几种中药成分的免疫增强活性及其作用效果

测定了黄芪多糖等9种中药成分对正常小鼠脾和外周血淋巴细胞增殖反应的影响,并观察了这些中药成分对兔瘟组织灭活疫苗的增强免疫效果。结果表明,人参皂甙、黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖和蜂胶黄酮能显著增强伴刀豆球蛋白(ConA)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠淋巴细胞增殖,提高免疫兔抗体水平和延长抗体持续时间;板蓝根多糖能增强ConA和LPS的诱导活性,蜂胶多糖能促进ConA的诱导活性,黄芪皂甙和淫羊藿黄酮能促进LPS诱导的淋巴细胞增殖,但它们都不能提高兔瘟组织灭活疫苗的免疫抗体水平。     

中药对鸡新城疫灭活疫苗免疫效果的影响

手工乳化制备含 2 0 g/L人参皂甙、4 0g/L海藻多糖、4 0 g/L黄芪多糖、4 0 g/L芦荟多糖的鸡新城疫灭活油乳剂疫苗 ,注射免疫 2 1日龄粤黄鸡 ,即日起连续 3d按体重胸肌注射环磷酰胺 4 0mg/kg ,每日 1次 ;免疫后第 7、14、2 1、2 8、4 2d采血检测鸡新城疫HI抗体效价 ,免疫后第 14、2 8d采血检测红细胞CR1受体 (RBC CR1)花环率、免疫器官指数和血清超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果表明 ,人参皂甙、海藻多糖在免疫后期能提高鸡新城疫HI抗体效价 ,而黄芪多糖、芦荟多糖作用不明显 ;人参皂甙、黄芪多糖、芦荟多糖能显著提高鸡RBC CR1花环率 (P <0 .0 5 ) ,海藻多糖作用不显著 (P >0 .0 5 ) ;海藻多糖、芦荟多糖能显著提高血清SOD活性 (P <0 .0 5 ) ,人参皂甙、黄芪多糖作用不显著 (P >0 .0 5 ) ;人参皂甙、海藻多糖能显著提高免疫器官指数 (P <0 .0 5 ) ,黄芪多糖、芦荟多糖作用不显著 (P >0 .0 5 )。     

硒化修饰太子参多糖对巨噬细胞免疫活性的影响

为了探究硒化太子参多糖对细胞免疫活性的影响,运用醇沉水提获取太子参粗多糖,Sevage法除蛋白,DEAE-52纤维柱进行粗糖纯化,然后运用亚硒酸钠法,在不同时间、不同温度和不同亚硒酸钠浓度条件下对太子参多糖进行三因素水平的正交硒化修饰[L9(34)],从而得到了9种硒化太子参多糖,分别为sRPP1~sRPP9。运用MTT法比较了这9种硒化多糖对RAW264.7巨噬细胞体外增殖的影响,选出了效果较好的4种硒化多糖:sRPP2,sRPP3,sRPP8,sRPP9。通过在细胞中分别添加这4种硒化多糖,检测硒化多糖对细胞免疫活性的影响,结果显示,这4种硒化太子参多糖促进了巨噬细胞对中性红的吞噬能力,NO产生量以及IL-6、TNF-α分泌。结论,硒化修饰的太子参多糖能够提高巨噬细胞的免疫活性,其中sRPP3活性最强,可以作为新型免疫增强剂的候选药。     

黄芪多糖对冷冻前后猪精液中过氧化氢酶活性及其mRNA表达的影响

为了研究黄芪多糖对猪精液冷冻前后过氧化氢酶(CAT)活性及其mRNA表达的影响,用含不同质量浓度(0、0.2、0.4、0.6g/L)黄芪多糖的稀释液稀释美系长白公猪精液,用0.5mL细管分装冷冻,分别检测平衡后及冻融后精液中CAT活性和mRNA表达量的变化。结果显示,0.4g/L黄芪多糖能显著提高冷冻保存的猪精液中CAT活性及平衡后CAT mRNA表达(P0.05),同时冻融后CAT mRNA表达在冷冻组中最高(P0.05)。结果表明,冷冻前后猪精液中CAT活性及平衡后CAT mRNA表达的显著提高是黄芪多糖改善猪精液冻后质量的主要原因之一。     

茯苓多糖对雏鸡细胞免疫活性的影响及其抗肿瘤作用

给 1日龄AA雏鸡经腹腔注射马立克氏病病毒 (MDV)强毒株 ( 0 .2mL/只 ) ,并从当日开始给试验组雏鸡以 3个剂量连续肌肉注射茯苓多糖 1周 ,分别于 7、14、2 8、4 2、5 6日龄取脾组织 ,制备脾细胞悬液 ,用ELISA法检测了雏鸡淋巴细胞转化率、NK细胞活性及M活性 ,并与对照组比较。结果表明 ,3个剂量均可显著提高雏鸡的淋巴细胞转化率、NK细胞活性及M活性 ,且中剂量组效果优于其他 2个剂量组。证实茯苓多糖能提高MDV强毒株感染雏鸡的细胞免疫活性 ,并具有抗肿瘤作用     

九种中药成分对体外培养小鼠淋巴细胞功能的影响

为进一步探索黄芪多糖等9种中药成分免疫增强活性的作用机理并比较各成分之间免疫增强活性的强弱,在体内试验的基础上,用脾淋巴细胞增殖反应和抗体夹心酶联免疫吸附试验测定了它们对体外培养的小鼠淋巴细胞功能的影响。结果表明,人参皂甙、蜂胶黄酮、黄芪多糖、淫羊藿黄酮、淫羊藿多糖都能显著地直接或协同ConA刺激脾和外周血淋巴细胞增殖,也能显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性和显著升高体外培养的小鼠脾淋巴细胞产生的IgG水平;当归多糖能协同ConA和LPS的诱导活性,提高小鼠脾淋巴细胞体外培养系统的IgG水平;黄芪皂甙能直接和协同LPS刺激淋巴细胞增殖,板蓝根多糖则仅能促进LPS的诱导活性,蜂胶多糖的作用则均不明显。     

黑果枸杞花青素通过调节Ca2+稳态对低氧诱导的H9c2大鼠心肌细胞的保护作用

本课题组前期研究发现,低氧下H9c2大鼠心肌细胞呈现凋亡和坏死的形态,黑果枸杞花青素(Lycium ruthenicum Murray anthocyanins,AC)能够有效保护低氧下H9c2大鼠心肌细胞的形态,缓解低氧诱导H9c2大鼠心肌细胞的凋亡。本研究通过构建H9c2心肌细胞体外低氧模型,检测H9c2心肌细胞肌浆网钙ATP酶(SERCA)活性、Ca²⁺浓度和Ca²⁺信号通路相关因子钙敏感受体(CASR)、质膜Ca²⁺ATP酶(PMCA)、钙调蛋白(CaM)和SERCA的mRNA和蛋白表达,探究黑果枸杞花青素通过调节Ca²⁺稳态对H9c2心肌细胞低氧损伤的影响。结果显示,与常氧组相比,低氧可极显著下调SERCA活性(P<0.05),极显著上调Ca²⁺浓度(P<0.01);低氧环境下,用黑果枸杞花青素处理后能够极显著上调SERCA活性(P<0.01),显著下调细胞内Ca²⁺浓度(P<0.05)。与常氧组相比,低氧可显著上调CaM...     

黄芪提取物对鸡生长发育及免疫功能的影响

对FBC0、FJC0、精制多糖和变性蛋白质 4种黄芪提取物进行琼脂糖弥散试验 ,检测其对6株供试细菌的抗菌活性 ;将 4 0只星杂蛋雏鸡分为 5组 (1个对照组和 4个试验组 ) ,全部进行新城疫疫苗常规点眼、滴鼻免疫 ,从 7日龄起对试验组鸡饮服 4种黄芪提取物溶液 6周 ,每周进行心脏采血 ,用血凝抑制法 (HI)测定血清NDV抗体水平 ;每周称量体重 ,计算增重率 ;扑杀试验鸡 ,取胸腺、脾、腔上囊等免疫器官称量 ,计算免疫器官指数。试验结果显示 ,4种黄芪提取物的抗菌活性均为阴性 ,NDV血清抗体水平、增重及免疫器官指数等各项指标试验组均明显高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。说明黄芪的各种成分对鸡的生长发育及免疫功能均有不同程度的促进作用     

野生鸡枞菌多糖的提取及其免疫活性分析

采用水提醇沉法获得鸡枞菌多糖,并对其总糖含量进行了测定;研究了不同剂量的鸡枞菌多糖对正常小鼠的免疫器官指数、血清溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬功能及脾淋巴细胞增殖等免疫指标的影响。结果:鸡枞菌多糖得率为6.27%,总糖含量为94%;根据体重腹腔注射20mg/kg的鸡枞菌多糖可明显提高正常小鼠的溶血素水平(P<0.01)、脾指数(P<0.01)、胸腺指数(P<0.05)和巨噬细胞吞噬功能(P<0.01);体外试验中,与空白对照组相比,25μg/mL的鸡枞菌多糖可促进体外脾淋巴细胞增殖(P<0.05),12.5μg/mL鸡枞菌多糖对ConA或LPS引起的脾淋巴细胞增殖均有显著的协同作用(P<0.01)。结果表明,鸡枞菌多糖能显著增强小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,有望成为一种新的天然免疫增强剂。     

羟乙基化猴头菇多糖对小鼠树突状细胞和自然杀伤细胞相互作用的影响

本研究旨在制备羟乙基化猴头菇多糖,考察羟乙基化猴头菇多糖对树突状细胞(DCs)与自然杀伤细胞(NKs)相互作用的影响。以环氧乙烷为羟乙基化试剂,对猴头菇多糖进行羟乙基化。并采用RT-PCR和Western-blot探索猴头菇多糖(HEP)和羟乙基化猴头菇多糖(HE-HEP)分别与DCs和NKs共同孵育后对细胞免疫因子mRNA表达的影响。结果表明,HEP和HE-HEP可以使IL-12、IL-15、IL-18、NF-κB、NKG2D、TNF-α、IFN-γ和GM-CSF的mRNA表达上调。31.25 g/mL、62.5 g/mL的HE-HEP对IL-12、IL-15、IL-18、NF-κB的mRNA表达方面的效果优于HEP,并且62.5 g/mL、125 g/mL的HE-HEP对NKG2D、TNF-α、IFN-γ和GM-CSF的mRNA表达方面的效果优于HEP。结果表明,羟乙基化修饰可以显著增强猴头菇多糖对DCs和NKs之间的相互作用,提高其免疫活性。     

蕨麻多糖对小鼠免疫细胞信号转导相关分子的影响

以50、100、200、400μg/mL的蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞在体外分别孵育4、8、12、24 h,测定了细胞培养液中一氧化氮(NO)、6-酮-PGF1α及血栓素B2(TXB2)的水平和细胞内cGMP的含量,测定了加入蕨麻多糖后2、5、10 min时细胞内游离钙离子(Ca2 )的浓度。结果显示,蕨麻多糖能明显促进小鼠脾淋巴细胞分泌一氧化氮,显著升高小鼠脾淋巴细胞内cGMP及钙离子的水平,对细胞内TXB2的产生有抑制作用,能够调整花生四烯酸体系向6-酮-PGF1α一端偏移。提示蕨麻多糖能够增强脾淋巴细胞的免疫作用。     

硒对汞致雏鸡肝功能损伤的拮抗作用

选用健康伊沙褐雏鸡250只,分为对照组、汞中毒组、3个水平的硒保护组,研究汞对血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影响以及硒与汞之间的相互作用效应.试验结果表明,汞可使血清中AST、ALT、ALP活性显著升高(P＜0.01),使肝组织中GSH-Px活性降低(P＜0.01),引发肝组织脂质过氧化,致使肝组织中MDA含量显著增高(P＜0.01),且有时间-效应关系;硒可使血清中AST、ALT、ALP活性显著降低(P＜0.01),使肝组织中GSH-Px活性显著升高(P＜0.01),阻止肝组织脂质过氧化,致使肝组织中MDA含量显著降低(P＜0.01),且有时间-效应关系.从而说明汞中毒损伤肝功能;硒对汞致肝功能的损伤具有拮抗作用.     

冷应激对雏鸡下丘脑NO代谢的影响

为探明冷应激对雏鸡下丘脑NO代谢的影响,以公雏鸡为实验动物,进行急性(1 h、6h及12 h)与慢性(5 d1、0 d及20 d)冷应激处理(12℃±1℃),检测了下丘脑NO含量i、NOS与T-NOS活性以及iNOS基因mRNA的表达水平。结果,急性应激时,NO含量i、NOS与T-NOS活性以及iNOS基因mRNA的表达水平均随应激时间的延长逐渐降低;慢性应激时,NO含量i、NOS与T-NOS活性以及iNOS基因mRNA的表达水平均随应激时间的延长逐渐升高。结果表明,冷应激可导致下丘脑NO的代谢发生改变,不同程度的冷应激对NO代谢产生的影响也不同。     

参芪多糖口服液对鸡咽部黏膜免疫功能的影响

本试验旨在研究参芪多糖口服液对注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CY)的鸡咽部黏膜免疫功能的保护作用。把180只白羽种蛋鸡公雏随机分为6组:空白组、CY模型组、CY+低剂量组、CY+中剂量组、CY+高剂量组、CY+左旋咪唑组(阳性对照组),每组各30只。除空白组外,另外5组在试验开始后第10天连续3 d腹腔注射80 mg/(kg·d)的环磷酰胺,同时在第10~20天、第25~35天给药,空白组和CY模型组灌服蒸馏水,CY+左旋咪唑组灌服盐酸左旋咪唑20 mg/kg,多糖组分别灌服0.25、0.50、1.00 m L/kg的参芪多糖口服液,在第14天和第28天时给各试验组注射新支流三联苗。第21天、第42天分别从每组中随机抽取7只鸡,进行免疫器官胸腺、脾和法氏囊指数的测定,并检测血淋巴细胞含量以及新城疫和传染性支气管炎抗体水平的变化,再考察鸡咽部黏膜组织均浆s Ig A、IL-4、IFN-γ含量的变化。研究表明,与CY组相比,多糖中剂量组均能显著地提高脾指数和胸腺指数(P0.05),多糖中、高剂量组的法氏囊指数明显升高(P0.05),多糖低、中、高剂量组的淋巴细胞数、新城疫和传染性支气管炎抗体水平均有显著提高(P0.05),低剂量组的咽部黏膜s Ig A、IL-4、TNF-γ含量均有显著提高(P0.05)。上述结果表明,参芪多糖口服液可以有效治疗因环磷酰胺带来的鸡喉部黏膜免疫功能的下降,增加免疫器官指数以及免疫因子的含量,从而提高机体的免疫功能。     

猴头菇变种菌多糖对鸡新城疫 LaSota-克隆30疫苗免疫应答的影响

多糖来自高等植物、动物细胞膜和微生物的细胞壁之中,具有广泛的生物活性。近年来研究证实,多糖对免疫活性细胞有促进和诱生多种细胞因子的作用,可望在未来免疫增强剂中成为占有重要地位的免疫活性物质。现在人们越来越重视多糖的生物活性及其药用价值,并对黄芪多糖、...     

三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,设计引物扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)的基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到了重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3。将这3个重组真核表达质粒分别转染293T细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,并进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot鉴定。结果显示,重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3在转染的293T细胞中均可表达一约20.5ku的目的蛋白,且具有良好的HEV抗原性。本试验获得的3个HEV ORF2连续片段的候选核酸疫苗为今后进一步研制HEV核酸疫苗奠定了基础。     

杨树花多糖对河田鸡大肠杆菌病的防治效果及其对TLR4/NF-κB信号通路的影响

旨在研究杨树花多糖(PFP)对大肠杆菌感染河田鸡的防治效果。将225只1日龄河田鸡随机分为9组,分别为空白组、模型对照组、阳性对照组与预防组(高、中、低)、治疗组(高、中、低),每组25只,连续用药6 d后,观察7 d。通过Western-blot检测TLR4、Myd88及NF-κB蛋白水平,通过qPCR检测IL-6、TNF-α的m RNA表达水平,初步探讨其作用机制。观察发现,杨树花多糖防治组鸡的精神状态和模型组相比显著改善,组织器官的症状及病理变化显著减轻。Western-blot结果显示,杨树花多糖防治组TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达量下调明显,且呈现出剂量依赖型。qPCR结果显示,杨树花多糖防治组IL-6、TNF-α的表达量显著低于模型对照组(P0.05),其中预防高剂量组IL-6 mRNA表达量与恩诺沙星组差异不显著(P0.05),但TNF-α mRNA表达量显著低于恩诺沙星组(P0.05)。结果说明,杨树花多糖能有效清除大肠杆菌的毒力因子,对河田鸡大肠杆菌病有较好的防治效果。     

姬松茸水溶性粗多糖对镉中毒小鼠血液指标的影响

为观察姬松茸水溶性粗多糖对镉中毒小鼠血液系统的影响,将60只SPF级雄性健康小白鼠随机分为对照组、模型组、试验组1、试验组2和试验组3共5组,模型组与3个试验组采用同一水平镉染毒,但同时对3个试验组给予不同剂量的姬松茸水溶性粗多糖溶液进行保护,试验日程为5周,试验结束时对各组小鼠采血,检测各项血液指标。结果显示,模型组小鼠的血液指标红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血色素浓度(MCHC)显著低于对照组的相应指标;与模型组相比,给予高剂量姬松茸水溶性粗多糖的试验组3的血液指标RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC均显著提高,而白细胞数(WBC)、小型白细胞数(Lym)和中型白细胞数(Mid)则显著下降。证实,重金属镉能够损伤小鼠的血液系统,但高剂量姬松茸水溶性粗多糖对镉的损伤具有防止作用。     

蕨麻多糖的提取及其清除自由基的作用

采用热水提取、乙醇沉淀、Sevag法获得蕨麻多糖;通过体外化学模拟试验,观察了该多糖清除自由基的活性。结果,蕨麻多糖得率为3.8%;在体外化学模拟系统反应中,该多糖能显著清除羟自由基、超氧阴离子及体外培养的淋巴细胞产生的过氧化氢;蕨麻多糖对体外亚油酸脂质过氧化无明显影响。     

硒对慢性氟中毒鸡免疫组织中Cu-Zn-SOD活性及其mRNA表达的影响

为探讨硒对慢性氟中毒鸡免疫组织中Cu-Zn-SOD活性及其mRNA表达的影响,将8日龄海蓝褐雏鸡随机分为3组正常对照组,高氟组,硒拮抗组.分别于分组饲养后第30、60、90 d检测血清和免疫组织中MDA含量、Cu-Zn-SOD活性以及免疫组织中Cu-Zn-SOD mRNA的表达水平.结果,血清及免疫组织中硒拮抗组较高氟组MDA含量降低,试验中后期Cu-Zn-SOD活性较高氟组高,免疫组织中硒拮抗组Cu-Zn-SOD mRNA表达水平明显高于高氟组的水平.结果显示,氟可诱发鸡免疫组织氧化损伤,降低Cu-Zn-SOD活性及其mRNA表达水平;硒可提高Cu-Zn-SOD活性及其mRNA的表达水平,干预免疫细胞脂质过氧化反应,进而减轻氟所致的免疫损伤.