DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅲ)——应用“Myo”DNA探针进行混合斑中精液的个体认定

本文利用蛋白酶K、SDS对精液和阴道液、精液和血液的混合斑进行前处理,除去女性阴道脱落上皮细胞和血液细胞成份获得精子。提取精子DNA,用“Myo”小卫星DNA探针杂交进行DNA指纹检验,获得了高度多态性的精子DNA指纹图谱,与同一个体血液DNA指纹图谱比较完全一致,实现了混合斑中精液来源的个体认定。在对20多起强奸案例混合斑的实际应用中,成功地认定了强奸罪犯。     

混合精斑染色涂片的STR-PCR检验

在查证性犯罪的案件中，为了确证混合斑是否含有精液，要制作涂片进行染色镜检有无精子。对于已经染色的混合斑（精液和阴道液混合物）涂片进行PCR分析，获得精子或／和阴道细胞DNA的遗传信息。对于认定犯罪分子，有时对涉及女性无名尸体或尸体已不存在的受害人进行个人识别认定，具有重要的参考意义。作者对在混合斑检验中确证精液存在的酸性复红美蓝染色涂片和苏木素伊红染色涂片进行了STR－HUMTH01位点的检测，现报告如下。材料与方法1．样品制备取1对夫妇的精液和阴道液混合物，搅匀，制备涂片．经酸性复红美蓝染色法和苏木素伊红…     

葡萄胎的DNA检验

本文利用STR复合扩增技术对1例强奸致孕案件中的胚胎组织进行了检验,结果获得了一种罕见的DNA分型（见图1）,其15个STR基因座均表现为纯合子。结合临床与病理检验结果,确定为葡萄胎。     

强奸案中女性DNA物证分析的意义

强奸案是法医DNA检验工作中经常遇到的刑事案件,常规鉴定方法既是从被害人阴道拭子、内裤等相关物证载体上提取精斑DNA并分型,据此对犯罪嫌疑人进行排查,直至认定罪犯。笔者发现,大多数情况下对强奸案件相关物证检验时,精液与阴道分泌物的混合斑中女性物质DNA的检测及其数据库检索往往被忽视,而在实际检案中送检物证与被害人相关性的认定恰恰对案件的定性起着至关重要的作用。下面通过检案实例进一步阐述其重要性。1案件资料案例12002年11月10日接报:杨某之妻陈某诉11月8日上午被张某强奸。案例22004年9月10日,被害人杨某(女,11岁)自述…     

强奸致孕形成部分性葡萄胎的检验分析

目的探讨强奸致孕案葡萄胎组织的DNA检验和STR结果分析。方法用DNA Typer TM15试剂盒对犯罪嫌疑人、受害人血样和流产胚胎组织进行荧光复合STR基因座扩增检测。结果检测的一例流产胚胎组织DNA的STR峰谱表现出部分3条带,且3条带中有两个等位基因来源于犯罪嫌疑人,另外一个来源于受害人,推断为单卵双精子受精的部分性葡萄胎。结论应用STR分型技术可以推断葡萄胎的DNA来源和受精类型,为亲缘关系鉴定提供依据。     

DNA检验早期胚胎组织破获强奸案1例

在性犯罪案件中,检验3个月以上流产胎儿、绒毛、羊水的案件较多,检验早期胚胎(8周内)的案件较少,现报道检验早期胚胎破获强奸致孕案1例。1案例资料陈某,女,13岁,在某中学校舍内多次被该校男生叶某强奸,于某年5月9日经医院证实怀孕7周并实施人工流产。提取受害人陈某的血样和流产的胚胎组织及嫌疑人叶某的血样进行DNA检验。2检验与结果用Chelex法提取DNA,用identifiler荧光STR复合扩增试剂盒扩增,扩增产物用PE310测序仪进行检测分型,结果显示送检的胚胎与陈某、叶某有亲生关系(表1)。表1流产胚胎与陈某、叶某血的STR位点基因分型检材D…     

DNA指纹图在法医学鉴定中应用的研究(Ⅱ)——应用‘Myo’小卫星探针进行血斑、精斑、个体组织的个体认定

应用‘Myo’小卫星 DNA 探针,Southern 印迹杂交技术,对血斑、精斑、同一个体不同组织进行 DNA 指纹图分析,均获得清晰的图谱。同一个体的血斑与血液、精斑与精液以及不同的组织其 DNA 指纹图谱完全相同。可以根据斑痕或组织与嫌疑个体的血液或某一组织 DNA 的指纹图谱比对以做出同一认定。50μl 血液量的血斑、5μl 精液量的精斑可以获得清晰易辨的指纹图谱。五年的精斑、两年的血斑亦可做出与同源个体新鲜精液、血液完全一致的 DNA 指纹图谱。对杀人、强奸杀人、碎尸等不同案件的血痕、精斑、不同组织碎块进行了 DNA 指纹图检验,均做出了正确的个体认定。本方法的应用为我国法医物证检验提供了新的分析手段,使个体认定得以实现。     

单核苷酸多态性与DNA芯片技术在法医学中的应用

８０年代中期,Jeffreys建立的DNA指纹技术是法医学DNA分型的里程碑。针对人类基因组小卫星VNTR位点靶序列作RFLP分析,获得高度个体特异性DNA指纹图,使法医学第一次能够作出认定同一性,认定亲生关系的鉴定结论。此为第一代法医DNA分型技术。８０年代后期,Mullis建立PCR技术,以基因组内STR位点多态性位点为靶序列作PCR扩增,利用电泳分离,分析STR位点多态性。PCR－STR分型结合了PCR高效扩增和STR位点高度多态性的特点,成功地解决了检测灵敏度问题,采用复合扩增多STR位点的办法,鉴别能力达到或接近DNA指纹水平…     

wiazrd clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的 建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法 在100例检案中，利用wizard clean up直接对于精子消化液进行纯化浓缩。采用profiler plus试剂盒进行复合扩增，产物经ABI310基因分析仪检测。结果 从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论 wizard clean up处理混合斑，能有效去除女性成份，得到精斑DNA进行分型。     

wizard clean up在混合斑DNA检验中的应用

目的建立一种快速、简单、有效的混合斑DNA检验方法。方法在100例检案中,利用wizardcleanup直接对精子消化液进行纯化浓缩。采用profilerplus试剂盒进行复合扩增,产物经ABI310基因分析仪检测。结果从混合斑中成功获得精斑10个STR位点的DNA分型。结论wizardcleanup处理混合斑,能有效去除女性成份,得到精斑DNA进行分型。     

免疫磁珠法分离混合样本中血液成分的探究

目的 基于免疫磁珠法分离脱落上皮细胞中的白细胞，消除或减弱混合检材中血液来源STR分型对结果分析的干扰。方法 分别取两名不同个体的血液和口腔脱落上皮细胞，按不同比例制备成混合样本作为实验组，并同时制备细胞量相等的对照组。应用免疫磁珠法分离实验组样本中白细胞，并与对照组以相同条件进行DNA提取、扩增、分型，对比两组STR分型结果。结果 当血液量较少时，对照组为混合STR分型，经免疫磁珠法分离混合检材中白细胞后，实验组为单一来源STR分型；当血液量较多时，此时对照组为混合STR分型，但口腔脱落上皮细胞来源的STR分型谱带峰高较低甚至丢失，经免疫磁珠法后，实验组仍为STR混合分型，但口腔脱落上皮细胞来源的STR分型谱带成为主峰；当混合样本中口腔脱落上皮细胞微量，血液占比极大时，此时对照组为血液来源的单一STR分型结果，经免疫磁珠法后，实验组为STR混合分型，包含口腔脱落上皮细胞来源的所有等位基因分型。结论 该方法可用于分离脱落上皮细胞中血液成分，降低血液来源的DNA比例，能够改善此类混合检材中目的细胞的STR分型结果，为刑事案件中含有血迹浸染的混合生物检材的检验提供了一种新思路。     

-20℃保存对胎儿组织DNA指纹图检验的影响

在实际办案过程中，常遇到需要对冷冻保存一段时间的胎儿组织进行鉴定。如强奸致孕案，一时找不到嫌疑人，将检材冷冻保存。正确地选择适当的组织提取DNA，是做好DNA指纹图的前提。本文通过对在-20℃保存条件下的引产胎儿不同组织，分别于1、3、7、14、24、52、70、120天取材，提取DNA，观察DNA量变化，并对保存1天和120天的组织中提取的DNA，以HinfI酶切后制作的DNA指纹图进行比较，企望提示冷冻保存一段时间后能获得较理想DNA指纹图的组织。材料与方法引产胎儿取自送检的一起强奸致孕案的检材。于当天取其皮肤、脑、肌肉。肾、…     

四类遗传标记的检测用于混合精斑的个人识别

目的探讨综合应用常染色体STR与Y-STR、X-STR、mtDNA高变区Ⅰ序列检测四类遗传标记,提高两男性混合精液样品的个人识别率。方法使用商品化试剂盒检测混合精液样品的常染色体与X、Y染色体STR,应用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)法分离两男性混合精液样品的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)高变区Ⅰ序列,并进行序列分析。结果混合精液样品比例超过1:10(高组分所占比例继续增加而低组分所占比例继续减少)时可以确定高拷贝者的全部四类遗传标记系统的分型。比例接近时,通过与嫌疑人检测结果的比较可获得排除或基本认定的意见。结论四类遗传标记系统的联合检测有助于提高两男性混合精液样品的个人识别率。     

胎儿亲子鉴定中21-三体综合征1例

<正>1案例资料1.1简要案情2012年本单位受理1起亲子鉴定案,征得当事人同意,采集母亲(孕5月余)、嫌疑生父的口腔拭子及羊水(胎儿样本),进行STR分型实验。1.2 DNA检验Chelex-100法提取上述样本DNA。采用AmpFlSTR Identifiler PCR Amplification试剂盒(ABI     

癌组织的基因突变对PCR反应及结果分析的影响

在实际检案中,办案人员有时送检石蜡包埋人体病理组织(癌)或切片。这类检材由于存在基因突变的可能,往往影响正确的结果分析,使给出鉴定结论造成困难。某地发生一起保险欺诈案件中,送检子宫癌病理组织蜡块,要求与当事人的血液进行同一认定,笔者通过该案例检验探讨癌组织的基因突变对PCR反应及结果分析的影响。1材料与方法采用Chelex-100法提取当事人的血液样本DNA,经PCR扩增,获得STR分型(图1)。采用文献[1]的方法提取DNA,经PCR扩增,获得STR分型(图2)。2讨论(1)本例检验结果表明,癌组织的基因突变会影响PCR扩增,使STR分型结果发…     

DNA检验技术用于强奸致孕案鉴定1例

在b常检案了作中，需对强奸致孕案进行鉴定时，常规方法是取胎儿血液检材，用亲子鉴定的方法，通过红细胞血型、n细胞血型、酶型及血清型等血清学标忐的检验鉴别强奸犯罪嫌疑人。但是，如果检材足陈旧血痕或肌肉、内脏等组织，则必须结合DNA检验方才能得到理想的鉴定结果。作大曾接触到1例较特殊的案件，其检材是在室温条件下放置了3年的血痕，需要对两个犯罪嫌疑人进行鉴定。作者通过DNA分析成功地完成了检验，现报道如下。l案情摘要某女，20岁，精神发舍迟滞，1993年年初被同村人强奸致孕，5个月后经药物引流产乍一胎儿，该受害人指认…     

P33.6位点扩增片段长度多态性的法医学应用

P33．6位点扩增片段长度多态性（Amp－FLP）在中国人群中有很高的识别能力，本实验室继对中国人P33．6位点Amp，FLP[1]报道之后，又对血液、血斑、精液、精斑、混合斑、毛发、唾液等生物检材进行P33．6位点的分析，获得了令人满意的结果。将该方法用于案件的检验，在破案中发挥了重要作用。材料与方法一、实验材料1．收集自愿者提供的精液、精斑和精液与阴道分泌物的混合斑各20份，并同时收集供者血液。所有样品均-4℃保存。2．收集自愿者提供的毛发（20根）、唾液（1份）和血斑（10份），室温保存。二、实验方法1．检材样品的处理（1…     

常染色体及 Y染色体 STR分型技术在检案中的应用

荧光标记 STR分型技术所需检材量少，对陈旧、腐败检材适用性强，结果准确、灵敏度高，而 Y染色体 STR分型技术为男性特有，且 Y染色体 STR基因座不与其他染色体发生交换，在一些特殊案件的侦破中，联合应用常染色体及 Y染色体 STR分型技术往往可以起到关键性的作用。本文结合一典型系列案例进行分析，对案件检材提取、检验结果及应用价值等进行分析讨论，旨在提高 DNA检验技术在同类案件中的应用价值。 1 案 情 　　某年 6月至 11月，某市发生女青年搭乘摩托车到郊区偏僻地点被车手抢劫、强奸的系列案件共 21宗，送检的被害人内裤…     

Y-STR在混合斑及亲缘鉴定案件中的应用

<正> 人类Y染色体除拟常染区(pseudoautosomal re-gion)外,大部分不与染色体发生重组,且序列结构特征能稳定地由父亲传递给儿子。对于父系家族的亲缘关系鉴定,Y-STR多态性具有实用价值。此外,利用PCR技术扩增Y-STR,可获得男女混合样品中男性成份的单倍型分型,而不受女性成份的干扰。在实际检案中,我们运用Y染色体10个STR基因座对遗留有混合精斑、血斑的强奸案件,凶杀案件及亲缘关系鉴定等多类案件进行了检验。     

STR系统HUMCSF1PO-HUMTPOX-HUMTH01三位点复合扩增在法医学上的应用

STR系统是人类基因组中具有高度多态性的遗传标志系统，其DNA片段通常小于500hp，很容易通过PCR扩增并进行检测＼笔者参照美国Promega公司的HUMCSFIPO－HUMTPOOHUMTHVCTT）三位点复合扩增的方法，在对中国上海地区117例个体作了人群频率调查以后，逐步将该方法运用于血液。血痕、精斑的检验，在凶杀、强奸等刑案及亲子鉴定中起到了证据的作用。材料与方法样品取自刑案中涉及的活体血液150例、死者血液及血痕140例、精斑20例。一、DNA提取1．血液及血痕中的DNA提取取lml无菌水于1．5ml离心管，加入10pl血液或3mmZ血痕，小心…