法医STR分型电泳凝胶稳定参数的探讨

目的探讨对法医STR基因分型检测使用的毛细管电泳筛分介质进行评价的参数,为电泳凝胶验证评价提供参考指标。方法采用ABI 3130xl遗传分析仪,以3130 POP-4TM凝胶为筛分介质,以分子量内标GS500LIZ和Typer500为样本,多批次进行毛细管电泳;对原始数据进行分组统计,得到单碱基对相对迁移时间及其相对标准偏差（RSD）。结果分子量内标GS500LIZ和Typer500在POP-4TM凝胶中电泳,单碱基对相对迁移时间的统计结果表现趋势相似,即随着DNA片段增大,单碱基对相对迁移时间的均值减小,标准差及相对标准偏差增大。组间方差分析结果符合方差齐性,P〈0.01,组间多重比较,P〈0.000 28（Bonferron校正）。结论单碱基对相对迁移时间的相对标准偏差（RSD）是毛细管电泳重现性的重要参数,可为凝胶研发和验证提供参考性指标。     

红细胞酸性磷酸酶聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分型研究及其在上海地区的分布频率

红细胞酸性磷酸酶(EAP)已被广泛地应用于法医学个人识别中,它具有六种不同的遗传表现型:A、BA、B、CA、CB、C,受控于2号染色体上的三个共显性等位基因Pa、Pb、Pc、中国人群中至今尚未见有 C、CA 和 CB 型的报道。     

用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法调查西藏藏族群体GC亚型频率报道

作者采用超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法检测了142例西藏地区无关藏族青年男女GC亚型,发现6例变异型,其中2例1A变异;1例1c变异;3例1F1S-2变异,这种新的变异型,迄今国内外尚未见报道。GC亚型的基因频率分别为:GC*1F=0.3921、GC*1S=0.3705、GC*2=0.2266、GC*1A=0.0072、GC*1C=0.0036。个人识别机率为0.8079;非父排除率为0.3430。     

应用窄范围两性电解质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法检验人血痕中的Gc亚型

采用窄范围两性电解质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦加免疫吸印技术,对人血痕中 Gc 亚型进行分型,并调查了北京地区284名无关汉族群体的 Gc 亚型的分布及基因频率。结果显示:Gc~(IF)0.4287,Gc~(IS)0.2500.Gc~20.3222.观察值与期望值吻合度良好(ΣX~2=0.7530,P>0.80).Gc 的个人识别率为0.6507.且室温下保存7周的血痕可以准确判型。将调查结果与中国其它地区及国外不同人种 Gc 亚型的表型的分布与基因频率进行了比较,发现地理及人种间差异明显。     

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段直接PCR的简易方法

将聚丙烯酸胺凝胶中ＤＮＡ片段于ＰＣＲ缓冲液中电洗脱，加入ＰＣＲ反应试剂，直接扩增目的ＤＮＡ作进一步分析，ＤＮＡ片段回收效率为０．８９±０．０５，本方法简便、快速。     

荧光标记复合扩增毛细管电泳法在SNP分型中的应用

目的采用荧光标记复合扩增毛细管电泳法，对辽南地区汉族人群13个SNP进行等位基因频率调查，并评价其法医学应用价值。方法选择13个双等位基因SNP，应用荧光标记片段长度差异等位基因特异性复合扩增SNP分型方法，对辽南地区汉族人群进行群体调查。结果每个SNP纯合子为单一产物峰，杂合子则为长度不同的两个产物峰。不同位点扩增产物长度不同，根据产物长度和产物峰数量进行SNP分型，其结果与直接测序完全一致。同时获得辽南地区汉族人群13个SNP等位基因频率。结论采用荧光标记复合扩增毛细管电泳法进行SNP分型，方法简单实用，在法医学个人识别领域具有较高的应用。     

广州地区人群血清Gc型的测定——聚丙烯胺酰凝胶圆盘电泳法

<正> 型特性异成分(Group Specific Component,简称Gc)是人血清中的一组α_2球蛋白。1959年,Hirschfeld用免疫电泳法首先发现Gc,并将人群分为Gc1-1,2-1,和2-2三型。此后,许多学者对Gc进行了多方面的研究,证实Gc的多态性是由按孟德尔遗传方式的基因控制的。许多国家和地区的法医学工作者已把Gc分型应用于实际检案工作中。     

数字编码小卫星可变重复序列法对中国汉人分型

介绍用辣根过氧化物酶标记的寡核苷酸探针检测的数字编码小卫星MS32可变重复序列方法。经用此法研究发现，中国汉人可得到50个编码以上，无关个体前50个编码中至少有20个编码不同，未发现两个无关个体的编码相同，50个编码全部相同的概率为4．09×10-16。三种重单位，即a-型、t-型和o-型出现比例分别为61．5％、32％和6．5％。MVR－PCR得到的数字编码具有高度的变异性，识别率高，为法医物证检验提供一个新的个人识别方法。     

荧光标记的ASP-PCR法对ABO基因分型的研究

目的建立一种方便准确的ABO基因分型检验方法。方法选取ABO基因外显子6和7上的3个位点nt261、nt297和nt803,分别对第6和7外显子进行扩增,并对扩增产物进行测序得出样本的基因型;然后用荧光标记的等位基因特异性引物对已知基因型的样本进行扩增,并用3130遗传分析仪进行电泳分析。结果该方法检出的基因型与测序得出的基因型完全一致。结论等位基因特异性引物法分型结果准确,特异性高,可用于法医学中对犯罪嫌疑人的筛查。     

两种DNA提取法对签字笔上脱落细胞STR分型比较

目的比较Chelex-100法和硅珠法两种DNA提取法,在签字笔上附着微量脱落上皮细胞分型中的应用效果。方法 17名志愿者每人使用14支签字笔,每支笔每天使用20min,为期1个月,平均分为两组,分别保存1、3、5、7、14、21和28d,同时运用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取签字笔上遗留微量脱落细胞中的DNA,用Identifiler复合扩增系统在AB I 3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型,同时采集上述17名志愿者口腔拭子作为对照。结果以基因座检出个数为指标,使用后签字笔保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均有统计学意义(P0.01);口腔拭子保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论对于微量检材,应用硅珠法提取的DNA分型效果明显优于Chelex-100法,具有较高的应用价值,而在检材量比较多时区别不明显。     

两种DNA提取法对不同色泽肋软骨STR分型成功率的比较

目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例腐败尸体肋软骨,均检测到全部STR基因座的等位基因型。用Chelex-100法提取的肋软骨中,22例(11例白色、8例淡黄色、3例黄色)检测出全部STR基因座的等位基因型;7例(3例黄色、4例黄褐色)检测出部分STR基因座的等位基因型;1例黑灰色的腐败尸体肋软骨,未检测出STR基因座的等位基因型。结论根据肋软骨的色泽,选择适宜的DNA提取方法。对于颜色较深的肋软骨,用酚-氯仿法进行DNA提取有助于提高其STR基因座的检出率。     

PCR法对HLA-DQ_α基因的分型及其在性犯罪鉴定中的应用

本文应用 PCR 法及 ASO 探针斑点杂交技术,对100例无关个体血液 DNA 及10例性犯罪案件混合斑中精子 DNA 进行了 HLA-DQα基因的扩增及其 DNA 分型。结果正常人0.1～0.3μgDNA 就能满足 DQα基因扩增的需要。在100例个体中可以观察到由4种等位基因组成的10种 DQα基因型。10例不同条件的混合斑中精子 DNA 经30～60次扩增后与 ASO 探针杂交均能准确地判定 DQα基因型。HLA-DQα是个体识别能力较强的遗传标志。本文为性犯罪中精子来源的个体识别提供了一个新方法,具有一定的实用价值。     

两种DNA提取法对腐败胎盘组织STR分型结果的比较

在法医物证检验工作中.对于新鲜的人体组织检材,一般采用Chelex-100法提取DNA就可得到理想的STR分型结果,但是对于高度腐败的人体组织,单纯地依靠此法检测存在失败的可能.笔者运用两种不同的DNA提取法对高度腐败的胎盘组织进行了DNA提取,并对其STR基因座分型的检出率、DNA含量及纯度进行了比较.