鸡肾型传染性支气管炎病毒分离株的血清分型研究

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离株的血清分型研究姜北宇郑世兰白丽萍刘月焕景小冬姚颖（北京市农林科学院畜牧兽医研究所１０００８１）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由病毒引起的一种急性、高度接触性呼吸道及泌尿生殖道疾病。鸡感染鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）后，表现...     

鸡肾型传染性支气管炎病毒唐山株的生物学特性

鸡肾型传染性支气管炎病毒唐山株的生物学特性郑百芹陶乃生刘乃强王成李云清刘爱丽（河北省唐山市畜牧兽医工作站０６３００４）笔者从河北省唐山市１５个县区发病鸡场分离到１５株鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ），命名为ＴＳ１～ＴＳ１５。为确定分离毒的生物学特性...     

内蒙古鸡肾型传染性支气管炎病毒株的分离与鉴定

内蒙古鸡肾型传染性支气管炎病毒株的分离与鉴定１）李向宇唐娟郭日东２）赵世华卢岩（内蒙古畜牧科学院呼和浩特０１００３０）鸡传染性支气管炎（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ＩＢ）是一种急性高度接触性传染的呼吸道疾病，伴有泌尿和生殖系统的病变；鸡...     

麻雀体内传染性法氏囊病病毒的分离鉴定及理化特性研究

从传染性法氏囊病（ＩＢＤ）阳性麻雀体内分离到了一株病毒，用传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ试验和ＤＩＧ－标记ＩＢＤＶｃＤＮＡ探针斑点杂交试验证明该病毒为ＩＢＤＶ。病毒可适应于鸡胚和鸡胚成纤维细胞，产生细胞病变效应（ＣＰＥ）。病毒血清型鉴定为Ⅰ型，病毒代谢抑制试验证明其基因组为ＲＮＡ，病毒核酸的电泳图谱呈两条特征带。病毒对乙醚不敏感，ｐＨ２．０不能灭活病毒，ｐＨ１２可使病毒失去感染性，５６℃作用３小时病毒仍有活性，７０℃１小时可灭活病毒。以上结果表明从麻雀体内分离到的ＩＢＤＶ理化性质比较稳定，与目前鸡场流行的ＩＢＤＶ极为相似，可能与鸡ＩＢＤＶ同源，提示麻雀可能在ＩＢＤ流行病学中起主要作用。     

间接酶标抗体染色法检测石蜡切片中鸡肾型传染性支气管炎病毒的研究

以抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＮＩＢＶ）Ｔ株的鼠源超免疫血清为一级抗体,辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的羊抗鼠ＩｇＧ为二级抗体,建立了检测石蜡切片中ＮＩＢＶ抗原的间接酶标抗体染色技术。经过特异性试验和阻断性试验,表明该方法具有高度的敏感性和特异性。应用该法对人工感染ＮＩＢＶＣ９００１株的鸡气管和肾石蜡切片中的病毒抗原进行了检测,结果：气管从感染后０．５～１１ｄ,肾从感染后１～２０ｄ,均检测到病毒抗原,阳性染色主要集中于气管粘膜上皮细胞和肾小管上皮细胞浆内。     

贵州省鸡减蛋综合征病毒分离株的生物学特性鉴定

从贵州省出现产蛋下降等症状的鸡群中分离出１株病毒，命名为ＨＳ１。该病毒对鸭胚致死率达５５６％～６６７％；在尿囊液中产生高效价的红细胞凝集素，第７代鸭胚尿囊液的血凝效价达到２１５～１８；在ＤＥＦ单层细胞上生长良好，并引起明显的细胞病变，感染细胞的核内观察到嗜碱性包涵体；将分离毒株回归蛋用鸡复制出与自然病例相类似的临床症状，全部感染鸡都产生ＥＤＳ血清抗体；病毒呈球形粒子，直径７０～８０ｎｍ，无囊膜，对氯仿、乙醚不敏感；能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，不凝集哺乳动物的红细胞；病毒核酸类型是ＤＮＡ，不分节段，分子含有３３６ｋｂ。在交叉血细胞凝集抑制试验中，分离毒株对红细胞的凝集特性能够被ＡＶ１２７超免疫血清所抑制，而不与新城疫阳性血清、正常健康鸡血清发生交叉反应；在病毒中和试验中，ＨＳ１与ＡＶ１２７毒株能够发生交叉中和反应，显示它们具有相同的抗原关系。根据对病毒分离株的致病性、血凝谱、理化特性和血清学关系的鉴定，证明从贵州分离的ＨＳ１与国际标准毒ＡＶ１２７属于同一血清型，是１株ＥＤＳ病毒。     

猪传染性胃肠炎病毒的血凝作用

将猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）Ａ株在ＩＢＲＳ２细胞上增殖，培养物经差速离心浓缩后与鸡红细胞出现了高凝集价（２８），这种凝集作用能被兔抗ＴＧＥＶ高免血清所抑制。试验的最适反应条件为体积分数０．５０％红细胞４℃作用１ｈ。通过反复试验，建立了一种简单实用的血凝抗原制备方法，病毒培养液不需浓缩可直接应用。     

鸡传染性支气管炎肾型病毒株的分离与鉴定

鸡传染性支气管炎肾型病毒株的分离与鉴定陈昌海邵翠丽（江苏省畜牧兽医总站南京２１００２４）彭大新（扬州大学农学院）鸡传染性支气管炎（ＩＢ）是由传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病。主要侵害鸡的呼吸系统（呼吸型）、泌尿系统（肾型...     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病，经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ ＧＩＢ） ，并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 株，ＨＡ 效价为２１２，ＥＩＤ５０ 为１０ －６．８１／０ ．２ ｍ Ｌ。病毒干扰试验中，ＩＢＶＪＢ９７０２ ＋ ＮＤＶ ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ 效价为２４～６ ，ＬａＳｏｔａ 接种鸡胚ＨＡ 效价为２１０～１１ ；用ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 病毒液１∶１０ 稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ１２０ 弱毒疫苗免疫雏鸡，发病８／１０ ，死亡３／１０ 。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定范伟兴袁秀芳王树迎胡敬东肖传发（山东农业大学动物科技学院泰安２７１０２８）吴延功王永玲蒋贻海（农业部动物检疫所）本研究对来自山东夏津和泰安的２株分离毒ＸＪ株和ＣＡ株进行了鸡胚传代、电镜观察、血凝试验、干扰试验、鸡胚...     

鸡IB弱毒疫苗对鸡ND弱毒疫苗免疫干扰的试验观察

鸡ＩＢ弱毒疫苗对鸡ＮＤ弱毒疫苗免疫干扰的试验观察郑厚旌邓纪英１）张健林陈桂霞（河南农业大学牧医工程学院郑州４５０００２）据报道，应用鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）与新城疫病毒（ＮＤＶ）分别先后接种ＳＰＦ鸡胚，两种病毒之间存在干扰现象，被干扰的ＮＤＶ毒...     

抗鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体中和株的建立

将纯化的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）组织毒免疫的ＢＡＬＢ／ｃ鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，用ＥＬＩＳＡ、病毒中和试验检测分泌抗体，获得了６株稳定分泌抗ＩＢＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞，命名为ＮＩＢ－１，ＮＩＢ－２，ＮＩＢ－３，ＮＩＢ－４，ＮＩＢ－５，ＮＩＢ－６；６株ＭｃＡｂ均具ＥＬＩＳＡ特性和免疫沉淀特性，亚类鉴定表明，前４株属于ＩｇＧ_（２ａ），后２株属于ＩｇＧ_１。杂交瘤细胞冻存６个月后复苏，均能稳定分泌特异性ＭｃＡｂ。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离与鉴定周建强，路振香，张忠诚（安徽农业技术师范学院凤阳２３３１００）鸡传染性支气管炎（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｏｆｃｈｉｃｈｅｎｓ，ＩＢ）是鸡的一种急性、高度接触传染的病毒性呼吸道疾病，其特征为急性呼吸道...     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离及其N基因片段的克隆和测序

通过形态学观察、动物回归试验、鸡胚接种试验、病毒干扰试验以及血凝试验分离鉴定了1株肾型鸡传染性支气管炎病毒(IBV)。在透射电子显微镜下,病毒粒子多呈球形,直径为80~120 nm,有囊膜,表面有冠状突起。鸡胚连续盲传至第 1~2 代,开始出现死亡或出现侏儒胚;分离株可显著干扰NDV在鸡胚中的增殖;病毒尿囊液无凝血活性,但经5 g/L胰蛋白酶处理后,能够凝集10 mL/L的鸡红细胞。利用RT PCR技术对分离株的N基因进行了扩增,经克隆、序列测定和分析比较,证实分离株为肾型IBV,命名为AH3 04株。     

传染性法氏囊病病毒Ⅰ型变异株的分离鉴定及其多价弱毒苗免疫试验

先后在江苏、浙江、四川等８省（区）从临床患传染性法氏囊病的鸡群中采集法氏囊病料，分离到３２个野毒株，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，其中１７株病毒为传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），应用交叉中和试验，将分离毒株分为５个亚型，用ＩＢＤＶⅠ型标准变异株高免血清作中和试验鉴定，其中５个分离毒株有较高中和价，初步定为ＩＢＤＶⅠ型变异株。将其在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上连续传代致弱，与标准Ⅰ型弱毒株联合制成多价弱毒疫苗，免疫试验表明多价弱毒疫苗具有良好的免疫效果，免疫组攻毒１００％保护，对照组攻毒死亡率为９２％     

鸡肾型传染性支气管炎地方株分离鉴定

自黑龙江省牡丹江、密山两地自然发病鸡场分离到2株病毒.经鸡胚连续盲传至第5代时出现胚体蜷缩成团状、暗淡无光,头、翅、肢有出血点.经理化测定试验、气管环感染试验、回归试验等检测,鉴定分离的2株病毒为鸡肾型传染性支气管炎病毒株,暂定名为MK、M2.     

鸡肾型传染性支气管炎病毒JH9801株的分离鉴定

从天津市某肉用鸡场疑似肾型传染性支气管炎(NIB)病鸡中取肾组织,按常规处理后接种9-10日龄鸡胚,连续传代培养至第7代,并对4-7代分离毒株的致病性、血凝性、EID50及对DNV的干扰性和乙醚敏感性进行测试,同时进行了动物回归试验.结果表明,4-7代分离毒株可使85%-90%鸡胚于接种后8-9 d死亡,多数死胚和残存活胚胚体出血、蜷缩、矮化等具有IBV感染特征;该分离毒株无直接血凝性,但经10 g/L胰酶处理后可凝集鸡红细胞;分离毒株对乙醚敏感;动物回归试验中有65%的感染鸡在15 d内发病或死亡.剖检病死鸡可见肾苍白、肿胀,肾小管内充塞大量尿酸盐,外观呈菜花样.经鉴定,分离的病毒株JH9801为鸡肾型传染性支气管炎病毒(NIBV).     

用间接荧光抗体试验检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的研究

建立检测鸡肾型传染性支气管炎抗原的间接荧光抗体试验（ＩＦＡ），其抗体感作时间Ⅰ抗以５０～６０ｍｉｎ，Ⅱ抗以３０～４０ｍｉｎ最佳。该法具有良好的特异性，可检测出人工感染鸡肾型传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ａｕｓｔ－Ｔ，ＨＮ９３０１，ＴＪ９３０１，ＢＪ９３０１毒株后的抗原；对自然发病病例检测结果，阳性符合率高于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和气管环中和试验法     

鹌鹑减蛋综合征病毒株血细胞凝集特性的研究

鹌鹑源ＱＡＶＣ９４腺病毒株血细胞凝集特性及影响因素的研究结果表明，该病毒能凝集雉鸡、鸡、鹅、鸭、鸽、鹌鹑、火鸡、斑鸠红细胞，不凝集哺乳动物红细胞，为１株减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）。该株病毒最佳的血细胞凝集条件为４℃，体积分数１．０％雉鸡红细胞，０．０１～０．１０ｍｏｌ／ＬｐＨ６．４～７．２的ＰＢＳ。病毒可耐５６℃１ｈ，脂溶剂（乙醚、氯仿）和反复冻融；体积分数０．２％甲醛溶液对病毒的血细胞凝集效价无影响；０．５％甲醛２４ｈ或０．１％甲醛４８ｈ处理后病毒完全失去感染性。用１．２５～１０．００ｇ／Ｌ胰蛋白酶处理病毒，其血细胞凝集性和细胞感染性随着浓度的增加而升高，血细胞凝集性则由作用时间的延长而降低２～８个滴度。当氯化镁浓度为０．０１０～０．０１５ｍｏｌ／Ｌ时病毒的血细胞凝集价最高，浓度为０．０５０ｍｏｌ／Ｌ时血细胞凝集价下降６个滴度，浓度大于０．１００ｍｏｌ／Ｌ时出现自溶现象。