应用"WH”反应板做人血种属鉴定的实验观察

"WH”反应板是由公安部从美国进口的供基层单位做法医物证种属试验以确证人血的器材,系由美国医药公司生产,以一步法作大便潜血检查之用.此反应板所使用的试剂以及检验的原理不甚明了,故本文对此板检验人血的特异性及其灵敏度作了实验观察,现报告如下:     

人血、人精斑快速检验试剂盒的研制及应用

1 人Hb快速检验试剂盒1.1 实验原理本试剂盒采用ELISA双抗体夹心法检测人Hb确证人血.用人Hb单克隆酶标抗体第二抗体.用抗人Hb血清包被微孔板制成固相抗体第一抗体.检测时将检材浸泡液一滴加入微孔中,室温反应10分钟后,倒掉微孔中的液体,用自来水冲洗两次甩干后,加入人Hb单克隆酶标抗体一滴,室温反应10分钟后,倒掉微孔中的液体,用自来水冲洗3次甩干,然后在微孔中加入显色液A、B各一滴,室温避光保存10分钟后观察结果,加入显色液后,阳性为蓝色,阴性不变色.1.2 试剂盒组成(1)微孔板48孔(12孔4条),用上海司法部刑事科学技术研究所生产的抗人Hb血清稀释包被,2℃～8℃干燥保存,有效期内保持稳定.     

分散固相萃取-GC/MS法测定人血中啶虫脒的含量

目的建立人血中新型农药啶虫脒的检验方法。方法用分散固相萃取法提取人血中啶虫脒,GC/MS/SIM法进行测定。结果在0.02μg/mL～2μg/mL添加水平范围内,线性关系良好,啶虫脒的平均添加回收率在76.4%～89.8%之间,相对标准偏差在1.3%～8.3%之间,啶虫脒的检出限为0.0075μg/mL。结论该方法操作简便,结果准确,适用于人血中啶虫脒的检验。     

自制与商业化抗人精液蛋白P30金标试剂条的法医学应用比较

目的　检测比较自制和商业销售的抗人精液蛋白P30 金标试剂条 ,探讨它们法医学应用的可靠性。方法　以人精液和人前列腺特异蛋白检测效价及灵敏度 ,以人阴道分泌物、人血清、人唾液和人初乳检测特异性 ,以保存不同年限的陈旧人精斑和斑痕类检材测定检验实际检材的能力。结果　自制抗人精液蛋白P30 金标试剂条效价及灵敏度与商业销售的试剂条中较好的基本相当 ,特异性则相当或好于商业试剂条 ,对非特异性测定均为阴性 ,而商业化试剂条则多有非特异性反应。结论　使用商业金标试剂条 ,要确定其是否合乎法医学检验标准与要求。     

抗人Hb试剂盒的应用

抗人Hb试剂盒是采用金标单克隆抗体技术,检验血痕种属的一种新的试剂盒。通过对不同稀释度的人血及动物血的检测及不同温度、pH值等环境因素下的检验,证实使用抗人Hb试剂盒检验血痕的方法是一种简单、快速、灵敏、稳定、特异性好的实验方法。     

GoldeneyeTM 20A-M试剂盒在数据库建设中的应用

目的 研究GoldeneyeTM 20A-M试剂盒在DNA数据库建设中的应用.方法 针对血滤纸特性,优化不同条件血痕样品的取样量、扩增循环次数,缩短PCR扩增时间,以建立适合批量样品直接快速扩增检验的方法,并将其应用于1 200份数据库样品的检验中.结果 确定了批量样本检验的最适取样量和扩增循环次数,建立了快速扩增反应程序,1 200份样品的直接快速扩增检验成功率为98.4％,批量检验92份样品(1板)从取样到电泳完成只需6h.结论 GoldeneyeTM 20A-M试剂盒的应用,免去DNA提取过程,方法简单、快速、获得信息量大,适用于DNA数据库建设的需要.     

进行PCR时发生中断的补救方法

在进行PCR检验时被中断,常有发生,一般的补救办法就是重新建立反应体系,重加模板,重新扩增。本文在PCR的各个阶段人为地制造PCR中断,研究中断发生时所处阶段以及中断状态持续时间长短对继续PCR的影响。1材料与方法1.1试剂仪器与环境以硅珠法提取人血DNA作为扩增模板。AmpFl-STR PROFILER PLUS(以下简写为PP)和IDENTI-FILER(以下简写为ID)试剂盒(ABI)。2700、9700型PCR扩增仪(PE公司),3100基因分析仪(ABI)。环境室温在18℃~22℃间波动。1.2方法根据ABI AmpFlSTR PROFILER PLUS用户手册推荐,本文将热循环的条…     

同胞亲缘关系认定排查犯罪嫌疑人

1案例2005年5月,本市居民冯某(女,48岁)在家中被杀。现场勘查时提取了死者心血(1号检材),死者阴道擦拭纱布(2号检材,经检验确定有精子),床边纸篓内红色卫生纸1张(3号检材,经检验确定有精子),另外还在书橱内提取了1张白色卫生纸,上有少量点状红色斑迹(4号检材,经检验确定为人血)     

X-STR基因座单倍型分析在特大杀人案中的应用

正1案例资料1999年12月29日,我市海化经济开发区某村任某(男,48岁)、孙某(女,47岁)夫妇及其子(16岁)、女(21岁)在家中被害。2012年对提取的现场院内带有足迹的方砖检测,其中1块上可疑滴落血迹检出男性人血,录入全国DNA数据库比对,没有比中结果。但仍需确定该男性人血是任某父子中1人还是嫌疑人所留。因四名受害人血样已失去检验条件,未检出STR分型,且任某父母、孙某母亲均已去世,故提取任某3个弟弟、孙某父亲及3个妹妹、1个弟弟血样进行X-STR检验。     

用人血清-唾液-初乳斑痕吸收免疫抗血清制备特异性抗人精液血清

本研究采用人血清-唾液-初乳混合液斑痕吸收抗人精液免疫血清,以消除抗血清的外器官特异性交叉反应。吸收后的抗人精液血清,仅和人精液及附睾和前列腺组织提取液发生反应,和人血清、唾液、初乳、阴道分泌液及尿液等5种人类体液分泌液及22种人体组织浸取液无交叉免疫反应;和8种动物精液也无交叉反应,具有良好的器官及种属特异性。获得的抗血清清亮透明,效价高。血清吸收方法简便易行,成本低,易于普及推广。     

应用COI基因鉴定动物组织种属1例

1案例资料1.1简要案情2018年10月,群众报警称在某市区街边垃圾桶内发现一块疑似人体组织。该区刑警大队遂送检该疑似人体组织(酒精浸泡过,以下简称"检材")至本机构,委托进行种属鉴定。1.2检验过程1.2.1人源常规检验人血确认实验:根据《人血红蛋白检测金标试剂条法》(GA 765-2008)进行。     

细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的对比

目的 比较细胞裂解法和磁珠法在法医DNA检验中的效果,探讨两种方法在法医学检验中的运用。方法 使用细胞裂解法和磁珠法获取不同数量的THP-1细胞的基因组DNA并使用实时定量PCR检测DNA含量。使用细胞裂解法和磁珠法对不同稀释倍数的人血进行STR分型检测。结果 当THP-1细胞数量为100、400和800个时,使用细胞裂解法提取的DNA含量分别为(1.219±0.334)、(5.081±0.335)、(9.332±0.318) ng;使用磁珠法提取的DNA含量分别为(1.020±0.281)、(3.634±0.482)、(7.896±0.759) ng,在THP-1细胞数量为400和800个时,细胞裂解法提取的DNA含量高于磁珠法(P<0.05)。使用细胞裂解法和磁珠法检测不同稀释倍数人血的STR分型时灵敏度相近,在血样稀释100、300和500倍时均能获取完整的STR分型,血样稀释700倍时,均无法检出完整STR分型。使用细胞裂解法无法检出未稀释人血的STR分型。结论 细胞裂解法操作方便,能最大程度保留模板DNA,有望适用于微量血痕检验。     

ELISA检测人IgG确定种属的改良方法——酶联免疫在物证检验中的应用研究之二

本实验采用含1/10,000戊二醛的0.05M,pH9.6碳酸盐缓冲液稀释抗体包被反应板,并使酶标记抗体浓度由1/100提高到1/50,使实验时间由常规方法的20多小时缩短到6小时。1∶320,000稀释的标定的人新鲜血痕浸液仍能得出阳性结果。本实验除用聚苯乙烯反应板外,还使用了聚氯乙烯反应板。两种反应板的实验条件及结果相同。聚氯乙烯反应板可以根据实验所需反应孔的多少进行剪裁,从而使实验材料得到节约。这两种反应板都可以预先用抗体包被后,置-20℃冰箱保存备用,从而简化了操作。本方法快速、灵敏、简单、重复性好,便于推广。     

DNA亲子鉴定破案的威力

1案例资料2002年1月27日,某市一粮站家属区姚某(女,49岁)及女儿魏某(14岁)被人杀死在家中。经勘查,提取现场不同地点多处血迹送检,经血痕初步检验,死者姚某及魏某均为“O”型血。死者姚某的丈夫也为“O”型血。在姚某家室内提取的多处不同地点血迹中大多数检验为O型,在客厅地上及卧室桌子上:大立柜内报纸上等几处却检出A型人血。遂寻找与现场有关的犯罪嫌疑人田某(男,21岁)。由于自案发后田某失踪无法与田某血作DNA同一认定。为了确定现场A型人血是否为田某所留,作者采取田某父亲、母亲血做DNA亲子鉴定。检验和结论:选取死者姚某家大立…     

GPC-GC/MS法测定人血中的丙泊酚

目的采用GPC-GC/MS法测定人血中的丙泊酚。方法以百里香酚为内标,人血中的丙泊酚用乙醚提取,离心后取上层有机层水浴挥干,残留物经丙酮/环己烷(3/7)复溶后用GPC-GC/MS检测。结果人血中丙泊酚在0.005~2.0μg/m L浓度范围内线性良好,线性方程y=0.961 8x+0.003 3,r2=0.994 2,日内、日间精密度均小于17%,提取回收率88.2%~101.5%。结论该方法操作简单、灵敏度高,其准确度、精密度及回收率均可达到人血中丙泊酚测定的要求,适用于法医毒物分析。     

抗人血红蛋白胶体金检测试剂条的研制

目的制备法医学检验所用的确定人血的免疫胶体金层析试剂条。方法选取抗人血红蛋白单克隆细胞株,制备其小鼠腹水,从腹水中纯化出单克隆抗体。制备胶体金并用一纯化的单克隆抗体包被,制成免疫胶体金。取玻璃纤维以免疫胶体金浸泡,烘干。在一硝酸纤维素膜上两个不同位置分别点加另一抗人血红蛋白抗体和羊抗鼠IgG。搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性。结果制成的免疫胶体金试剂条可对稀释至20万倍的人血红蛋白溶液显示阳性,对法医学检验常见8种动物的血溶液显示阴性。结论所制备抗人血红蛋白胶体金试剂条可以应用于法医学检验。     

磁介质视听资料的检验与研究

随着新的刑诉法的实施,视听证据的使用越来越多,对其进行的检验也增多,如何提高其检验的科学性及准确性,笔者在此仅作一些理论与实验上的探讨。 对于视频与音频的信号转换载体目前市场上有两种:一种是以磁介质作转换载体,如普通盒式录像带、盒式录音带等,另外一种是以光反射盘作转换载体,如VCD、CDA、CDR等。     

特异性抗人白蛋白血清制备

用乙基乙酰胺修饰的人血清白蛋白吸收免抗人白蛋白血清,可制威特异性极高的抗人白蛋白血清。用该血清和三氯化铬、人血清白蛋白包被的O型红细胞作指示细胞,做凝集抑制试验,能区别人血(斑)和包括灵长类在内的各种动物血(斑)。     

用荧光抗体法作血痕的种属鉴定

血痕的种属鉴定,最早是应用抗人血清作环状沉淀试验,后来使用特异性更好的抗人血红蛋白沉淀素血清替代抗人血清作各种沉淀试验.此外,还有应用抗人球蛋白消耗试验、间接血凝试验法、胶乳载体试验法.近来,随着免疫学实验技术的发展,应用酶联免疫技术等检测人血液中各种特异组分作血痕的种属鉴识.本文使用荧光标记抗体检测人血痕中的IgG组分,作人血和动物血的鉴别,取得较好结果,现将实验报告如下:     

Chelex快速处理法成功检测肛门拭子1例

在实际办案中 ,法医检验精斑多集中于阴棉、内裤、擦拭物 ,而肛门拭子检验较少 ,笔者遇到一例 ,并成功检出犯罪嫌疑人所留精斑的基因型。2 0 0 2年 3月 ,谢某 (女 ,4 2岁 )在中山市东区某出租屋被杀。提取死者谢某阴棉、肛门拭子及嫌疑人曾某、于某、周某等人血纱 ,进行ＰＣＲ检验比对。血痕、混合斑ＤＮＡ提取见文献[1] 。ＤＮＡ扩增 :采用ＰＥ公司Ｐｒｏｆｉｌｅｒｐｌｕｓ试剂盒扩增。电泳采用 310遗传分析议电泳分型。第一次检验事主阴棉中精斑 9个ＳＴＲ位点基因型均与嫌疑人曾某相同 ,偶合概率为 1.3× 10 -12 ,从而认定精斑为曾某所…