基因工程在寄生虫病研究中的应用

迄今为止,从分子学水平上研究寄生虫病的报道较少。其主要原因是:没有大量能够用于纯化和定性的寄生虫及其抗原不稳定,所以对宿主保护性免疫反应尤为重要的蛋白质的研究与鉴定方面工作就更缓慢了。     

羔羊大肠杆菌腹泻双价基因工程菌毛苗应用的研究

对２９１只怀孕母羊皮下注射菌毛苗０．５ｍｇ／只，其局部和全身均无任何不良反应，不会造成母羊流产、早产及羔羊畸形，进一步证明该菌毛苗安全性好。应用菌毛苗主动免疫的怀羔母羊所产羔羊通过吃初孔获得被动免疫，攻毒结果，保护率均在８０％以上，证明该苗具有较强的Ｋ＿（９９）和Ｆ＿（４１）免疫原性，可使羔羊获得确实的被动免疫，对羔羊的生长发育产生良好的影响。     

细胞因子及其应用的研究进展

概述了细胞因子的特性、分类及其基因转录和表达调控的机理,介绍了一些细胞因子在疾病诊断、治疗和预防方面的作用,对其在免疫学,特别是作为疫苗佐剂方面的应用前景进行了展望。     

凝乳酶的基因工程

基因重组技术,是将DNA链上的基因人为地连接,可创造异种基因的一种技术。现已将这一技术应用于制造干酪所必需的凝乳酶的提取方面。目前世界上干酪制造量的一半以上是用微生物凝乳酶,基因重组技术在这方面的任务是通过微生物大量生产中的凝乳酶,可见其具有较强的实用性和现实意义。为此,Beppu, T. 等人对凝乳酶的基因工程进行了深入的研究,并取得了显著的成就。 (一)凝乳酶原mRNA的提纯 从犊牛第四胃粘膜层分泌的没有活性的前体蛋白(凝乳酶原),分子量约四万道尔顿,365个氨基酸构成的凝乳酶原,其N末端由42个氨基酸构成的肽,在酸性条件下由自身的触酶切除,变成有活性的凝乳酶,Beppu, T. 想从组织的凝     

预防犊牛大肠杆菌腹泻双价基因工程菌毛苗应用的研究

用大肠杆菌Ｋ_９９、Ｆ_４１基因工程菌毛苗对１５００头怀孕母牛皮下注射菌毛苗５ｍｇ／头，局部和全身均无任何不良反应，未造成母牛流产、早产及犊牛畸形，无任何毒副作用。对菌毛苗主动免疫的怀孕母牛所产犊牛吃初乳后用强毒Ｋ_９９、Ｆ_４１大肠杆菌攻击，保护率达９０％，证明该菌毛苗具有较强的Ｋ_９９和Ｆ_４１免疫原性，可使犊牛获得确实的被动免疫。在５个牛场对１４８０头犊牛进行菌毛苗免疫效果观察，未免疫对照组腹泻发病率为５７．４％～７６．２％，免疫后降至４．２％～５．６５％；未免疫对照组腹泻死亡率为４．３％～４５．２％，免疫后仅为０～１．０４％。试验结果表明，该菌毛苗能有效地预防犊牛大肠杆菌腹泻的发生。     

仔猪腹泻基因工程双价疫苗的临床应用

仔猪腹泻基因工程双价疫苗的临床应用作者试用仔猪腹泻基因工程双价疫苗对怀孕母猪进行免疫，以控制仔猪腹泻的发生，收到了较好的效果。疫苗来源由上海联盈基因工程有限公司和上海松江兽医生物药品厂联合生产的仔猪腹泻基因工程双价Ｋ８８－Ｋ９９灭活疫苗（以下简称“仔...     

猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺研究

从重组抗原的表达、复性与纯化、疫苗的配制及疫苗的质量控制等4个方面对猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺进行了探索.确定重组抗原表达的最佳培养液为LB磷酸盐培养液,诱导剂为10g/L乳糖,并根据接种量、溶解氧、罐压、发酵时间等对发酵结果的影响,确定了发酵培养的最佳条件.在重组抗原的复性与纯化方面,工程菌的裂解条件为先用溶菌酶感作再用超声波破菌,超声强度为240W 5次;包涵体的纯化先采用低浓度的尿素洗涤2次,再以5 g/L Triton X-100洗涤1遍,包涵体纯度可达50%以上;重组抗原的复性以静置缓慢透析或分步稀释法为佳,复性液为含2 mol/L尿素、160μmol/L PEG 4000、1.0 mmol/L GSH、0.1 mmol/L GSSG的pH 9.0 50 mmol/L Tris-HCl、1 mmol/L EDTA缓冲液;重组抗原的纯化采用分子筛凝胶层析和离子交换凝胶层析的色谱组合,重组抗原的纯度达90%以上.此外对该疫苗进行了中试生产,共生产7批,产品全部合格,表明该生产工艺稳定,可批量化生产.     

转基因小鼠研究在家畜基因工程中的意义

Gordon等(1980)将外源基因导入小鼠受精卵中,得到转基因小鼠。这是人类首次成功地把外源克隆基因转移到哺乳动物基因组内。目前,国外已有十几种外源性基因成功地转移到小鼠体内。并对转基因小鼠进行了广泛深入的研究,从转基因方法(技术)到外源基因整合、表达等基础理论方面积累了丰富的资料。(一)转基因动物产生的方法1.DNA显微注射法:这种方法是把克隆DNA直接注入到受精卵的一个原核中。在小鼠,一般把DNA注入到雄原核中,而此时雄原核较雌     

基因工程疫苗的研究进展

自从 1796年EdwardJenne医生发明第一种真正意义上的疫苗———天花疫苗至今 ,人类已研制出了上千种疫苗并在各种疾病的预防和控制中广泛应用 ,疫苗已成为人类同疾病斗争的一种必不可少的重要武器。传统疫苗的研制和生产主要是通过改变培养条件 ,或在不同寄主动物上传代使致病微生物毒性减弱 ,或通过物理、化学方法将其灭活来完成的。随着人类知识的不断进步 ,传统疫苗的局限性也日益显露出来 :①动物和人类的病毒需要在动物细胞中培养 ,这使得疫苗生产的成本很高 ;②疫苗中的致病物质在疫苗生产过程中有可能没有完全杀死或充分减毒 ,这会…     

基因工程抗体的研究进展

基因工程抗体 (geneengineeringantibody ,GEAb)是通过PCR技术获得抗体基因或抗体片段基因 ,与适当载体重组后引入不同表达系统所产生的抗体 ,被广泛应用于疾病的临床诊断、预防和治疗、基础理论研究等诸多领域 ,并取得令人鼓舞的结果。鉴于鼠源性单抗会引起人抗鼠抗体反应 ,影响疗效而不能重复使用 ,同时用杂交瘤技术生产单抗成本较高而难以普及 ,于是各国学者即而转向GEAb的研究。 1984年 ,国外首次报道在骨髓瘤细胞中成功表达人 鼠嵌合抗体 ,开创了GEAb技术的先河[1] 。 1988年以来 ,伴随着用大肠埃希氏菌成功表达具生物活性抗体片…     

动物抗寄生虫药物的研究与应用

综述了动物抗寄生虫药物在国内外的最新研制以及使用现状,并对抗寄生虫药原料药、制剂、复方药物的研发前景作了展望,概括了新型抗寄生虫药物的研究途径,提出了21世纪新药研究的热点集中在作用于细胞内的核靶和多糖靶,同时先导物的设计也将成为热点。     

牛抗菌肽及其基因工程的研究进展

综述了牛抗菌肽在分类、组织分布、生物活性、基因结构等方面的研究进展,对采用基因工程技术表达牛抗菌肽的方法进行了评述,并展望了其转基因技术的应用前景,提出了利用生物信息学构建牛抗菌肽肽库的新思路。     

兽用氟喹诺酮类药物研究与临床应用进展

兽用氟喹诺酮类药物研究与临床应用进展曾振灵，冯淇辉（华南农业大学广州５１０６４２）氟喹诺酮类药物（Ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ）是指一族人工合成的具有６－氟－４－喹诺酮环基本结构的杀菌性抗菌剂，在人医临床上已广泛应用。其代表药物主要有：诺氟沙星（...     

杆状病毒表达系统研究进展及在寄生虫基因工程疫苗中的应用前景

近年来 ,应用昆虫杆状病毒作载体在昆虫细胞或虫体中高效表达的外源基因已有近千种。这一杆状病毒表达系统 (ｂａｃ ｕｌｏｖｉｒｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｓｙｓｔｅｍ ,ＢＥＶＳ)是一种辅助性依赖性 (仅有质粒载体不能表达外源基因 ,还需要野生型杆状病毒辅助 ,形成整合有外源基因的重组型杆状病毒才能完成外源基因的表达 )的真核ＤＮＡ表达载体 ,具有安全、高效、容量大、表达产物生物活性好等特点 ,是很有潜力的载体表达系统之一 ,在寄生虫的基因工程疫苗方面也进行了有益的尝试 ,具有很大的应用前景。1　杆状病毒表达载体…     

磺胺类药物的合理应用

磺胺类药物具有抗菌谱 广、性质稳定、价格便宜、使 用方便等特点,但其种类繁 多,抗菌作用、毒副作用均不完全相同,因此必须了解各种磺胺药物的作用,合理使用磺胺类药物。 (一)磺胺类药物的种类 磺胺类药物按作用范围分为口服易吸收类、口服不易吸收类、外用类;按给药时间分为短效磺胺药(半衰期在4～10小时内)、中效磺胺药(半衰期在17小时内)、长效磺胺(半衰期在24时内)。     

犬细小病毒病基因工程疫苗的研究进展

从犬细小病毒病亚单位疫苗、表位疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗等方面,论述了近年来国内外在犬细小病毒病新型疫苗研究方面的新进展,并对各种新型疫苗的优缺点及应用前景进行了讨论,为犬细小病毒病新型疫苗的研制提供理论基础。提出各种犬细小病毒病基因工程疫苗互有优劣,可以通过技术手段采用不同种类的新型疫苗的交叉组合、免疫原的集成使用等研制出更理想、更有效的疫苗。     

用基因工程菌苗预防仔猪黄白痢试验

据1987年调查,我州因黄白痢而死亡的仔猪有9922头,占仔猪存栏数878453头的11.3％。损失较大。为了寻找有效预防本病的方法,促进养猪业的健康发展,特进行了以下试验。     

仔猪腹泻基因工程双价苗免疫试验

仔猪腹泻基因工程双价苗免疫试验仔猪黄白痢危害新生仔猪，给养猪业造成较大经济损失，我区长期使用多种抑菌药治疗收效不大，因此引进仔猪腹泻Ｋ８８－ＬＴＢ基因工程双价菌苗简称双价苗），在农建第六师某种猪场进行预防试验。材料与方法双价苗由军事医学科学院生物工程...     

近年来衣原体研究的进展

随着分子生物学技术的迅速发展,研究者们开始从亚细胞及分子水平来研究衣原体,从而大大提高了人们对衣原体的认识。本文就近年来在衣原体研究中的进展情况作一简要介绍。 (一)单克隆抗体在衣原体抗原结构研究和诊断中的应用 1982年Stephens等建立了能分泌沙眼衣原体单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,并结合微量免疫荧光试验证实衣原体存在着属、种、亚种和型特异性抗原。在这些抗原特性的研究中发现:属特异性抗原的化学成份为脂多糖(LPS),对热稳定,用蛋白酶K处理不能破坏其与特异性抗体的反应,而用过碘酸钠处理则能阻止这种反应。种和亚种特异性抗原成     

蠕虫免疫研究的进展

从Sarles 1938年发现Sarles现象(系一种沉淀反应)以来,蠕虫免疫的研究已有相当长的历史。由于多细胞寄生虫即蠕虫产生抗体的复杂性和组织培养等的困难,与其他领域相比,蠕虫免疫研究的进展是缓慢的。1960年Jarrett等首创的牛胎生网尾线虫疫苗,发展了对线虫类感染的免疫学防御,并一度商品化(Dictol),但以后的研究和现地应用进展不大。到目前为止,在蠕虫免疫研究方面取得的重大突破很少,而且尚未生产出像预防传染病那样,可供在较大范围内预防蠕虫病感染的切实有效的疫苗。