大熊猫源枝孢样枝孢霉的生物学特性

将大熊猫源枝孢样枝孢霉在不同培养基以及不同温度、不同pH、不同碳源和不同氮源的培养基中培养,以十字交叉法研究了各因子对其生长的影响。结果表明,该菌的最适培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基和沙氏琼脂培养基,较差的是改良大米琼脂培养基和玉米琼脂培养基,最差的为子囊孢子培养基和察氏琼脂培养基。该菌最适生长温度是25℃,较差的是15℃和20℃,30℃和35℃中几乎不能生长。最适pH为pH5和pH6,pH4和pH8～pH11中生长稍差,最差的是pH7。不同碳源对该菌生长无显著差异。最适合该菌生长的氮源为硝酸钠,其次是草酸,生长较差的是硫酸铵,在尿素中不能生长。结果明确了枝孢样枝孢霉生长的最适宜环境,可为该菌引起的暗色丝孢霉病的诊断及防治提供参考。     

秀丽隐杆线虫的培养与保存研究

比较了在OP50-NGM、JM109-NGM、OP50-LB、JM109-LB四种不同培养基上秀丽隐杆线虫的生长效果;测定了在三种温度和含不同甘油浓度冻存液中的虫体保存效果。结果显示,秀丽隐杆线虫在OP50-NGM培养基中生长良好,在JM109-LB培养基中生长较差。在-80℃最佳温度条件下,秀丽隐杆线虫在含50mL/L甘油的LB培养基中的存活率达78%;在含50mL/L甘油的PBS中的存活率达52%;而在含100mL/L甘油的水溶液中的存活率仅为8%。用液氮保存,成虫和幼虫均可存活;而在-80℃和-20℃条件下,仅有幼虫存活。结果表明,秀丽隐杆线虫在OP50-NGM培养基中培养发育生长较好;在-80℃条件下,含50mL/L甘油的LB培养基适于保存秀丽隐杆线虫。     

杂色曲霉素含量的测定

杂色曲霉素(ST)粗毒素的制备①菌种:杂色曲霉和构巢曲霉菌株由南京农业大学提供。②培养方法:将杂色曲霉和构巢曲霉菌株分别接种在察氏培养基上,28℃培养7天,然后接种到Rabie等报道的玉米培养基上,29℃恒温振摇培养30天。终止培养,50℃干燥48小时。③粗毒素提取:玉米培养     

解淀粉芽胞杆菌固态发酵黄芪培养基的研究

为筛选优化解淀粉芽胞杆菌固态发酵黄芪培养基,用于生产发酵黄芪制品,以黄芪黄酮质量分数为指标,采用单因素试验对菌株适宜发酵培养基成分进行筛选;采用二次正交旋转组合试验设计及响应面法,优化黄芪固态发酵培养基。结果显示,在筛选成分中最适发酵培养基成分为黄芪、黄豆粉和碳酸钙。用其分别替代基础培养基中的相应营养物质,然后接种解淀粉芽胞杆菌,置37℃以150 r/min振荡培养24 h,其固态发酵物中黄芪黄酮质量分数分别为2.84、2.78和2.75 mg/g。优化的固态发酵培养基为:黄芪粉300 g/L、黄豆粉100 g/L、碳酸钙2 g/L、水598 m L/L,37℃发酵培养24 h,固态发酵物中的黄芪黄酮质量分数达3.21mg/g。结果表明,优化的黄芪固态发酵培养基适宜解淀粉芽胞杆菌生长,易于黄芪黄酮释放,筛选培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件。     

接种温度对破伤风梭菌产毒的影响

将破伤风梭菌罗马TL 64 0 0 8株经 2次扩菌后 ,接种于预先设置的 15、2 0、2 5、3 0和 3 5℃双胨培养基上 ,然后均置于 3 5℃培养 13 2h。结果 ,在 3批破伤风类毒素生产的试验中 ,其平均毒力 (絮凝单位 ,Lf)依次为 89.3、84.3、85 .0、91.7和 10 1.7Lf/mL ,表明接种时温度以 3 5℃产毒结果最佳 ,并以接种时温度下降而依次递减     

绿头野鸭鸭疫里氏杆菌的分离与鉴定

鸭疫里氏杆菌病是目前危害鸭最严重的疾病之一 ,在世界养鸭的国家和地区几乎都有本病存在 ,但还未见该菌感染绿头野鸭的报道。 1999年冬季笔者在西昌市某绿头野鸭场 ,对发病鸭进行病原分离和鉴定 ,确诊是由鸭疫里氏杆菌感染所致。1　方法1.1　现场调查　对西昌市某发病的绿头野鸭场的饲养条件、卫生管理、发病情况和临床症状进行调查 ,对典型的病鸭进行剖检 ,观察病理变化。1.2　实验室检验1.2 .1　病原分离　无菌采取临床症状典型的病鸭、死鸭的心血、脑、肝 ,分别接种于普通琼脂培养基、麦康凯培养基、鲜血琼脂培养基 ,3 7℃厌氧培养 48ｈ…     

应用酶联免疫吸附试验检查牛羊布氏杆菌病

为了将酶联免疫吸附试验(ELISA)更有效地应用于牛、羊布氏杆菌病的诊断,我们对该方法所用的抗原、酶标抗体、检测程养基,37℃培养72小时。将耶氏09接种于普通琼脂培养基,于25℃培养36小时。用灭菌生理盐水将三种培养物洗下,于60℃水浴中1小时杀死。用胰酶消化法提取可溶性成分,定量分装,     

乳酸杆菌活的非可培养状态诱导条件的筛选与荧光观察

依据逆向调整原则,设计了4套诱导乳酸杆菌进入活的非可培养(VBNC)状态的方案,同时应用LIVE/DEAD细胞染色试剂,对进入该状态的细菌进行了荧光观察,并尝试用Tween-80对VBNC状态细菌进行了复苏.结果显示,MRS液体培养基,pH 2.0～3.0,4℃,兼性厌氧培养和不含半胱氨酸的MRS液体培养基,PH 2.0～3.0,4℃,兼性厌氧培养均可使3株试验菌体在短期内进入VBNC状态,并且能较长时间维持这一状态;3株细菌菌体均发生萎缩、弯曲,且彼此相连,原本单在的杆菌变成了链杆菌;随着诱导时间的延长,菌体的交联程度明显增加,出现众多红绿交替的长链杆菌;Tween-80可使VBNC状态细菌恢复为可培养状态并实现复苏,而复苏后的细菌重新具备原菌的形态和生化特征.表明,乳酸杆菌具有VBNC状态,并且在此状态下呈现与正常菌体不同的形态特征.     

牛附红细胞体体外培养试验

用RPMI 164 0、M 199、D MEM 3种培养液作为基础培养基 ,再分别按体积分数加入 40 %的犊牛血清 ,采用普通恒温培养箱 (3 7℃ )进行牛附红细胞体体外培养。结果表明 ,牛附红细胞体在RPMI 164 0培养基中 ,每 12h更换 1次培养液 ,并补充适量正常红细胞 ,获得了高达 99%的感染率 ;连续传代培养可达 44代以上。     

熊人工引流胆汁的细菌分离

熊胆是一种珍贵的中药,用于治疗惊风、抽搐、目赤肿痛及肝胆疾病有显著疗效。近年来,一些地区开展人工养熊及活熊人工引流胆汁,试图解决熊胆的药源。为检测人工引流熊胆汁的质量,我们对引流胆汁进行了细菌分离和微生物学检验。(一)材料与方法1.胆汁采集:通过引流管无菌采取胆汁于消毒瓶内,立即送到实验室进行分离细菌。2.培养基:乳糖增菌液体培养基、普通琼脂平板、S.S琼脂平板、N.A.C鉴别培养基及各种生化反应培养基。3.实验动物:新西兰纯种大耳白兔、成年豚鼠和小白鼠。     

捕食线虫性真菌生长特性的研究

对捕食线虫性真菌菌丝、分生孢子、厚垣孢子、捕食性结构的发育过程和特点及其在 0 .4g/L玉米粉琼脂固体培养基和液体培养基中的生长情况进行了研究。结果表明 ,捕食线虫性真菌菌丝在 0 .4 g/L玉米粉琼脂固体培养基上呈树枝形放射状生长 ,有的菌株还可以在 0 .4g/L 玉米粉液体培养基中呈絮状生长 ;分生孢子位于垂直的分生孢子梗顶端或近顶端部 ,多数出现在菌丝的生长后期 ;厚垣孢子在菌丝上呈插入性生长 ,在老的培养基中容易发现 ,且与捕食线虫性真菌的种类有关 ;捕食性结构在受到活线虫幼虫的刺激之后才会产生 ,而线虫虫卵与成虫并不能导致捕食性结构的产生。     

耶氏菌的增菌与保菌方法研究

将耶氏菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ）接种于改良ＰＢＳ、普通蛋白胨水和生理盐水中，置４℃冰箱内定期观察。结果耶氏菌在这三种培养基中既能增菌又能长期保菌，无论纯菌还是现场猪粪标本中的耶氏菌均能在改良ＰＢＳ中存活５年以上，且菌株不发生变异。证明ＰＢＳ是一种增菌与保菌的理想培养基。     

猪肺炎支原体选择分离培养的研究

从猪流行性肺炎野外病例分离猪肺炎支原体(M. suipneumoniae)历来是非常困难的。其原因是由于肺炎病灶部存在很多猪鼻支原体(M. hyorhinis),而在人工培养基上它通常比肺炎支原体(M.pneumoniae)生长的旺盛。我们为了探讨肺炎支原体(M. pneumoniae)的选择分离培养方法,使用下述培养基和培养方法取得了良好的结果。     

新生仔猪大肠埃希氏菌性腹泻K88ac-ST1-LTB三价基因工程灭活疫苗生产工艺的研究

以实验室工艺为基础,用发酵罐培养,对培养基、诱导剂及诱导条件、通气量、菌液灭活条件等进行了筛选优化。结果表明,重组菌株BL21(DE3)(pXK88acST3LT5)培养的最适培养基为改良LB培养基;乳糖为适合于工业化生产的诱导剂,其最适浓度为100 mmol/L,诱导时间不低于6 h;2×105mL发酵罐培养的最佳通气量为500 L/min;培养菌液的灭活条件为按菌液总量加入4 mL/L甲醛溶液,37℃灭活48 h。按上述工业化生产条件生产疫苗5批,检验结果均安全有效。     

布氏菌苗生产新工艺

英国卫桥中央兽医研究所已于1965年放弃用固体培养生产19号苗的方法,而全部采用深层连续通气培养方法进行生产。其工艺过程包括五个步骤:1、种子培养。选取菌落后,作两次液体扩大繁殖;2、生产培养。培养基的开始量为5立升,接种约30％的种子,在37℃温度     

奶牛粪便中空肠弯杆菌的检测

空肠弯杆菌属于胚胎弯杆菌空肠亚种。关于从猪、鸡(腹泻患者)等粪便中分离出该菌的报道较多,但目前尚未见到从奶牛粪便中分离出该菌的报告。为了解空肠弯杆菌在奶牛体内的带菌情况,作者采集133头奶牛粪便,进行了细菌学调查。 (一)材料与方法 1.样品来源:在长春市及农安县的两个牧场,用无菌棉拭子从奶牛肛门直接采样133份。 2.培养基:①分离培养基:上海市卫生防疫站生产的空肠弯杆菌选择性琼脂为基础,每100ml加5～10％脱纤维羊血,50％卵黄盐水10ml;每100ml上述培养基中加入多粘菌素B250μg、万古霉素1.5mg、磺胺增效剂0.5rug,摇匀后倾注平板。②所用其他培养基均为自     

干粉培养基的研制

干粉培养基在英、美、日诸发达国家已商品化。我国在五十年代,上海生物制品所就有生产。目前国内生产干粉培养基采用较高温度烘干后再球磨的方法,不仅质量不稳定,产量也有限。我们采用较大型喷粉干燥塔喷雾干燥方法克服了上述弱点。本厂1985年对于粉培养基生产进行初步探索,1987年研制成三大系例干粉培养基:①基础营养干粉培养基:营养肉汤、营养琼脂、厌气肉肝汤,用于病原微生物的检测;②药品、食品卫生检验用培养基:硫乙醇酸盐(广谱)、葡萄糖蛋白胨,用于真菌的检验;③病原微生物鉴别诊断培养基:SS干粉培养基。     

乳孕生菌种的保存期及使用剂型

乳孕生(Lactobiogen)是一种活菌制剂,其菌种是由健康母牛阴道分离的一株产酸能力强的正常菌,属乳杆菌属。现将该菌的驯化和制作过程报告如下。 (一)乳孕生菌种的驯化 刚从阴道中分离出的菌种需在微需氧条件下才能生长。本试验是在直径18厘米的干燥器内点燃蜡烛,造成微氧环境,进行培养。所用培养基为MRS培养基,培养温度37℃。经分离培养的菌种在固体斜面中只存活5～7天。因此,为了用于治疗试验,需进行驯化。驯化方法:每5天传代一次,微需氧培养和一般有氧培养交替进行。交     

一种新的鼻疽菌选择性培养基

要从污染材料中分离鼻疽菌,需要使用选择性培养基。选择性培养基系由基础培养基和抑制杂菌药物两部分组成,前者必须能充分支持鼻疽菌的生长,后者则需能抑制病料中的杂菌,但不妨碍鼻疽菌的生长繁殖,这两个因素都必须具备,才有可能从传染材料中分离出鼻疽菌。一两年来,我们在分离鼻疽菌所用的基础培养基和抑制杂菌药物方面做了一些工作,找到了一种比较好的选择性培养基,现报告如下。     

猪胴体分离出海因德马什沙门氏菌

1986年7月,我们在某肉品加工公司抽检来自青岛的商品猪胴体282头份,检出沙门氏菌16株,其中有1株海因德马什沙门氏菌(S. Hindmarsh),在国内未有报道。 培养特性 有动力。在胆硫乳琼脂(DHL)平板上菌落呈圆形、中等大小、湿润光滑、边缘整齐,半透明。在普通培养基上生长良好。在氰化钾培养基上不生长。