四种调补方对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量影响的比较

目的 :观察调肝方、健脾方、补肾方及人参总皂苷对反复心理应激大鼠下丘脑及海马氨基酸含量的影响。方法 :大鼠随机分为正常组、模型组、调肝组、健脾组、补肾组和人参总皂苷组。采用OPA高效液相色谱分析法检测下丘脑、海马氨基酸含量。结果 :人参总皂苷组下丘脑谷氨酸(Glu)明显下降 (P <0 .0 5 ) ,健脾组与人参总皂苷组下丘脑天冬氨酸 (Asp)水平均明显低于模型组和正常对照组 (P <0 .0 1)。模型组海马Glu明显下降 (P <0 .0 5 ) ,补肾组、健脾组和人参总皂苷组海马Glu和Asp均明显升高 (P <0 .0 1)。调肝组、健脾组和人参总皂苷组下丘脑γ 氨基丁酸(GABA)和牛磺氨酸 (Tau)均明显下降 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,补肾组下丘脑GABA明显下降(P <0 .0 1) ,模型组海马Tau明显下降 (P <0 .0 5 ) ,健脾组、补肾组与人参总皂苷组海马GABA和Tau均明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :调肝方药的中枢作用部位可能主要在下丘脑 ,其作用机制可能与下调氨基酸水平有关 ;而健脾、补肾方药及人参总皂苷的中枢作用部位可能与海马和下丘脑都有密切关系 ,作用机制则与上调氨基酸水平有关     

肝豆汤改良方调控PKR/eIF2α通路改善Wilson病模型TX小鼠突触功能障碍的机制研究

目的 探究肝豆汤改良方调控双链RNA依赖蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent pro-tein kinase,PKR)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)通路改善Wilson病模型毒牛奶(toxic milk,TX)小鼠突触功能障碍的机制.方法 实验分为正常组、正常加肝豆汤改良方组、模型组、模型加肝豆汤改良方组,每组20只小鼠;正常组和模型组每日分2次予生理盐水灌胃,每次20 mL/kg,正常加肝豆汤改良方组与模型加肝豆汤改良方组每日分2次予中药肝豆汤改良方各20 mL/kg灌胃给药,连续4周,末次给药结束后取各组小鼠海马组织进行检测;采用旷场实验、Barnes迷宫实验检测Wilson病模型小鼠认知功能;采用TUNEL染色法检测小鼠海马组织中神经细胞凋亡情况;采用免疫荧光染色检测各组小鼠海马8-羟化脱氧鸟苷(8-hydroxylated deoxyguanosine,8-OHdG)的表达水平;采用Western blot法检测海马组织PKR/eIF2α通路以及突触相关蛋白表达水平.结果 模型组小鼠的认知功能显著低于正常组(P<0.05),模型加肝豆汤改良方组小鼠的认知功能显著高于模型组(P<0.05);与正常组比较,模型组小鼠海马神经细胞凋亡数目显著增加(P<0.05);与模型组比较,模型加肝豆汤改良方组小鼠海马神经细胞凋亡数量显著降低(P<0.05),8-OhdG表达水平显著降低(P<0.05);小鼠海马内突触相关蛋白突触蛋白1、突触素、突触后致密物-93、突触后致密物-95表达水平显著增加(P<0.05),小鼠海马PKR/eIF2α通路相关蛋白PKR、磷酸化eIF2α、转录激活因子4、促凋亡分子C/EBP同源蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 肝豆汤改良方可通过调控PKR/eIF2α通路,促进突触相关蛋白表达,减轻高铜诱导的突触功能障碍,改善TX小鼠认知功能损伤症状.     

霍山石斛通过上调突触蛋白Arc表达增强衰老小鼠学习记忆的研究

目的 探讨霍山石斛对小鼠学习记忆能力减退的影响及其可能机制.方法 将33只SPF级C57BL/6小鼠随机分为模型组、早期给药组和晚期给药组,另取11只12周龄C57BL/6青年小鼠作为对照组.采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;应用透射电子显微镜观察海马CA3区超微结构,采用免疫印迹检测海马CA3区Arc蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,模型组小鼠游泳距离显著延长(P<0.05),靶象限游泳时间明显减少(P<0.05);与模型组比较,早期给药组小鼠游泳路程显著缩短(P<0.05),靶象限游泳时间显著延长(P<0.05).透射电子显微镜显示,早期给药组和对照组小鼠海马CA3区可见较多结构清晰的线粒体,线粒体嵴排列较整齐,突触结构较清晰且较多;模型组和晚期给药组小鼠较多出现线粒体空泡化和嵴断裂或扭曲,线粒体数量和突触数量减少,突触后膜较致密.与对照组比较,模型组小鼠海马CA3区Arc表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,早期给药组小鼠CA3区Arc表达水平显著升高(P<0.05).结论 早期给予霍山石斛可以延缓或预防小鼠学习记忆能力减退,其机制可能与其上调突触蛋白Arc的表达水平进而影响海马突触结构有关.     

电针对慢性不可预见性温和应激致抑郁小鼠海马氧化应激-calpain-炎症信号轴的影响

目的 基于海马氧化应激-calpain-炎症信号轴探讨电针对小鼠抑郁样行为的干预作用及机制。方法 采用慢性不可预见性温和应激方法复制小鼠抑郁模型，将24只小鼠随机分为正常组、模型组、电针组和维生素C（vitamin C，VC）组，每组6只；正常组、模型组、电针组小鼠给予0.5 mL生理盐水灌胃3周，VC组小鼠给予10 mg/kg VC注射液灌胃3周，电针组小鼠电针“百会-神门-三阴交”组穴，每日1次，每次20 min，连续干预3周，正常组、模型组和VC组小鼠不予电针干预。另有24只小鼠给予腹腔注射脂多糖复制急性抑郁模型，将24只小鼠分为正常组、模型组、钙蛋白酶抑制剂（calpeptin inhibitor，CI）组和N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine，NAC）组，每组6只；NAC组小鼠经脑定位注射3 μL NAC到侧脑室，CI组小鼠按2 mg/kg经腹腔注射CI。观察并记录小鼠体质量变化；采用蔗糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验评价电针对小鼠抑郁样行为的干预效果；ELISA法检测小鼠海马组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，丙二醛（malondialdehyde，MDA）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）水平及血清皮质酮（corticosterone，CORT）水平；Western blot法检测小鼠海马组织calpain-1、超视交叉核生物钟振荡蛋白（suprachiamatic nucleus circadian oscillatory protein，SCOP）和IL-1β表达水平。结果 模型组小鼠表现出典型的抑郁样行为，小鼠体质量、糖水偏好指数显著下降（P＜0.05），强迫游泳实验和悬尾实验中小鼠静止不动时间显著增加（P＜0.05），海马组织5-HT水平显著降低（P＜0.05），血清CORT水平显著升高（P＜0.05）；模型组小鼠海马组织SOD活性显著下降（P＜0.05），MDA水平显著上升（P＜0.05），calpain-1、TNF-α、IL-1β水平显著升高（P＜0.05），SCOP水平显著下降（P＜0.05）。而经电针干预后，小鼠抑郁样行为得到显著改善（P＜0.05）；且电针干预能显著改善慢性不可预见性温和刺激诱导的小鼠海马组织的氧化损伤，下调calpain-1及炎症因子的水平（P＜0.05），并能抑制慢性不可预见性温和刺激诱导的小鼠海马组织SCOP表达水平的降低（P＜0.05）。结论 电针“百会-神门-三阴交”组穴能改善慢性不可预见性温和应激诱导的小鼠抑郁样行为，其作用机制可能与调控小鼠海马氧化应激-calpain-炎症信号轴有关。     

玉女煎加味治疗急性脊髓炎一例

刘某,男,29岁,已婚,农民。1982年8月22日入院。患者初起恶寒发热,3天后两下肢沉重以致完全瘫痪。检查:双下肢呈被动体位,第6～8胸椎棘突轻微压痛,腹壁反射、腱反射消失。脑脊液检查:细胞数65个/mm~3,蛋白质1.05g/L。诊为“急性脊髓炎”。先经四环素、氢化考的松等治疗3天,截瘫无改善,反见失眠、烦躁不安。遂于8月24日采用中药治疗。症见腰脊酸软、两下肢痿软不用,心烦口渴,恶热喜凉,舌红,苔根黄厚,脉弦数、重按无     

眠安康口服液质量标准研究

采用薄层色谱法对眼安康口服液中人参、酸枣仁进行定性鉴别；应用薄层色谱扫描法对人中参中人参皂甙Ｒｇ１含量进行测定，方法精密度、重现性及回收率均较好，可作为该制剂的质量控制标准。     

比色法测定人参中人参总皂苷的含量

目的：建立人参中人参总皂苷的含量测定方法。方法：采用比色法测定。结果：比色法测定的线性范围为15．0～75．0μg，相关系数γ=0．9997；平均回收率为100．61％，RSD为1．51％(n=6)。结论：本法简便、准确、灵敏度高、重复性好，可用于人参药材及含人参制剂的含量测定。     

仙茅苷对学习无助抑郁模型小鼠海马 细胞凋亡的作用及其机制研究

目的 研究仙茅苷对学习无助抑郁模型小鼠海马细胞凋亡的作用及其机制。方法 给予仙茅苷预处理,建立小鼠学习无助模型,用行为学实验评估其抑郁样行为,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL）检测海马区细胞凋亡数,免疫荧光法检测海马区胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）荧光强度,免疫印迹法检测海马齿状回（dentate gyrus,DG）区相关蛋白的表达水平。结果 仙茅苷能明显缩短学习无助模型小鼠强迫游泳和悬尾试验中的不动时间（P<0.05）,减少其海马DG区的神经细胞凋亡的数量（P<0.05）,减弱其星形胶质细胞活化（P<0.05）,促进蛋白激酶A磷酸化水平和突触后密度蛋白95的表达（P<0.05）。结论 仙茅苷在学习无助诱导的抑郁样行为中具有保护作用,可能是通过促进蛋白激酶A通路,减少海马DG区的颗粒细胞凋亡和抑制星形胶质细胞活化来介导的。     

人参调脾散治疗小儿脾虚型腹泻80例

人参调脾散系我院儿科制剂,临床广泛应用于脾气虚弱、运化失职之面色萎黄、形体消瘦、纳食呆滞、大便稀溏诸症.自1998年5月至1999年5月,笔者以人参调脾散治疗小儿脾虚型腹泻80例,并与幼泻宁颗粒剂进行对照,疗效满意,现报告如下.     

人参皂苷Rg1抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用及免疫机制

目的 观察人参皂苷Rg1对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）的抑制作用及其对脾淋巴细胞T细胞亚群和外周血细胞因子水平的影响。方法 采用C57BL/6小鼠皮下多点注射MOG35-55、百日咳毒素的方法复制EAE模型。将EAE小鼠随机分为模型组，人参皂苷Rg1低、中、高剂量组，同时设置正常对照组，每组6只。首次免疫后第10天予以不同剂量Rg1腹腔注射，连续给药14 d。第35天处死小鼠后取脊髓，观察各组小鼠脊髓炎症细胞浸润和脱髓鞘等病理变化，采用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞Th1、Th17、Treg细胞亚群，采用ELISA法检测外周血白细胞介素（interleukin，IL）-17A、干扰素γ（interferon gamma, IFN-γ）、IL-6、IL-10水平。结果 与模型组比较，人参皂苷Rg1低、中、高剂量组小鼠神经症状评分显著下降（P＜0.05），脊髓炎症细胞浸润评分和脱髓鞘评分显著降低（P＜0.05），脾淋巴细胞CD4+、CD8+、Th1、Th17 T细胞亚群比例显著降低（P＜0.05），Treg（CD4+CD25+FoxP3+）比例显著升高（P＜0.05），外周血IFN-γ、IL-17A、IL-16水平显著降低（P＜0.05），IL-10水平显著升高（P＜0.05），人参皂苷Rg1的作用呈现明显的剂量依赖性。结论 人参皂苷Rg1可显著改善EAE小鼠的临床症状，减轻中枢神经系统脱髓鞘和炎症细胞浸润，其作用可能与调控Th17、Th1、Treg细胞亚群失衡，抑制炎症细胞因子表达相关。     

高效液相色谱法测定三七及三七片中人参皂苷Rg1的含量

目的:建立三七及其制剂三七片中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Teknokroma Kromasil C18(5μm,2.1 cm×15 cm),以乙腈∶0.5 g/L磷酸水溶液(21∶79)为流动相,流速为0.3 ml/min,检测波长为203 nm,柱温为30℃。结果:人参皂苷Rg1浓度为21.4~534μg/ml时,线性关系良好(r=0.9991);平均回收率为99.3%,RSD=1.47%(n=6)。结论:本方法准确、快速、稳定、重现性好,可用于三七药材及其制剂的质量控制。     

肝豆汤调控NLRP3炎症小体抑制Wilson病模型神经炎症的机制研究

目的 通过观察肝豆汤对Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(Nod-like receptor family, pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)炎症小体的调控作用,探究其抑制Wilson病(Wilson’s disease, WD)模型神经细胞炎症损伤的机制。方法 体外实验中,采用CuCl₂诱导小胶质细胞(BV-2细胞)复制WD神经细胞损伤模型,并将BV-2细胞与海马细胞(HT-22细胞)条件培养,给予不同浓度肝豆汤含药血清。CCK-8法检测BV-2细胞及HT-22细胞活力,酶联免疫吸附法测定炎症因子水平,细胞化学法检测HT-22细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)漏出水平及氧化应激水平,Western blot法检测NLRP3炎症小体相关蛋白表达水平。体内实验中,以TX小鼠为模型组,并以DL小鼠为正常组,肝豆汤组给予TX小鼠肝豆汤灌胃4周。采用Barnes迷宫、旷场实验、高架十字实验观察小鼠行为,苏木精—伊红染色法观察小鼠海马组织的损伤程度,Western blot法检测NLR...     

人参皂苷Rg1通过调控细胞膜受体改善记忆研究进展

细胞膜受体-G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor 30， GPR30)、烟碱乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor， nAChR)、酪氨酸激酶受体(receptor tyrosine kinases， RTKs)，γ-氨基丁酸受体(γ-aminobutyric acid receptor， GABAR)和甘氨酸受体（glycine receptor， Glycine R）在学习记忆中扮演重要角色。这些细胞膜受体可能是人参皂苷Rg1改善记忆的潜在靶点。人参皂苷Rg1通过激活上游的细胞膜受体、级联神经细胞钙调蛋白激酶Ⅱ、磷脂酰肌醇3-激酶信号通路、细胞外调节蛋白激酶、雷帕霉素靶蛋白等信号通路调节海马突触可塑性或促进突触再生，从而发挥改善学习记忆的功能。这些上游细胞膜受体均是人参皂苷Rg1的作用靶点。     

两种中药制剂治疗原发性骨质疏松症的研究

目的:比较两种中药制剂对骨质疏松症的疗效.方法:将46例患者随机分为Ⅰ、Ⅱ两组,Ⅰ组服用健骨颗粒剂,Ⅱ组服用骨松宝颗粒剂,观察6个月,治疗前后使用UBIS 5000型超声骨密度仪检测骨密度.结果:两组患者治疗后的超声振幅衰减值和骨硬度均明显升高(P<0.01),而相对骨折危险性明显减小(P<0.05).结论:两种中药制剂均能提高骨密度、减少骨折危险性,从而有效地治疗原发性骨质疏松症.     

双波长薄层扫描法测定一捻金中大黄素含量

一捻金系《药典》品种〔１〕，由大黄、人参、朱砂、槟榔、牵牛子等中药组成，具有消食导滞、祛痰通便之功效，用于小儿停乳停食、腹胀便秘、痰盛喘咳等症。由于制剂成分复杂，《药典》对该品种的质量控制方法较为简单。作者通过试验，摸索出双波长薄层扫描法测定其有效成...     

电针对海洛因心理依赖小鼠Ca^2＋浓度的影响

目的:观察电针刺激对海洛因心理依赖小鼠Ca2 浓度的影响.方法:用海洛因皮下注射联合条件位置偏爱(CPP)复制海洛因心理依赖模型,以电针刺激海洛因心理依赖小鼠模型"内关"、"三阴交",并点刺"四神聪",并用流式细胞技术检测其海马Ca2 浓度.结果:模型组平均荧光强度显著升高;针刺可显著降低海洛因心理依赖模型动物平均荧光强度;西药纳曲酮降低海洛因心理依赖模型动物平均荧光强度效果不显著;针刺对正常小鼠平均荧光强度改变不显著.结论:电针对CPP刺激诱发复吸具有抑制作用,电针对于淡化或消除海洛因心理依赖的记忆痕迹可能是通过降低Ca2 浓度而实现.     

牧荆油乳液和牧荆油胶丸的药理作用及毒性

牧荆油乳液和牧荆油胶丸经灌胃给药，通过小鼠浓氨水喷雾法及电刺激猫喉上神经引咳法实验，表明有镇咳作用；用小鼠气管段排泌酚红法及大鼠毛细玻管排痰法实验，提示有祛痰作用：豚鼠雾引喘法显示有平喘作用。急慢性毒性试验证明，两种制剂毒性相似且很低，对大鼠心、肝肾等脏器无病理性损害。     

骨关节炎Ⅰ号预防氢化可的松所致兔软骨细胞损伤作用

目的：探讨骨关节炎Ⅰ号预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用。方法：用3—4周兔关节软骨,经胶原酶Ⅱ消化,建立软骨细胞体外培养体系,经阿尔辛蓝、甲苯胺蓝染色鉴定后,在软骨细胞培养体系中分别加入不同浓度的骨关节炎Ⅰ号与氢化可的松的混合液,通过倒置显微镜观察软骨细胞形态变化,用MTT比色法观察软骨细胞OD值的变化。结果：1．25,2．5mg／ml氢化可的松培养24h的软骨细胞严重损伤或死亡。1．25mg／ml氢化可的松与150mg／ml骨关节炎Ⅰ号混合液培养的软骨细胞,以及2．5mg／ml氢化可的松与300mg／ml骨关节炎Ⅰ号混合液培养的软骨细胞生长均良好。MTT检测结果与软骨细胞形态观察一致。结论：骨关节炎Ⅰ号具有预防氢化可的松对软骨细胞的损伤作用。     

经鼻给药沉香精油对单次长时间应激小鼠PTSD样行为及海马GluN2A、GluN2B表达的影响

目的 评价经鼻给药沉香精油对单次长时间应激（single-prolonged stress,SPS）诱导的小鼠创伤后应激障碍（posttraumatic stress disorder,PTSD）样行为的作用,并从突触的角度探讨其可能的作用机制。方法 通过气相色谱—质谱联用定性分析沉香精油主要成分;将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、沉香精油低剂量组、沉香精油高剂量组和阳性药组\[罗利普兰(Rolipram,ROL)\],每组8只。采用行为学实验评价SPS小鼠的PTSD样行为：分别通过恐惧记忆测试实验检测小鼠恐惧凝滞时间,旷场和高架十字迷宫实验评价小鼠的焦虑样行为。Western blot法检测小鼠海马组织N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR）2A亚单位（GluN2A）、2B亚单位（GluN2B）蛋白表达水平。结果 沉香精油样品中共检测到117种挥发性成分。动物实验结果表明,与正常组比较,模型组小鼠表现出强烈的焦虑样行为及恐惧记忆消退异常（P＜0.05）,而沉香精油及阳性药ROL可明显改善SPS小鼠的异常行为（P＜0.05）,并逆转GluN2A、GluN2B的异常表达（P＜0.05）。结论 经鼻给药沉香精油对SPS诱导的小鼠PTSD样行为具有改善作用,其机制可能与调控GluN2A、GluN2B蛋白表达有关。