脉冲电场凝胶电泳及其在原虫研究中的应用

希望将染色体DNA逐条 分离开来,一直是研究染色体 生物学的科学家梦寐以求的。 因为要研究染色体的结构、功能、行为、重排、基因定位与疾病的关系都需要这样做。另外,有些细胞染色体DNA在细胞周期中不浓集,因此无法在显微镜下观察染色体(Vicke-rman等1970)。 用普通凝胶电泳分离DNA,其分辨力只能达50kd左右。降低凝胶浓度或延长电泳时间,可以提高分辨力至750kd(Darid等1984;Georges等1984)。至于更高分子量的DNA,其泳动速度就不再依赖于分子大小。然而,几乎所有细胞的染色体DNA都大于此高限。如酵母染色体最小的一条有300kd,最大的可达1700kd(David等1984)。     

转基因畜禽的研究进展

基因转移学,是自七十年代末,从分子生物学领域发展起来的一门新兴分支学科。它介绍了将特定的外源DNA插入动物的染色体中,从而产生人类所需要的转基因动物的基本理论和技术;它是胚胎学与基因工程结合的产物,通过显微注射等手段,把克隆的基因片段导入动物的受精卵原核,使之与受体基因组整合,进而培育出携带外源遗传信息的“转基因动物。”目前,已成功地复制了转基因小鼠、兔、猪、羊、牛、鸡、鱼等。转基因动物的研究,在理论上及实践中,均具重要的意义,因为它不仅能够对发育基因调控的机理、癌基因活性和免疫系统内复杂的细胞间相互作用的研究等提供新的方法,而且还有可能开辟家养动物定向育种的新途径,并建立了微生物     

预防动物传染病的新型疫苗

随着生物学的深入研究,出现了许多新型学科(分子遗传学,分子免疫学,分子微生物学,分子生物化学)和新技术(DNA重组,生物活性大分子的人工合成,淋巴细胞杂交瘤)。以微生物为实验对象,从分子水平进行了探索性和实用性研究,这为研制新型疫苗提供了理论和技术。 (一)基因工程苗 重组DNA技术的出现是生物科学中的一场革命,它为人类进一步认识遗传物质的组成及表达的调控、工业化生产各种生物制品展示了光辉灿烂的前景。从细菌或病毒的DNA有意义链上用限制性核酸内切酶切下带有粘性末端的目的基因,用连接酶把具有遗传标志的质粒和目的基因连为一体,     

衣原体DNA的纯化方法及检测技术

衣原体在其独特的生长发育过程中,形成两种形态,一种形态叫做原生小体(EB),另一种形态叫做始体(IB)。衣原体的原生小体对上皮细胞,特别是柱状上皮细胞有一种嗜性,它可粘附于上皮细胞,而粘附作用过程与其表面结构成份(尤其是外膜抗原成份)有密切关系。在衣原体染色体DNA或者质粒DNA中,含有外膜抗原合成的编码基因。本文就衣原体DNA的纯化方法及检测技术做一介绍。     

禽多杀性巴氏杆菌C_(48—1)染色体基因文库的构建

本文以Cosmid作载体,用细胞株SMRIO制备包装细胞,运用体外重组和体外包装技术,构建了禽多杀性巴氏杆菌C_(48-1)染色体基因文库。每微克染色体DNA可获得1000～2000个转导子。为进一步研究禽多杀性巴氏杆菌的基因特性和筛选某些基因或者克隆与表达抗原有关的基因打下了基础。     

三种单股环状DNA基因组动物病毒简介

病毒通常分为动物病毒、植物病毒、细菌病毒即噬菌体三大群;按核酸类型分为双股RNA病毒、单股RNA病毒、双股DNA病毒、单股DNA病毒。如动物病毒群中的细小病毒科(Parvoviridae)是已知最小的动物病毒,基因组为单股线性DNA;植物病毒群中的双粒病毒组(Geminivirus),基因组为单股环状DNA;细菌病毒群中的微病毒科(Micro-viridae)和丝杆病毒科(Inoviridae),基因组为单股环状DNA,但在动物病毒群中还没有单股环状DNA病毒。近年来随着病毒学的发展,新的病毒逐渐被人们发现和认识,在鸡上分离到鸡贫血因     

超低温保存对姜曲海公猪精子超微结构损伤的研究

猪精子对低温尤为敏感,极易遭受低温损伤。本文旨在探讨冷冻前后猪精子超微结构变化,为改善猪精子冷冻保存方法奠定基础。通过手握法采集姜曲海公猪精液,使用0.25 m L细管对精液进行超低温冷冻保存,用扫描电镜和透射电镜对冷冻前后精子超微结构进行观察。结果显示,冻后姜曲海猪精子活力、质膜完整率、线粒体活性和顶体完整率(分别为38.6%、40.5%、42.7%和43.6%)均显著(P0.05)低于新鲜精子(分别为81.9%、85.7%、89.5%和90.2%)。姜曲海猪精子全长约54.4 m,由头、颈、体和尾4部分组成;冻后正常的精子,表现为质膜、顶体和线粒体结构完整,顶体光滑,线粒体排列整齐,核染色质均匀;冻后异常精子主要表现为颈部断裂或膨胀,顶体表面粗糙或缺失,质膜膨胀或缺失,或线粒体移位。上述研究结果表明,超低温保存对姜曲海猪精子超微结构造成的损伤主要集中于质膜、顶体和线粒体。     

基因探针在诊断微生物学的应用

对许多微生物来说,常用的普通培养分离法颇费时日,不能快速地做出临床诊断。而应用标记的基因探针,通过DNA杂交,以定位微生物染色体DNA特殊区段的基因,就可以确定受感染组织中是否存在该微生物的特殊基因组,不仅可以快速地检测出活的病原体,而且可发现有缺陷的病毒粒子和易于发生抗原变异的血液寄生物(Lee等,1985)。由于基因探针的同源性特点,不像多克隆抗体或单克隆抗     

细胞遗传学与胎儿畸形

在兽医产科临床实践中,最大的经济损失莫过于流产、胎儿畸形和不育。近年来由于细胞遗传学的发展,产前诊断技术的提高,使我们扩大了知识视野,加深了对先天性畸形病因较为本质的了解。 (一)遗传与胚胎发育 雌雄配子形成,并结合成受精卵,最后发育成新的个体。受精卵的生长发育过程,主要是由其内在遗传组成所决定的。因为子代继承了亲代配子中染色体传递的双亲遗传信息。而基因正是这种遗传信息单位,被编码于染色体的DNA之中。 每种家畜细胞核中染色体的数目都是恒定的,例如马2n=64,驴2n=62,牛2n=60,沼泽型水牛2n=48,河流型水牛2n=50,绵羊2n=54,山羊2n=60等。每一对同源染色体     

牛白血病病毒在人工感染羊体内分布的研究

成牛白血病(adult form of bovine lymlpho Sarcoma),是由牛白血病病毒( Bo-vine leukemia virus,简称BLV)感染而引起的,一种肿瘤性疾病。主要症状,是体表淋巴结肿大,消瘦、下痢或便秘,躺卧不起,泌乳量减少,眼球突出,心脏机能障碍,排尿困难,胸前浮肿等。在BLV感染牛体内,BLV颗粒进入到淋巴细胞染色体DNA,此时处于     

高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

为探究高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪精液冷冻效果的影响。选取Tris—柠檬酸—葡萄糖基础稀释液,以未处理的鸡蛋卵黄(20%EY)为对照组,添加经HPH处理后的鸡蛋卵黄(20%EY)为试验组,制成Ⅰ液和Ⅱ液,冷冻-解冻后分别对猪精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性、抗氧化指标及DNA完整率和凋亡指标进行检测。结果显示,经HPH处理能有效提高猪精子冻后质量。精液解冻后精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率分别为84.32%、86.71%、68.92%、59.09%,较对照组分别提高了13.7%、16.58%、6.5%、4.88%(P0.05)。与对照组相比,试验组的MDA和ROS较对照组均有所上升(P0.05),SOD较对照组有所下降(P0.05)。但冻后精子NO和NOS含量显著降低(P0.05)。试验组的精子解冻后DNA片段完整性较对照组明显提高(P0.05),凋亡率下降(P0.05)。结果表明,HPH处理鸡蛋卵黄能有效提高猪精液冷冻后质量。     

黑白花奶牛二倍体／四倍体嵌合体一例

黑白花奶牛二倍体／四倍体嵌合体一例彭孟德，郑明高（湖南农业大学动物科技学院长沙４１０１２８）在哺乳动物中二倍体／四倍体嵌合体较少见。这次我们进行家畜染色体检查时，发现一例中国黑白花奶牛染色体为６０，ＸＸ／１２０，ＸＸＸＸ嵌合体，现报道如下。１材料和方...     

种公牛副性腺炎的诊治

种公牛副性腺炎的诊治费咏梅１）孙卫东王小龙张海彬张克春（南京农业大学动物医学院２１００９５）某实验牧场１头１５月龄的小公牛于１９９５年１１月首次人工采精时，发现精液中含有白色的絮状物，镜检见有脓细胞、少量死精子、畸形精子，且精子的活力降低。经血常规、...     

脑头蚴的染色体测定

脑头蚴的染色体测定玛丽亚木·玛和木提，王光雷，谭蓉芳，郭中敏，努素甫，谭立新，郭固（新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐８３００００）我们对脑多头蚴原代培养细胞染色体组型进行了测定。结果：典型染色体组的染色体数为２Ｎ＝１４。１材料与方法１．１动物及处理方...     

病毒基因组中的增强子及基因表达

真核生物病毒的基因结构具有类似其宿主染色体DNA的生物学特性。病毒基因的复制、转录、表达以及其调控在某种程度上和真核生物相似。随着原核生物基因表达调控的机理逐渐被弄清楚,人们的兴趣已转到了真核生物方面来。基因表达和调控是当代分子生物学研究的一个中心课题,而基因转录的起始事件在生物传息的流向、基因表达过程中占有举足轻重的位置。DNA重组、分子克隆、核酸探针、体外及体内DNA定点突变、核苷酸序列分析等技术的广泛应用,真核生物及其病毒基因转录的研究取得了很大进展。研究发现:许多真核生物基因转录起始时,和两个重要的核苷酸序列区域有关。一个为起始位点上游约30个核苷酸处的富含“AT”碱基对序列(称为“TATA”或“Goldberg-Hogners”盒);另一个为起始点上游近70～80处的CAAT顺     

生物技术与兽医学

1869年德国图宾根大学的Miescher从鱼细胞核中分离出了一种称为核子的新物质,后来称这种新物质为核酸。1865年孟德尔(Mendel)初步发现了遗传学的规律。1944年Avery,Maclead和Mccarty发表了关于DNA是遗传信息携带者的最早的确切证据。从经热杀死的Ⅲ型肺炎球菌分离的一段DNA片段可把无荚膜的粗糙Ⅱ型肺炎球菌转化成为完全带有荚膜的Ⅲ型肺炎球菌,且这一变化具有永久的遗传性。1953年,Watson和Crick揭示了DNA的双螺旋结构,这一成就掀起了生物研究的革命,宣告了分子生物学时代的开始。     

牛分枝杆菌Ag85A基因的克隆及序列分析

以牛分枝杆菌Vallee111染色体DNA为模板 ,以Ag85A成熟蛋白基因特异性引物进行PCR扩增 ,获得了 90 0bp的DNA片段。通过T A克隆技术 ,将PCR产物克隆至pGEM T载体。经鉴定 ,成功地构建出了克隆载体pGEM T 85A。     

不同动物源性大肠杆菌多重耐药调控基因rob的同源性分析

为研究大肠杆菌多重耐药调控基因rob与不同动物源性及多重耐药水平之间的关系,选取临床分离的不同动物源性大肠杆菌5株及大肠杆菌药敏质控株ATCC25922,在对其进行主要治疗药物耐药性检测的基础上,分别以其染色体DNA为模板,通过PCR反应扩增出大肠杆菌多重耐药调控基因rob,将该基因分别与克隆载体pMD18-T连接,连接产物转化至大肠杆菌JM109感受态细胞中,对经酶切与PCR反应鉴定为阳性的克隆质粒进行了核苷酸序列测定。测序结果表明:不同动物源性大肠杆菌的rob基因与Gen-Bank中该基因的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列的同源性较高。不同源性大肠杆菌的rob基因的核苷酸序列与其动物源性有关,该基因的核苷酸序列的个别突变位点可能影响AcrAB外输泵的表达水平,进而影响其多重耐药水平。     

小肠结肠炎耶氏菌噬菌体的分离和鉴定

小肠结肠炎耶氏菌(Y.enterocolitica,Y.e)是一种分布很广的人畜共患性疾病病原菌,猪的带菌或发病与该菌在人群流行有密切关系。关于从猪标本中分离出Y.e已屡有报道,我们也曾从屠宰场污水中检出Y.e。鉴于噬菌体与相应细菌在生态学分布上的关联性,我们对猪场污水进行了Y.e噬菌体的分离和鉴定。     

饮水染镉对雄性大鼠精子发生的影响

通过对性成熟及性未成熟雄性大鼠进行慢性饮水染镉,探究了镉对大鼠精子发生的影响,为镉对雄性大鼠生殖毒性作用及其机理的研究奠定理论基础。将30只雄性SD大鼠(性成熟)随机等分成5组,分别饮用镉的质量浓度为0、25、50、100和200mg/L的饮水,试验期为56d;将15只雄性SD大鼠(性未成熟)随机等分成3组,分别饮用镉的质量浓度为0、50和200mg/L的饮水,试验期为105d。试验期结束后观察大鼠的附睾尾重、附睾尾中精子活力、精子活率、精子密度、精子形态等指标的变化情况。结果显示,对于性成熟大鼠,100mg/L镉剂量组与对照组相比,上述指标显著下降(P0.05),200mg/L镉剂量组与100mg/L镉剂量组相比,上述指标极显著下降(P0.01);100mg/L镉剂量组的精子畸形率与对照组相比,呈极显著增加(P0.01)。对于性未成熟大鼠,50mg/L镉剂量组与对照组相比,上述指标显著下降(P0.05),200mg/L镉剂量组与50mg/L镉剂量组相比,上述指标极显著下降(P0.01);50mg/L镉剂量组的精子畸形率与对照组相比,极显著升高(P0.01)。结果表明,慢性饮水染镉对动物精子的发生具有毒性作用,可明显影响雄性动物的生育功能,且存在剂量效应和时间效应关系。