马齿苋对热应激小鼠空肠HSP70及肝脏抗氧化能力的影响

旨在探究马齿苋水提物(aqueous extract of Portulaca oleracea L.)对热应激小鼠空肠HSP70含量及肝脏抗氧化能力的影响。选取40只昆明种小鼠,随机分为4组:空白组(C)、热应激组(HS)、马齿苋水提物组(AEP)、维生素C组(Vc),每组10只。热应激组于40℃±1℃环境下每天处理0.5 h,其余时间置于30℃±1℃条件下,C组放置于25℃±1℃,连续6 d后,将小鼠置于25℃±1℃之环境给药治疗7 d。在给药治疗开始后第3天和第7天眶窦采血,处死后采集小鼠空肠、肝脏,测定各组小鼠血清HSP70含量、肝脏SOD、MDA及GSH-Px含量及空肠黏膜HSP70 mRNA表达量的变化。结果显示,与C组比较,热应激可显著提高小鼠空肠黏膜HSP70 mRNA表达量(P<0.01),提高肝脏SOD、MDA和GSH-Px的活性水平(P<0.01)。与HS组比较,给予马齿苋水提物后,可有效降低热应激小鼠血清HSP70含量和空肠黏膜HSP70 mRNA表达量(P<0.01)及肝脏MDA的活性水平(P<0.05),但对SOD和GSH-Px的含量无显著影响(P>0.05)。结论:马齿苋水提物能够通过降低热应激小鼠的氧化应激反应,减少热应激小鼠体内HSP70的表达量,达到良好的抗热应激效果。     

热应激对植入前牛胚胎发育的影响

采集屠宰母牛卵巢和输卵管中的卵母细胞,进行体外受精,受精卵继续在体外培养。将发育3 d的牛胚胎于42℃下分别培养0．5、2．0和4．0 h,与对照组(39℃)牛胚胎相比,接触最高热应激(42℃,4 h)处理的胚胎,约50%的胚胎发育速度明显下降。而处理组牛胚胎发育到第9d的囊胚数、细胞数及内细胞团与滋养外胚层比率与对照组差异不显著(P>0．05)。表明,温度升高对牛囊胚期胚胎的发育没有明显损害。对9 d的囊胚进行基因性别分析发现,正常体外培养的雄胚发育快于雌胚,而在发育第3d受42℃热应激后,到囊胚期生存的胚胎性别比率发生改变,雌胚比率高于雄胚,表明雌性胚胎比雄性胚胎具有更强的抗热应激能力。     

热应激对猪原代睾丸支持细胞FasL与TGF-β基因表达的影响

为了探讨高温条件对猪睾丸支持细胞(stertoli cells)免疫豁免相关基因的影响,笔者分离培养猪原代sertoli细胞,利用差速贴壁法进行纯化,经sertoli细胞标记基因核酸与蛋白的检测鉴定,分离的原代sertoli细胞倍增时间为27.5 h。对原代sertoli细胞分别进行40℃与43℃热应激处理,并给予不同的热处理时间(0.25、1、6 h)与热应激恢复时间(0.5、1、2 h)处理,检测细胞内及上清中FasL与TGF-β基因的表达与蛋白的分泌差异。结果表明,热应激处理会使原代sertoli细胞FasL与TGF-β基因的表达量下降,但蛋白的分泌均上调,不同的热处理温度与时间并未有显著差异。热应激后复温处理对细胞内基因的表达有恢复作用,但是对细胞上清蛋白的分泌并没有显著影响,恢复时间在0.25 h～2 h内没有显著差异。     

虎杖苷对热应激大鼠空肠消化吸收、抗氧化和屏障功能的影响

为研究虎杖苷(PD)对热应激大鼠模型空肠消化吸收、抗氧化和肠屏障功能的影响,采用2×2设计,将24只雄性SD大鼠随机分为4组(n=6):室温处理+灌胃羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液组、室温处理+灌胃PD溶液组、热应激处理+灌胃CMC-Na溶液组、热应激处理+灌胃PD溶液组。热应激组每天40℃处理1.5 h,连续3 d。结果显示,在热处理后大鼠空肠绒毛高度、绒毛高度隐窝深度比值、蔗糖酶和麦芽糖酶活性下调。热处理还降低了空肠GSH含量和T-AOC活力;PD处理提高了GSH含量和SOD基因表达量,降低了GSH-PX活力。热处理降低了CLDN2基因表达量;PD处理增加了CLDN2、CLDN3、ZO-1基因表达量。热处理提高了空肠组织TLR4、NF-κB、TNF-α和SIRT1基因表达量及细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α含量;PD处理提高了SIRT1基因表达量,降低了IL-10含量。结果表明,虎杖苷具有改善热应激大鼠肠道氧化应激和屏障损伤的积极作用。     

过表达YY1对水牛早期胚胎发育及DNA甲基化的影响

为了解阴阳因子1(YY1)在水牛植入前胚胎中的表达规律及其对早期胚胎发育和DNA甲基化的影响,本研究通过受精卵卵胞质注射的方法,将线性化处理的过表达YY1质粒注射到体外受精8～10 h的水牛受精卵中,分析其对水牛早期胚胎发育的影响,并在胚胎发育各个时期检测该基因的表达。同时通过qRT-PCR检测过表达YY1对DNMT1表达的影响来研究DNA甲基化水平。qRT-PCR结果表明,YY1和DNMT1在水牛植入前胚胎的表达模式呈相反的趋势,YY1的表达随着胚胎的发育逐渐增高,囊胚期达到最高,而DNMT1基因在桑葚胚前表达较高,囊胚期表达最低。与空白对照组相比,注射25μg/mL质粒对水牛囊胚发育率无显著影响(P0.05),取得较高的表达EGFP囊胚(33.3%),显著高于5、15、50μg/mL处理组(P0.05);处理组与空白对照组的胚胎分裂率、囊胚发育率、囊胚基因表达率差异均不显著(P0.05)。过表达YY1胚胎在体外受精12 d后仍有囊胚产生。与空白对照组相比,处理组各时期胚胎中YY1和DNMT1表达量均有明显的增加。以上结果表明,过表达YY1对体外受精早期胚胎发育没有影响,但会延迟囊胚的形成。     

热应激对猪睾丸Spo11表达与定位及其诱导DNA双链断裂的影响

为探究热应激对猪睾丸Spo11、DNA双链断裂分子标记γH2AX和DNA重组修复分子标记Rad51表达和定位的影响,笔者构建了环境热应激（37℃环境温度,每日加热3 h,连续7 d）和睾丸局部热应激（42℃,局部阴囊加热1 h）的猪动物模型,未处理组猪睾丸作为对照。通过免疫组织化学染色、Western-blot和qRT-PCR等方法检测Spo11、Rad51和γH2AX在猪睾丸中的表达和定位。免疫组化结果显示,对照组生精小管内可见各级生精细胞,Spo11和Rad51主要定位于初级精母细胞的细胞核,γH2AX免疫阳性染色见于初级精母细胞的细胞核。与对照组相比,环境热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11和γH2AX免疫阳性着色无明显差异,Rad51免疫阳性着色较弱;局部热应激组初级精母细胞的细胞核Spo11、Rad51和γH2AX免疫阳性着色较强,细胞定位未发生变化。Western-blot和qRT-PCR结果显示,与对照组相比,环境热应激组Spo11蛋白、m RNA和γH2AX蛋白水平均无显著差异,Rad51蛋白和m RNA表达水平均显著降低（P<0.01）;局部热应激组Spo11...     

弓形虫RH株热应激蛋白40基因的克隆与原核表达

为研究弓形虫热应激蛋白40(TgHSP40)的生物学特性,采用RT-PCR方法从弓形虫RH株中扩增出TgHSP40基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)后转化入表达菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,应用Western-blot对重组蛋白的反应原性进行分析。结果显示,重组菌可表达出分子质量约46ku的重组融合蛋白,在37℃、IPTG浓度为1.0mmol/L、诱导6h的情况下表达效果最好。重组蛋白经纯化后进行的Western-blot分析证实,表达、纯化的弓形虫RH株HSP40蛋白具有良好的反应原性,与弓形虫基因Ⅰ型的RH株、基因Ⅱ型的PRU株以及基因型为ToxoDB9的TgC7株和GJS株的阳性血清均可发生特异性反应,预期可作为弓形虫病ELISA诊断方法的候选抗原。本研究结果为弓形虫病新型诊断方法的建立奠定了基础。     

镉对小鼠生精细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组,每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6 mg/kg(按体重给药),对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9 d用原位末端标记法(TUNEL)测定睾丸内生精细胞的凋亡率,并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示,各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高,与对照组相比差异显著(P<0.05),并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升,而bcl-2基因的表达水平明显下降。表明,镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡,其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。     

ZEA和DON及其联合作用对小鼠T淋巴细胞Fas/FasL凋亡信号通路的影响

为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其联合作用免疫毒性的机理,试验研究了ZEA、DON及联合作用对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠离体T淋巴细胞细胞凋亡和Fas/FasL凋亡信号通路的影响。从BALB/c小鼠脾分离原代T淋巴细胞,分别设细胞空白组、刀豆蛋白A对照组(Con A组)、Con A+不同浓度ZEA染毒组、Con A+不同浓度DON染毒组、Con A+不同浓度ZEA与DON联合染毒组,染毒时间为24 h,利用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western-blot检测Fas、FasL、Cleaved-caspase8、Bax、Bcl-2等关键蛋白表达情况。结果显示,与细胞空白组相比,Con A组细胞凋亡率上升但差异不显著(P0.05);与Con A组相比,各染毒组细胞凋亡率均上升,多组出现显著或极显著差异(P0.05或P0.01);联合处理组较单一毒素处理组细胞凋亡率升高,经CompuSyn软件拟合,ZEA和DON以20∶1联合作用时协同效应最为明显。Con A组与细胞空白组相比,Bax/Bal-2值显著降低(P0.05)、Fas、FasL、Cleaved-caspase8等蛋白的表达量无明显变化(P0.05);与Con A对照组相比,各染毒组Bax/Bal-2、Fas、FasL、Cleaved-caspase8等蛋白的表达量均上升,且呈剂量依赖性,多组出现显著或极显著差异(P0.05或P0.01);联合染毒组较单一染毒组各蛋白表达量均升高。结果表明, ZEA、DON均可通过Fas/FasL凋亡信号通路诱导T细胞的凋亡,ZEA与DON联合可发挥协同效应。     

不同化学激活剂对小鼠卵母细胞的激活效果

为探讨不同激活剂的卵母细胞孤雌激活效果及激活胚体外发育情况,用乙醇、Ca-A23187、SrCl2、6-DMAP及CB分别对小鼠卵母细胞进行了激活处理。结果显示,70 mL/L乙醇刺激小鼠卵母细胞时,以激活5~7 min的激活效果及孤雌胚发育较好,桑囊胚发育率可达29.11%;用SrCl2激活小鼠卵母细胞时,6~10 mmol/L为最佳处理浓度,3~6 h为最佳激活时间,桑囊胚发育率可达16.67%;以70 mL/L乙醇激活5 min,再用2 mmol/L 6-DMAP 5μg/mL CB激活3 h效果最佳,桑囊胚发育率高达35.77%。研究证实,小鼠卵母细胞经乙醇、6-DMAP和CB等复合激活后能较好地发育。     

2010年四川省黑热病疫区利什曼原虫家犬感染情况的调查

为了解四川省黑热病疫区黑水县、汶川县、九寨沟县、茂县和北川县2010年利什曼原虫的家犬感染情况,采用荧光定量PCR反应检测自上述地区采集的584头份犬前肢静脉血样本。结果显示,总阳性检出率为18.1%,其中黑水县25.3%、汶川县24.7%、九寨沟县24.6%、茂县12.3%、北川县8.3%。按照性别、年龄差异将样本分组后对检测结果进行数据统计分析、比较组间差异,结果显示性别组阳性检出率没有显著差异(P>0.05),雄性高于雌性;年龄组差异显著(P<0.05),1岁以上犬易感。检测结果对正确预测四川省黑热病疫区疾病流行趋势,保障人民健康安全和公共卫生安全具有指导意义。     

印尼＇2005：政治较稳定 经济好转

2004年9月20日印尼总统直选第二轮投票,苏西洛·班邦·尤多约诺(Susilo Bambang Yudhoyono)获60.2%多数选票当选为印尼第六任总统,10月20日宣誓就职并组建"团结内阁".一年多过去了,这个世界上第四人口大国和穆斯林人数最多国家的总统不负众望,理顺了政府与议会的关系,克服了世纪海啸大灾难,在国内掀起了反贪运动,举办了第二次亚非国家峰会,与中国建立了战略伙伴关系,经济重建初见成效.     

2002年亚太地区安全形势

亚太地区的安全形势因大国关系的改善而趋于缓和 ,但仍面临着恐怖主义活动、印巴冲突、朝鲜核问题、台湾问题等潜在和现实的安全隐患。美中俄及亚太地区各国加强安全领域内的协商与合作 ,以确保亚太地区的和平与稳定。     

External interventions in secessionist conflicts in Europe in the 1990s

Secessionist conflicts have become a major feature of the European political landscape in the 1990s. International response to them have varied from full‐scale military interventions to half‐hearted mediation, generally providing for freezing of most active hostilities and for addressing most urgent humanitarian needs. Europe in the 1990s saw more ‘peace’ operations on its soil than any other region in the world, but still was not able to find a satisfactory answer. Kosovo is a tragic illustration of that, and the deployment of NATO troops after a massive use of airpower still lacks the framework political plan and appears very tentative and opportunistic. Several specifically European factors define the perspective of a possible new wave of secessionist conflicts in the region.     

2005年的拉丁美洲形势

2005年拉美形势稳中有进,进中有亮点.政治上,整个地区局势基本平稳,左派执政阵营进一步扩大;经济上,保持中高速增长势头,新一轮增长周期拉长;社会上,贫困状态有所改善,但不安宁因素犹存;外交上,多元外交活跃,联合抗美意识趋强,拉中关系步入历史最佳时期.     

联合自强促稳定 自主探索求发展 --2004年非洲形势综述

20 0 4年 ,非洲总体形势好转 ,非盟的凝聚力增强 ,非洲在索马里、苏丹达尔富尔、大湖地区联合自强的努力均取得重要进展 ,解决非洲和平与安全这一首要课题探索出较为成功的模式。各国政权建设注重法治化 ,多党大选制度在非洲初步扎根 ,老一辈领导人重视稳妥交权 ,新一代领导人自主探索符合国情的发展道路。各国经济的发展不均衡 ,产油国和资源大国受到更多关注 ,一体化进程缺乏内动力 ,尼日利亚、南非、埃及三国竞争安理会常任理事国席位给非洲大国关系带来新的复杂因素。非洲国家积极利用数量优势、靠集体声势、借助多边机制与大国周旋 ,西方大国也相应调整政策 ,继续在减免债务、增加援助等方面出台新举措。非洲形势发展中积极因素增加 ,但总体上仍处于量的艰难积累阶段     

Governance in Central Asia: national in form,Soviet in content

American policy toward Central Asia is based on a serious misperception of the region's problems and potential for non‐violent political change. The reality is that the five Central Asian states are not post‐Soviet but neo‐Soviet. The former Communist Party bosses retain the nomenklatura system of centralised and hierarchical rule. The regimes also resemble the clan‐based autocracies of post‐colonial Africa, but with the mechanisms of the modern police state. These countries face all the challenges common to the Third World, but are less amenable to positive external influences or to the development of pluralist politics and civil society. While the regimes have mixed prospects for retaining power, none is likely to succeed in economic development or in responding to social change.     

经济继续衰退 改革面临困境——2002年拉美经济形势述评

20 0 2年 ,拉丁美洲和加勒比地区 (以下简称拉美地区 )的经济形势可以概括为 :经济继续衰退 ,改革面临困境。根据联合国拉美经济委员会最近发表的年度总结报告 ,拉美地区经济在上年仅增长 0 .4%的基础上 ,2 0 0 2年出现负增长 ( -0 .5% ) ,为最近 2 0年来首次出现负增长。人均国内生产总值 ( GDP)为 -1 .9%。阿根廷、乌拉圭和委内瑞拉的 GDP分别下降 1 1 %、1 0 .5%和 7% ,是衰退最严重的国家 ;秘鲁、多米尼加和厄瓜多尔 3国的增长率超过3 % ,算是拉美地区的佼佼者 ;其他国家的增长率都不到 3 % ,其中巴西和墨西哥两个地区大国分别只增长…     

2004年国内学术界对拉丁美洲研究综述

为推动拉美研究事业的发展 ,加深拉美学者间的沟通和了解 ,从 2 0 0 5年起本刊特设“拉美研究在中国”这一栏目。它以《国内学术界对拉丁美洲研究综述》的形式对上一年的研究情况作一总结 ,载于每年的第 2期。由于水平有限、收集的资料不够全面、时间比较仓促等原因 ,《2 0 0 4年国内学术界对拉丁美洲研究综述》一稿肯定挂一漏万 ,在此希望得到同行和读者的谅解。对如何办好这一栏目 ,欢迎大家提出批评和建议。