猴结核病皮内变态反应的研究

材料和方法(一)试验用猴 来自广东省昆虫研究所动物饲养场,广州、太原动物园假定健康和健康猴群;品种是恒河猴、黑叶猴和节尾狐猴,绝大部分是恒河猴。 (二)试验用结核菌素 1.人用OT(牛结核菌素):上海市生物药品厂生产的原液,经广东省生物制品研究所稀释为1:2000(每毫升含50个国际单位)、1:100(每毫升含1000个国际单位)、1:5(每毫升含15000个国际单位)三种浓度。     

恒河猴和食蟹猴红细胞免疫黏附功能的比较

通过对 1 0 9只恒河猴和 87只食蟹猴的红细胞C3 bR花环 (RBC C3 bR花环 )和免疫复合物花环(RBC IC花环 )进行检测 ,分析和比较非人灵长类实验动物红细胞免疫黏附功能。结果 ,恒河猴的RBC C3 bR花环率和RBC IC花环率分别为 1 8.3 7%± 4.45 %和 4.3 4%± 2 .2 4% ,食蟹猴的RBC C3 bR花环率和RBC IC花环率分别为 1 7.88%± 4.63 %和 5 .3 7%± 2 .0 1 %。经统计分析 ,恒河猴不同年龄组RBC C3 bR和RBC IC花环率无明显差异 ;食蟹猴RBC C3 bR花环率成年组最高 ,RBC IC花环率老年组最低。多数年龄段 2种猴的RBC C3 bR花环率和RBC IC花环率与性别无关。少数年龄段的食蟹猴RBC C3 bR花环率较恒河猴高 ,而多数年龄段的食蟹猴RBC IC花环率较恒河猴高     

苯噁唑与狄普诺啡合剂对眠乃宁麻醉大鼠催醒剂量的确定

以大鼠为试验动物 ,腹腔内注射二甲苯胺噻嗪与双氢埃托啡合剂 (xylazine DHE)麻醉 3 0min时 ,再以腹腔内注射苯唑与狄普诺啡合剂 (Rx7810 94 M5 0 5 0 ) ,通过序贯法测定Rx7810 94 M5 0 5 0对xylazine DHE麻醉大鼠的催醒半数有效量 (ED50 )值 ,根据ED50 值确定Rx7810 94 M5 0 5 0对大鼠的催醒剂量 ,以此剂量测定大鼠给药后的翻正反射恢复阳性率和痛阈。结果 ,Rx7810 94 M5 0 5 0对xylazine DHE麻醉大鼠的催醒ED50 值为 9.93 5mg/kg ,催醒剂量为 15 .0 0 0mg/kg ,翻正反射恢复阳性率为 94.74% ;Rx7810 94 M5 0 5 0组在 5min与生理盐水组比较差异显著 (P <0 .0 5 ) ,10～ 60min与Rx7810 94、M5 0 5 0和生理盐水组有显著差异 (P <0 .0 5 )。     

猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达

采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株.经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和western-blotting.结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应.证明原核表达系统表达的PRRSV pET-AGp5/M/N蛋白具有良好的反应原性.     

猕猴自发性子宫内膜异位症浅析

在灵长类动物中,国外相继报道过狒狒、食蟹猴和恒河猴等的自发性子宫内膜异位症。且在恒河猴上建立了实验性模型。但在国内有关资料极少。笔者将本实验室积累的6例猕猴自发性子宫内膜异位症病例资料分析如下: (一)病例资料 6例雌性猕猴(Macsca mulatta)来自我国西南地区,年龄7～25岁,平均17.58岁。体重2.5～4kg。从野外捕获,在本饲养场喂养1～10年不等。 例1:M-39号猴,23.5岁。尸检见结肠、直肠猴结节线虫寄生,肠粘膜面充血,散在出血点和溃疡、假膜形成。子宫黄红色,切面见肌层出血,腔内含少量红白色液体。宫颈处肌层见一不规则小结节。镜检见子宫内膜和肌层坏死,大量嗜中性白细胞浸润,腔内积脓。宫颈结节状物为子宫内膜腺体和细胞间质。诊断:痢疾、子宫内膜炎、猴结节线虫寄生、子宫内膜异位症。     

食蟹猴和猕猴朊蛋白基因的克隆与序列分析

以外周血液的基因组DNA为模板,运用PCR方法扩增了食蟹猴和猕猴的朊蛋白基因,并将其克隆到pGEM-T Easy载体中进行测序,运用分子生物学软件对这些序列进行了分析.结果表明,所克隆的食蟹猴和猕猴朊蛋白基因的开放阅读框片段包含了朊蛋白基因的完整编码区,含有762个核苷酸,该基因内无内含子,编码253个氨基酸的前体蛋白,推测其分子质量约27.6 ku.与已报道的其他多种动物朊蛋白基因序列做比较,发现其与多种哺乳动物都有较高的同源性,其中与人的同源性最高.氨基酸点突变分析除发现了已报道的多态性位点N97S、H100N外,在食蟹猴和猕猴均发现了未报道的S242L点突变位点.此外,在食蟹猴还发现了I8M、C151R点突变位点.     

几种乳牛乳房炎简易诊断液的比较试验

目前,检查隐性乳房炎的诊断液种类较多,国际公认美国加里福尼亚乳房炎试验(Californiamastitis test C.M.T)检出率较高,但药源缺乏,进口价格昂贵,很难普遍性推广和应用。笔者近年来,以C.M.T为标准,与5％国产洗衣粉溶液,溴麝香草酚蓝(B.T.B)进行比较,观察其检出率和符合率。试验结果表明其实用价值是高的。 (一)试验材料     

猴舍空气污染情况及过氧乙酸消毒效果

随着生物学和医学科学研究工作的深入发展,作为试验材料的灵长类动物猴的用量日益增多。为了判断养猴场内空气污染程度,便于采取有效的防制措施,我们于1984年4～5月,对猴舍空气进行了细菌学检测,并做了过氧乙酸液消毒效果的测试。 (一)材料与方法 1.材料:有猴房11幢,每幢随机抽测1间,共检测11间,其中每间养猴4～6只的9间,未养猴的两幢2间。每间分内外室,关上中间小门,行内室测试。培养基:细菌总数测定用普通琼脂培养基;消毒剂:取冰醋酸140毫升,加硫酸7.1毫升混匀,再加30％过氧化氢     

黑叶猴幼仔常见病的治疗

黑叶猴(Presbytis francoisi Pousargus)又称乌猿,是我国一类保护动物之一。11年来,我园前后繁殖黑叶猴78胎。笔者治疗黑叶猴幼仔的多种疾病49例,治愈率达95％。现将几种常见病的发病和治疗情况报告于后。 (一)消化不良 共诊疗17例。 1.症状:患猴病初精神尚好,但食欲不振或废绝,不爱活动。不久患猴精神沉郁,离群倦缩一角,低头呆坐或伏卧或表现不安。口腔湿润并流涎,时有酸臭的胃发酵气从口排出。腹部稍有增大,有时呕吐酸臭的胃内容物,并排出稀糊状恶臭粪便,内有消化不全的饲料。听诊肠音增强,有时可听到金属音。     

恒河猴血液生化正常参考值

目前,恒河猴(Macaca mulatta)在生物医学研究中已成为一种重要的实验动物,但是对于恒河猴血液学方面的数值所知较少。本文的目的是对中国境内恒河猴的血液化学及血液中电解质含量进行系统地测定,以便了解我国恒河猴的生理特性。     

不同培养液对牛孤雌生殖胚胎和体细胞核移植胚胎体外发育的影响

采用体外成熟的牛卵母细胞 ,经 5 μmol/LIonomycin 5min和 2mmol/L 6 DMAP 5 μg/mLCCB 4h激活 ,分别在TALP M 199(TM ,1∶2 )、BMOC M 199(BM ,1∶2 )和CR1aa培养液内培养 ,2 4h和 3 6h各组卵母细胞的卵裂率分别为5 6.4%、5 5 .6%、5 3 .6%和 72 .0 %、75 .9%、79.0 % ,无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;培养 8d后囊胚发育率分别为 18.2 %、2 1.4%和 2 9.3 % ,CR1aa内培养孤雌生殖胚的囊胚发育率显著高于TM (P <0 .0 1)。皮肤成纤维细胞构建的重组胚经同法激活后 ,分别在TM、BM和CR1aa内培养 ,2 4h和 3 6hBM和CR1aa内重组胚的卵裂率显著高于TM (4 9.7%、49.8%比 2 0 .5 % ;74.1%、73 .2 %比 5 0 .0 % ) (P <0 .0 1) ;虽然培养 8d后各组胚胎的囊胚发育率无显著差异 ,但CR1aa内重组胚的囊胚发育率稍高 (12 .3 %比 9.8%、11.5 % )。结果表明 ,CR1aa更适合孤雌生殖和体细胞核移植胚胎的体外培养。     

恒河猴胆汁和猪胆汁成分的比较研究

对11只恒河猴胆囊胆汁的生化成分进行了测定,并与猪胆汁进行比较.结果表明,恒河猴胆汁总胆红素(TB)、间接胆红素(CB)和Mg的浓度明显高于猪,粘稠度、总胆汁酸(TCG)、Ca、P和pH值两者无显著性差异,而胆固醇(CHOL)的值较低.     

Highlights of CAFIU''''s International Exchanges (From March to May 2005)

M arch(1) M arch 2, CA FIU Secretary-G eneralM r. X uJianguo m et w ith som e m em ber of the JapaneseA kum a no H osyoku (The D evil's G luttony)C horus.(2)M arch 4-8,at the invitation ofC A FIU ,the 9-m em ber Japanese M edia D elegation headed by M r.Toshikawa Takao,E ditor-in-Chief of the Sidelinevisited China.In Beijing,C A FIU A dvisor M m e.LiShuzheng m et with the delegation.M r.Li C hen-gren, E xecutive V ice-President of CA FIU heldtalk with the delegation. The …     

猪肺炎支原体选择分离培养的研究

从猪流行性肺炎野外病例分离猪肺炎支原体(M. suipneumoniae)历来是非常困难的。其原因是由于肺炎病灶部存在很多猪鼻支原体(M. hyorhinis),而在人工培养基上它通常比肺炎支原体(M.pneumoniae)生长的旺盛。我们为了探讨肺炎支原体(M. pneumoniae)的选择分离培养方法,使用下述培养基和培养方法取得了良好的结果。     

四种猪呼吸道疾病综合征病原多重PCR检测方法的建立及应用

为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)和猪肺炎支原体(M.hyo)的多重PCR方法,分别针对PRRSV的ORF1a基因、PCV2的ORF2基因、APP的OMLA基因和M.hyo的P46基因的保守区域设计4对特异性引物,优化反应体系及条件,建立了可同时扩增PRRSV(225bp)、PCV2(337bp)、APP(107bp)、M.hyo(176bp)相应基因的四重PCR方法。结果显示,该方法能单管同时特异地鉴别检测PRRSV、PCV2、APP、M.hyo 4种病原体,对猪瘟病毒、副猪嗜血杆菌、猪呼吸道冠状病毒、猪流感病毒、猪细环病毒及猪细小病毒等无特异性扩增,说明该PCR具有良好的特异性;方法的灵敏度分别为195、272、241、321pg/μL。应用该方法对重庆市的61份样品进行检测,其中PRRSV、PCV2、APP、M.hyo的阳性率分别为22.9%(14/61)、18.0%(11/61)、8.2%(5/61)和18.0%(11/61)。该方法的建立为临床上4个病原的快速鉴别诊断提供了有力的技术手段。     

结核菌素试验阳性猴的病理检查及病原分离鉴定

1988～1989年,我们将外购的结核菌素(TB)试验阳性的11只猴隔离饲养,再按常规方法进行人型旧结核菌素试验2次,结果其中有10只猴呈阳性反应,1只为阴性反应,后改用牛型TB试验出现阳性。将此11只阳性猴全部处死,进行了系统尸体剖检及病原分离鉴定。(一)重复试验1.试剂:①人型旧结核菌素:系卫生部北京生物制品研究所生产。批号881,规格10万U/ml。②牛型结核菌素,系中国兽药监察所生产。批号85—1,规格10万U/ml。2.重复试验方法:与初次TB试验方法相同,于猴的上眼睑皮内注射人型旧结核菌素原液0.1ml(1万单位),分别于24、48和72小时时观察判断试验结果,2次试验的间隔时间为20天。     

Strengthen Sino-Indian Cooperation and Promote Common Development

At the invitation of Chinese A ssociation for Inter-nationalU nderstanding (C A FIU ),a 7-m em ber del-egation ofIndian D elhiStudy G roup (D SG )headedby M r.A shok G arg,V ice-PresidentofD SG ,visitedBeijing, Shanghaiand N anjing from M ay 18to 24.In Beijing,M r.Luo H aocai,V ice-C hairm an of theChinese People's PoliticalC onsultative C onference(CPPCC)and V ice-President of CA FIU ,M m e.LiShuzheng,A dvisor of CA FIU ,M r.CaiW u,V ice-M inister of the Internationa…     

云南猪、黄牛体内肉孢子虫对猕猴、猫、狗交叉感染实验

现已证实,猪、黄牛是人、猕猴、猫、狗肉孢子虫的中间宿主之一。左仰贤等(1983)、连自强等(1987)首次在国内发现了猪人肉孢子虫(Sar-cocystis Suihominis)和人肉孢子虫(S.ho-minis),并进行了人-猪-猴,人-猪-人,以及人-牛-猴,人-牛-人之间循环感染实验研究。继后,我们用猪和黄牛体内的各自3种肉孢子虫分别对猕猴、猫、狗进行了交叉感染实验。(一)材料和方法1.动物:猕猴购于昆明动物研究所和耿马县。猫、狗购于下关农贸市场。将动物随机编号,实验前粪检3天,孢子囊均为阴性。感染前禁食1天。     

IBV疫苗株基因组3′末端序列分析

以 5株鸡传染性支气管炎病毒 (IBV )疫苗株 (D41、H12 0GD、H12 0SH、H5 2BJZH和H5 2GD株 )和IBV标准强毒M 41E4株的基因组RNA为模板 ,利用RTPCR技术 ,扩增出 1条特异性条带 ,包括部分核衣壳蛋白 (N)基因以及紧接着N基因下游的基因组 3′端非编码区 (UTR)。测序结果表明 ,从D41、H12 0GD和H12 0SH株扩增的特异性片段长度为6 14 2bp ;而从H5 2BJZH、H5 2GD和M 41E4株扩增的特异性片段长度为 40 6 2bp。序列分析发现 ,被检的 6株IBV毒株可分两组 ,其中D41、H12 0GD和H 12 0SH株为一组 ,核苷酸序列同源性为 99.7?.8%;而H5 2BJZH、H5 2GD和M 41E4株构成另一组 ,其核苷酸序列同源性为 99.3 0 %;两组之间的最大同源性仅为 94.6 %。在系统发生进化树上 ,这两组分别位于不同的分支簇上 ,国内的H5 2BJZH、H5 2GD与国外的H5 2株不在同一分支簇上 ,相反却与国内强毒M 41E4株以及国外M 41株在同一分支簇上。提示国内H5 2疫苗株与国外H5 2疫苗株不同 ,它们在亲缘关系上更靠近M 41E4株和M 41株。     

恒河猴干扰素-γ基因的原核表达及其免疫活性的初步研究

为构建以恒河猴干扰素-γ为目的基因的原核表达重组质粒并进行免疫活性分析,获得具有生物学活性重组IFN-γ蛋白。应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从恒河猴外周血单个核细胞(PBM C)扩增干扰素-γ基因,然后将其克隆至表达载体p ET32a(+)中,转化BL21(D E3)进行诱导表达。SDS-PAG E电泳分析其可溶性,W estern-blot检测纯化后的重组蛋白,采用淋巴细胞增殖试验检测重组IFN-γ的活性。结果显示,成功构建恒河猴干扰素-γ原核表达重组菌,重组蛋白分子质量约为35.4 ku,主要以包涵体形式存在。重组IFN-γ具有促进淋巴细胞转化增殖的生物学活性。结果表明,本试验成功获得了重组IFN-γ蛋白,表达量高且具有生物学活性,为重组IFN-γ治疗恒河猴疾病奠定了基础。