日本血吸虫冷冻辐照童虫苗免疫程序的研究

应用日本血吸虫冷冻童虫苗于家畜的免疫程序的研究包括免疫次数、注射部位以及佐剂使用对免疫效果和现场应用的关系。为此,特在豚鼠进行试验。试验分9组进行,共用90只豚鼠。试验结果指出,冷冻辐照童虫苗可用来作皮内注射或肌肉注射。1次皮内注射加佐剂的减虫率达50.24％(P<0.001),仅略低于不冷冻的辐照童虫苗的减虫率(53.38％P<0.001),两者差异不显著。1次肌肉注射加佐剂的减虫率达40.62％(P<0.001)。但1次肌肉注射不加佐剂的减虫率亦达40.66％(P<0.001)。2次肌注的减虫率并不显著地高于1次肌注的。可见冷冻辐照童虫苗作皮内注射要加佐剂。作肌肉注射不必加佐剂,亦不必作2次免疫。     

日本血吸虫童虫冷冻保藏方法试验

中、美合作研究结果业已证明,日本血吸虫辐照童虫苗对人工感染和现场试验免疫耕牛,都获得显著保护力。但这种活苗不能保存,不能运输。为了使日本血吸虫辐照童虫苗能作为重点地区、重点     

日本血吸虫童虫冷冻保藏方法的改进

研究日本血吸虫童虫保藏技术的目的是为了使经冷冻的童虫直接应用于免疫预防、免疫诊断、药物治疗的感染动物模型及虫种保存。自从James(1981)首先提出冷冻保存曼氏血吸虫以来,Stirewalt等(1984)、许绶泰等(1989,1990)相继进行冷冻保存血吸虫方法的研究。本文是在上述工作的基础上,对许绶泰等的冷冻保存童虫技术进行改进,以找出可以实际应用的方法。 (一)材料和方法 冷冻用日本血吸虫尾蚴由本所钉螺室提供,所用钉螺系湖北钉螺,血吸虫为日本血吸虫中国大陆株安徽贵池品系。冻存剂采用     

联合法冷冻保存日本血吸虫童虫的研究

James(1981)首先提出了冷冻保存曼氏血吸虫的乙二醇二步加入速冻法,Stirewalt等(1984)认为该法很好,但培养大量童虫并加以冷冻却有困难,因此作了改良。我们采用该二氏的基本方法,结合本实验室条件,用乙二醇二步加速冻法保存日本血吸虫童虫的研究中,取得了解冻后形态正常并活动的童虫最多占44.68％的试验结果。在此基础上,进一步找出了本文报道的“联合法”。此法可以培养大量童虫,并可在冰冻状态下进行童虫的辐照。     

日本血吸虫14d童虫凋亡现象的观察

为观察BALB/c小鼠源日本血吸虫14d童虫的细胞凋亡现象,分别采用TUNEL检测法和透射电子显微镜从DNA分子水平和细胞层面上进行定性观察,并应用FITC-Annexin-V/PI双染色法通过流式细胞仪定量检测虫体凋亡细胞比例。结果表明,采用这3种方法均能在日本血吸虫14d童虫中观察到一定程度的细胞凋亡现象,但不会导致日本血吸虫该时期童虫的异常生长发育。     

应用高剂量X射线辐照的日本血吸虫童虫对耕牛日本血吸虫病的免疫研究

在日本血吸虫病地方性流行区内,耕牛常受感染。在中国曾发现有560000头耕牛受感染。而在某一地方性流行区(安徽省石马湖农场)曾以粪孵法查89头水牛,感染率为55.9％。由于耕牛在东方国家是经济上具有重要性的农畜,耕牛血吸虫病是急待防治控制的。再则,因为耕牛可作为人的日本血吸虫病的重要的贮蓄宿主,有效的控制牛血吸虫病,无疑     

日本血吸虫童虫部分差异表达蛋白的质谱分析

应用蛋白质双向电泳技术和质谱技术对16日龄日本血吸虫童虫的可溶性蛋白进行分离、分析,得到了2 000±69个蛋白斑点,其中500±86个蛋白斑点与血吸虫雌虫和雄虫的蛋白所共有,童虫特异呈现的蛋白斑点有26±1个。对其中20个童虫特异呈现的蛋白斑点进行质谱和生物信息学分析的结果表明,它们代表了16种蛋白;对这些蛋白进行生物学功能预测的结果表明,它们可能与寄生虫的生物合成、能量代谢、信号传导和细胞构成等相关。     

MicroRNA-181a对日本血吸虫童虫抗原刺激巨噬细胞的免疫应答起负调节作用

用日本血吸虫童虫抗原SSA和miR-181a模拟物分别或共同刺激/转染RAW264.7巨噬细胞,再用实时定量PCR技术或流式细胞术分析细胞miR-181a和TNF-α等细胞因子及M1型和M2型巨噬细胞标记分子的表达变化。结果显示,日本血吸虫童虫抗原SSA刺激RAW264.7细胞后,miR-181a及IL-1β、IL-4、TNF-α、IL-10、IL-6等促炎因子上调表达,IL-13下调表达;miR-181a模拟物单独转染RAW264.7巨噬细胞后,细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α和M1型巨噬细胞标记分子INOS等下调表达,IL-4和M2型巨噬细胞标记分子arg-1上调表达。巨噬细胞先用SSA刺激后再转染miR-181a模拟物,IL-1β、IL-4、TNF-α、IL-10、IL-6等促炎因子都下调表达。流式细胞术分析结果显示,miR-181a对M1型标记物CD16/32的表达起到下调作用,对M2型标记分子CD206的表达起上调作用。本研究提示miR-181a对日本血吸虫SSA抗原刺激的巨噬细胞的免疫应答可能起负调节作用,并促进巨噬细胞向M2型细胞转化。     

日本血吸虫DNA疫苗对黄牛的田间免疫试验

用VRSj2 8、VRSj2 3和VRSj2 8+VRSj2 3对黄牛免疫后 ,在日本血吸虫病流行区云南省洱源县进行日本血吸虫田间自然攻击 5 4d ,免疫牛的减成虫率为 3 3 .0 %～ 44 .0 % (P <0 .0 5 ) ,粪便和肝组织的减卵率较高 ,特异性IgG在首次免疫后显著增高。提示 ,用此类疫苗对牛进行大规模免疫预防 ,可减少人群感染的机会。     

丙硫苯咪唑对人工感染贝氏莫尼茨绦虫童虫的绵羊药效试验

1976年,丙硫苯咪唑(Albendazole)作为一种新的高效、低毒、广谱抗蠕虫药问世,颇受重视。国内外学者在其药效学上做了许多有意义的工作,证实丙硫苯咪唑对畜禽及人体寄生绦虫的成虫有很好的疗效。最近有人研究了其对绦虫蚴的作用,取得可观的结果。Saimot(1983)和Morris(1983)将其用于人体棘球蚴(Echinococcus)病的治疗;韩宇等(1683)用其治疗人工和自然感染的猪囊尾蚴(Cysticerus cellulosae)病。丙硫苯咪唑对绦虫童虫的药效研究尚未见报道。本试验以绵羊为实验对象,旨在观察丙硫苯咪唑对人工感染不同日龄贝氏莫尼茨绦虫(Moniezia benedeni)童虫驱虫效果。     

伏基弗对黄牛人工感染肝片形吸虫童虫、日本血吸虫的杀虫效果

Closantel(译名伏基弗)是比利时杨森制药公司生产的一种能杀多种家畜寄生虫的有效药物。该药对肝片形吸虫成虫有效已有记载,但对日本血吸虫是否有效尚未见报道。本试验拟以日本血吸虫成虫和4周龄肝片形吸虫人工感染黄牛,以观察该药对这两种寄生虫的杀灭效果。     

国产“拜耳9015”对人工感染肝片吸虫绵羊的童虫疗效试验

我们应用武汉医药工业研究所试制的“拜耳9015”,于1971～1972年先后对自然感染肝片吸虫的44只绵羊和164头黄牛进行了疗效(扩大)试验与毒性观察。试验结果表明,国产“拜耳9015”对绵羊4毫克/公斤,一次经口投服,对成虫的驱虫效果可高达100％,而在临床上不表现任何症状;毒性试验时投给12毫克/公斤,即3倍的治疗剂量,亦无明显的临床反应(1)。对黄牛3毫克/公斤,一次经口投服,对成虫的驱虫效果为97.02～98.74％,     

日本血吸虫重组抗原Sj GST Paramyosin 和 Sj 23对绵羊的保护性免疫试验

１９９４～１９９５和１９９７年应用日本血吸虫３类候选疫苗分别免疫绵羊，各组的减虫率、粪便虫卵减少率和组织（肝、大肠、小肠）的虫卵减少率分别是：虫体副肌球蛋白（ｎ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组１７．４％～５５．３％，１４．６％～６８．１％和４８．９％～７６．７％；重组副肌球蛋白（ｒ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组４１．４％～４４．２％，１５．９％～２５．１％和４１．１％～４８．０％；Ｓｊ２６谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）组５３．４％～６２．１％，１１．０％～３８．６％和１４．０％～６５．０％；ｒＳｊ２８ＧＳＴ组６１．４％～６８．５％，２２．９％～６０．０％和３９．０％～７６．０％；重组日本血吸虫２３ｋｕ大亲水区表膜蛋白（ｒＳｊ２３）组５１．２％～６６．１％，２１．９％～５８．４％和５４．３％～７６．７％。以ＥＬＩＳＡ检测免疫后的绵羊血清，３类抗原均诱发高水平的特异性ＩｇＧ抗体，表明以上疫苗具有诱发绵羊产生保护性免疫的作用。     

磁感应孵化日本血吸虫卵的试验

日本血吸虫卵的孵化条件,最主要的是水的性质,因其可左右毛蚴数的孵出率。本试验的目的是为了探求水分子结构改造对血吸虫毛蚴孵化率的影响。结果发现磁感应对血吸虫卵有促进孵化的作用,从而对提高阳性牛检出率增添了一种诊断手段。     

电热毯孵化日本血吸虫卵的试验

(一)材料和方法 1.血吸虫卵:采用人工接种日本血吸虫发病牛粪便,试验用量,单重20克,经淘洗后为试验样本。 2.孵化水:将自来水煮沸去氯后,冷却备用。 3.电热毯:为美国出品,Heizkissen Typsw-O.2,220V-50W,宽28.5厘米,长40厘米。开三档。商标Rowenia。毯 4.试验方法:将淘洗粪孵粪样,置300ml孵化瓶内,用冰块降至5℃,然后置电热毯上,开始升温测定,瓶内插入摄氏温度计,用棉析法观察毛蚴孵出的数量,当温度达30℃停止。每10分钟观察一次并记录。     

丙硫苯咪唑对绵羊人工感染不同日龄肝片吸虫童虫的药效试验

一些研究报告表明,丙硫苯咪唑(Albendazole)对肝片吸虫成虫具有很好的疗效,对童虫也有所涉及,但尚无系统、完整的资料,所得结果也不甚一致。本实验以人工感染肝片吸虫的绵羊为对象;进一步探讨一定剂量的丙硫苯咪唑对不同日龄童虫的作用结果,力图为临床实践提供可信的依据。     

应用高剂量辐照童虫免疫接种耕牛预防日本血吸虫病

近年来,应用虫苗防制血吸虫病是令人感兴趣的研究课题。李书颖、徐锡藩于1969年首先提出的高剂量辐照童虫制成的致弱活苗,虽然其实际应用的可能性尚待研究,但看来是最有希望的虫苗。从1978年至1980年英国和苏丹的研究者在伦敦卫生和热带病学院的倡导下联合研究了应用辐照童虫免疫接种牛犊,使其抵抗牛血吸虫尾蚴感染的攻击,这项工作已在实验室和苏丹该病流行区自然感染的放牧区进行,减虫率和减卵率约为60％至70％,希望牛血吸虫病最终通过童虫苗的应用而在苏丹得到控制。     

日本血吸虫丝氨酸-苏氨酸蛋白磷酸酶基因的表达及其免疫保护试验

为研究日本血吸虫丝氨酸-苏氨酸蛋白磷酸酶(SjPP)的免疫功能,构建了原核表达重组质粒pET28a( )-SjPP,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)进行诱导表达,并用重组蛋白进行了小鼠免疫保护试验,免疫剂量为每次20μg/只,共免疫3次。结果表明,pET28a( )-SjPP/BL21(DE3)在0.1 mmol/L IPTG诱导2 h时,每1 g菌体可产生17.8 mg以包涵体形式存在的重组蛋白;重组蛋白免疫小鼠后诱导产生了高效价的血清特异性IgG抗体,并获得了部分减虫率、肝组织减卵率和显著的粪便减卵率,具有一定的免疫保护作用。     

烯虫磷防治绵羊痒螨的试验

烯虫磷防治绵羊痒螨的试验呼和巴特尔宝音达来（内蒙古农牧学院呼和浩特０１００１８）（内蒙古兽医工作站）为了验证烯虫磷对绵羊痒螨病的防治效果，我们于１９９４年１０月２５日至１９９５年１月２５日在呼和浩特市郊区进行了烯虫磷防治绵羊痒螨病的疗效试验。１试验材...     

虫克星对绵羊寄生虫的驱虫效果试验

虫克星对绵羊寄生虫的驱虫效果试验李跃增，魏润生，宋建国，张正礼，施耀华（甘肃省兽医技术推广总站７３００４６）（永登县兽医站）为找到一种高效价廉的驱虫药物以代替美国默沙东药广生产的害获灭，我们做了本试验。（一）材料和方法１．对照药物：害获灭（Ｉｖｏｍｅ...