耐受力试验

(一)材料与方法 1.感染性幼虫:取人工感染鹅裂线虫鹅的粪便,在25℃条件下孵化1周,用贝尔曼氏装置收集感染性幼虫,并离心清洗备用。 2.干燥对感染性幼虫的影响:将盛有40～50ml MgCl_2·6H_2O、Na_2Cr_2O_7·H_2O、NaCl、K_2SO_4的饱和溶液及氧化硅胶分别装入100ml的试剂瓶中。当试剂瓶被密封,置于25℃条件下时,试剂瓶气相空间的湿度分别为32.5％、53.0％、75.5％、97.5％和0。     

砜苯咪唑对鹅寄生蠕虫的驱虫试验和毒性观察

据国外资料证明,砜苯咪唑(Oxfcndazole)对寄生于牛、羊、猪、马、驼骆等动物消化道的多种线虫均有极佳的驱虫效果,但对禽类尤其是水禽的寄生蠕虫的驱虫效果如何,国内资料甚少,为此我们用陕西省汉江制药厂提供的砜苯咪唑对鹅寄生蠕虫进行了驱虫试验,证明该药对鹅裂口线虫、矛形剑带绦虫具有极为满意的驱虫效果,对膜壳类绦虫也有较好的驱虫效果,对吸虫效果差。同时进行了该药对水禽的毒性试验。     

应用微量间接血凝试验检测牛鼻气管炎病毒抗体

1955年,美国首次报道了牛鼻气管炎病,随后,澳大利亚、新西兰、日本等国家也报道了该病。我国用血清中和试验进行抗体普查,发现北京、上海、广东、广西、四川等地,都有阳性牛群。在本试验中,我们用微量间接血凝试验检出了牛鼻气管炎病毒抗体,并同细胞中和试验做了比较。 (一)材料和方法 1.病毒株和细胞培养:从匈牙利引进的Bartha—Nu/67牛鼻气管炎疫苗株,将其接种于犊牛肾原代或次代细胞单层上,37℃培养48小时左右,90％以上细胞出现病变时收获,测