人体脂肪组织DNA提取方法的比较

在法医物证学检验中，进行DNA分型的检材多为血液（痕）、毛发、指甲、肌肉组织及骨骼等，极少选择脂肪组织。脂肪组织采用常规方法提取模板DNA效果不佳，本文通过对不同提取方法进行比较，以探索可适用于脂肪组织DNA提取的方法。     

QIAshredderTM柱结合M48纯化试剂盒提取微量DNA

法医检材中DNA含量少、质量差是DNA检验失败的重要原因之一，在提取时．裂解液能否实现全部转移。是减少DNA损失的重要环节。法医DNA检材载体大多为纱线、脱脂棉类，吸附力强，本研究利用QIAshredderTM柱结合使用M48纯化试剂盒．提取、纯化此类检材中的DNA．在多起脱落细胞类检材DNA检验中取得了成功，发挥了较好的作用。现报道如下。     

小体系法提取微量DNA2例

1 案例 案例1 某年1月23日,一卖淫女(黄某,31岁)在出租房内被杀害.现场勘验人员用一团脱脂棉擦拭现场遗留的一个一次性塑料口杯边缘,对其进行DNA检验.由于脱脂棉太大,致使DNA浓度减小,多次提取未检出DNA.     

全血中DNA6种提取方法的比较

目的 比较经典有机法、改良有机法、常规Chelex-100法、IQ法、Qiagen法及SP法6种方法在提取DNA纯度和得率上的差异.方法 收集10名健康志愿者的静脉全血各5mL,分别采用6种方法提取基因组DNA,通过紫外分光光度仪和荧光定量分析技术检测产物的纯度和浓度,计算得率,并使用统计软件对结果进行分析.结果 常规Chelex-100法所得DNA的纯度明显低于其他方法,而另外5种方法所得DNA纯度的差异不具有统计学意义.改良有机法得率最低,IQ法得率最高.统计结果表明试剂盒方法抽提全血DNA的得率明显高于经典有机法、常规Chelex-100法和改良有机法,其差异具有统计学意义.结论 与有机法和常规Chelex-100法相比,高质量试剂盒类方法更有利于法医学检材的DNA抽提.     

磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用

磁珠DNA自动提取系统是将磁珠分离技术与DNA自动提取工作站结合运用,以达到高效提取DNA的目的,它具有操作时间短、准确性高、检材用量少等特点,特别适用于大批量生物检材的快速提取,是目前主流的DNA自动化提取方法。本文对磁珠DNA自动提取系统的基本组成、工作原理、操作流程及其在法医检验领域中的应用等进行了综述,并对该系统的发展前景进行了展望。     

全自动核酸提取仪联合真空浓缩仪在法医学中的应用

目的 探讨全自动核酸提取仪联合真空浓缩仪在法医学DNA提取中的应用价值.方法 采集人外周静脉血稀释成40、80、120、160、200、240、280和320倍的梯度样本,并对每一梯度的样本分别进行无抑制剂、加黑机油、加铁锈、加果酸、加锡纸、加靛蓝6种处理.应用全自动核酸提取仪对上述样本进行DNA纯化提取,提取后的DN...     

不同前处理方法提取牙齿DNA的比较

目的对三种不同前处理方法提取的牙齿DNA浓度进行比较,建立一种操作简便、经济适用、浓度较高的牙齿DNA提取的前处理方法。方法选择源自7具尸体的共21颗磨牙,每具尸体的3颗磨牙随机按牙屑法、球磨法、液氮研磨法进行前处理,并分别称取50 mg,采用Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统提取DNA,对三种方法提取的DNA浓度和STR分型结果进行比较。结果牙屑法、球磨法和液氮研磨法提取的DNA质量浓度分别为0.055 6~1.989 1、0.036 6~1.175 6和0.037 8~1.249 0 ng/μL,牙屑法提取的DNA质量浓度较高(P0.05),且STR分型成功率高。结论牙屑法结合Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统是提取牙齿DNA的一种切实可行的方法,可应用于法医学鉴定实践中。     

组织切片DNA提取的探讨

在医患关系纠纷中,病理组织切片经常被作为至关重要的证据,但对它的检验是目前法医DNA检验的难点。因样本制作固定的时间、保存环境等不同因素的影响,病理组织切片DNA检出率并不高。本文从实际检案角度出发,详细介绍了病理组织切片DNA提取的过程,并分析了其可能影响因素。     

应用激光生物检材发现仪提取痕量DNA1例

1案例资料 2013年某日,本地区村民何某家中的一只保险箱被窃。在中心现场提取到口罩一副,怀疑为犯罪嫌疑人遗留,要求进行DNA检验。1.1 DNA检验口罩在自然光下观察,未见可疑斑迹。将检材置于暗室,使用TL-445B台式激光生物发现仪（Tech-Long国际股份有限公司）用445nm纯蓝激光激发,佩戴专用眼镜则见可疑斑迹处出现荧光反应（图1）。     

利用AutoMate Express~(TM)自动化法医DNA提取系统提取骨骼及牙齿DNA

目的探讨建立骨骼及牙齿DNA自动化提取的新方法。方法将33份骨骼及15份牙齿样本分别用冷冻研磨和手工处理两种方法研磨成粉,采用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统提取DNA并定量。结果 AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统能够在3h左右完成骨骼、牙齿DNA的提取,两种方法处理的骨骼样本所得DNA质量浓度差异无统计学意义。冷冻研磨处理的骨骼和牙齿样本均获得了较好的STR分型结果,且牙齿样本所得DNA质量浓度高于手工提取所得。结论应用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统是自动化提取骨骼、牙齿DNA的一种新方法,可应用于法医实际案件检验。     

骨骼DNA提取与检测的法医学研究进展

骨骼DNA提取与检测是大规模灾难受害者、失踪人员以及刑事案件法医DNA鉴定过程的重要组成部分。骨骼的部位、类型以及温度、湿度、微生物、酸碱度等因素都会影响骨骼中DNA的“质”和“量”,从而影响检测的准确性。随着科技的发展,短串联重复序列基因座、DNA检测试剂盒以及单核苷酸多态性技术、线粒体DNA检测技术不断进步,提高了骨骼DNA的提取与检测的成功率。因此,了解影响DNA提取与检测的骨骼类型以及环境因素,选取适当的检测方法和手段显得尤为重要,通过重点综述影响骨骼DNA质量的环境因素以及骨骼DNA提取与检测手段的研究进展,以期为法医学领域使用骨骼作为检材时遇到的问题提供指导。     

特殊检材的DNA检验3例

法医物证鉴定中,较常见的生物学检材有现场血痕、精斑、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及在抵抗中遗留在当事人指甲缝中的生物成分DNA[1].但在实际工作中,发现提取的生物检材复杂多样,对于一些疑难检材在DNA提取方面便成为难点,而这些特殊检材的成功分析往往对案件的定性和侦破起着至关重要的作用.现将3个案例中4份特殊检材的DNA检验报道如下.     

磁珠法提取粪便检材DNA

正疑难生物检材的发现、提取和检验越来越多地应用到了各类刑事案件的侦破中,并发挥了良好的作用。现场粪便检材因其中含有的抑制物种类繁多并且不易去除,检验成功率不高。本研究采用磁珠分离试     

胎盘粉DNA分析1例

1案例1.1简要案情某年3月5日,某县发生一起强奸致孕案,之后受害人姚某在私人诊所内非法实施引产手术,诊所私自截留胎盘进行干燥、粉碎、加工处理并作为保健品原料贩卖。最后警方根据线索追回疑似受害人姚某引产所留部分胎盘粉,为明确该胎盘粉是否为受害人所留,要求对胎盘粉进行检验。     

应用磁珠法提取陈旧骨骼DNA

目的探讨采用磁珠法提取陈旧骨骼DNA的可行性。方法取经土埋或室外暴露下存放1~5年不等的10根长骨,经水洗、刮净,钻取骨密质骨粉3g,应用EQ1000磁珠试剂盒提取DNA,经复合扩增,ABI 3130XL基因分析仪电泳分离,进行STR分型检测。结果 10根长骨均获得完整的STR分型,电泳图谱基线干净,除个别大片段基因座外,等位基因荧光信号分布均衡性较好。结论采用磁珠法提取陈旧骨骼的DNA,能满足分型要求,可在实际检案中选用。     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。     

差异提取试剂盒在混合斑DNA提取中的应用

目的评估差异提取试剂盒对混合斑样本中的精子和上皮细胞DNA分离提取的有效性。方法采用差异提取试剂盒,选择性裂解精细胞和上皮细胞,结合磁珠法分别对人为控制条件下制备的模拟混合样本和案件中的混合斑检材进行精细胞DNA和上皮细胞DNA的分离提取。对所提取的DNA进行定量分析和STR分型。结果该试剂盒能从精子和上皮细胞不同比例的混合斑中提取出高纯度的精细胞和上皮细胞DNA。结论该差异提取试剂盒适用于性侵害案件中混合斑检材的DNA提取。     

MPure-12全自动核酸纯化仪与Chelex-100法的比较CSCD

目的通过对DNA含量不同的血痕和多种类型生物学检材进行DNA提取和STR分型检测,探讨MPure-12全自动核酸纯化仪(MPure-12法)在DNA提取中的法医学应用价值。方法收集血痕、精斑、唾液等9种类型的生物学检材,应用MPure-12法和传统Chelex-100法提取DNA,经过PCR扩增和电泳,获取STR分型图谱。结果 MPure-12法对发根、口香糖、烟蒂、肌肉组织、唾液斑、血痕、精斑这些检材能够成功分型,唾液出现了个别等位基因丢失现象,接触拭子分型较差。Chelex-100法对血量为20μL、15μL、10μL、5μL、1μL制成的血痕均有完整分型结果,MPure-12法在血量为1μL时出现等位基因丢失现象。结论 MPure-12法适用于一定浓度血样的检验,而对于微量血样,Chelex-100法提取DNA的效果可能更优。仪器应用于DNA提取具有操作简单、快速、提取效率高,分型成功率高,减少人为污染等优势。     

3种方法联合运用提取人体脱落上皮细胞DNA

目的寻求提高法医物证检验中附有人体脱落细胞载体检材的DNA检出率的方法。方法根据案件检材的具体条件．选择3种提取方法即Chelex-100法、Chelex-100联合有机法和Chelex-100联合磁珠法。结果采用了分步提取DNA法,可充分、有效地提取微量DNA,提高了人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。结论根据第一步提取方法的检测结果,来调整下一步的提取策略,如是否加以纯化浓缩,可增加人体脱落上皮细胞有效DNA的检出率。     

二次消化结合磁珠法提取腐败组织DNA

目的 研究二次消化结合磁珠法对3种腐败组织DNA的提取效果.方法 采用二次消化结合磁珠法对用常规磁珠法提取DNA失败的91例高度腐败尸体的软骨、指(趾)甲、关节囊组织提取DNA,QuantifilerTM试剂盒进行DNA定量,用SinofilerTM或MinifilerTM试剂盒进行STR检测分型. 结果 91例高度腐...