鱼塘水中五氯酚钠的提取及检验探讨

鱼中毒后从鱼塘水中检测毒剂成分比较困难,据调查佛山地区的鱼中毒案件,绝大部分都是五氯酚钠(对鱼毒性极大)所致.为此,笔者专门对此进行了探讨,并连续检测出几宗鱼中毒案件,介绍如下.1 材料和方法1.1 五氯酚乙醇标准液的配制:取五氯酚钠原粉适量加水50ml,搅拌至完全溶解(若有沉淀即过滤,去除滤渣),滴加盐酸直到不再析出自色沉淀,过滤,去除滤液,滤渣反复用蒸馏水洗涤至中性,真空干燥.取干燥粉末0.1g加至10ml容量瓶中,加无水乙醇到刻度.1.2检材提取:提取鱼塘水中的检材,应在死鱼最多的部位提取,或者水不流动的部位提取,并检查鱼塘中及其周围是否有可疑包装物.取检材500ml,放人1000ml梨形分液漏斗中,加盐酸调至酸性(pH=1),剧烈振荡后,加乙醚100ml,充分振摇萃取,静置分层后,将水层转入另一个盛有100ml乙醚的梨形分液漏斗     

精斑定性检验52例回顾分析

在性犯8罪物证检验中,确认精斑存在与否是非常关键的.检验精斑的方法很多,如P30检验、抗人精血消沉淀环及琼脂糖扩散试验等,其特点各异.最近笔者以Dot-ELISA进行P30检验、抗人精血清沉淀环试验及沉渣涂片镜检精子3种不同的方法对52例性犯罪案件进行了检验并做了统计分析,报告如下1 检验方法(1)P30检验,以DO-ELIA直接法进行(HRP-P30购于公安部第二研究所)(2)沉淀环试验,所用抗人精血清效价为1:2000,分别购于公安部第二研究所及淮北市公安局(3)精子检验,沉渣涂片,用美蓝染色后直接镜检,一般可用化人精血清沉淀环试验后的沉渣涂片,不必干燥     

应用荧光显微镜检验精子

<正> 在精斑检验中,精子的形态学检查是很重要的,其染色方法也颇多,但往往精子的头帽部及尾部着色较淡,对某些形态近似精子的着色杂质鉴别费时费力,尤其对断离的精子头或尾不易做出准确结论。我们根据精子的化学结构采用荧光染料染色检查精子,经过反复试验效果良好,特别对头尾分离的精子也能做出较准确的辨别,从而提高了检     

精斑预试验试剂纸快速检测法

笔者根据基层技术工作的特点,利用自制试剂纸作精斑预试验,现将试剂纸的制作过程和试验操作及结果报告如下。1　试剂纸和显色纸的制作按酸性磷酸酶试验配制缓冲液和显色液;将干净的定性滤纸数张浸泡于缓冲液中,充分浸透,将其取出,自然晾干,即实验所用试剂纸;用同样的方法将数张滤纸浸泡于显色液中,浸透、晾干、制成显色纸。2　实验操作及结果将0.3cm0.3cm精斑检材置于干净器皿上(载玻片、白瓷板、试管、现场干净的玻璃、搪瓷、陶瓷等器皿),加入1滴水(约0.05ml),使检材完全浸湿,挤压后将检材取出,用试剂纸沾取检材浸出液,置于显色纸上,若为精…     

一种简便、有效识别精子的染色法

本文介绍了一种染色过程简便,着色反差明显,易观察,对极微量精斑的定性具有明显优越性的染色方法。且染色液可以长期存放。     

胶乳凝集试验及其在精斑检验中的应用

<正> 精斑检验在鉴定法医学性犯罪案件中有很重要的作用,精斑确证试验的方法主要有:形态学方法、化学方法、生物化学方法及免疫学方法。这些方法各有其优点和一定的局限性,目前仍较多地采用精子检出法和抗人精液血清琼脂双扩,而输精管结扎术者及精子缺乏症者其精斑中无精子,抗人精液血清特异性不够好便难以检出。近几年来用特异性抗-P30血清作     

创周围六种金属痕迹的显现

<正> 利用金属印痕彩色显现方法,显现金属凶器遗留在衣服创口周围的金属成份及分布,从而确定凶器特征,现介绍如下。一器材与试剂器材紫外线灯、玻璃或塑料皿、印(放)相纸、竹夹子、上光机、量杯等。试剂 (1)溶解剂:12%氨水,10～25%醋酸,酒石酸缓冲液;(2)显色剂:红氨酸甲醇饱和液,0.2%玫红酸钠(钾)水溶液,0.05%铁氰化钾盐酸溶液;桑色素甲醇饱和液,5%     

染色混合精斑涂片DNA检验方法的研究

建立了染色混合精斑涂片DNA的提取方法,通过两步扩增的技术与垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染色法,成功检测了3个STR位点.结果显示,所有染色涂片DNA分型均与对照血样一致,苏木素-伊红(HE)染色比酸性复红-美蓝(Baecchi)染色对DNA的降解作用要小;涂片灵敏度检验可达到少于10个精子,且室温保存一年以内的涂片其灵敏度光显著差异.该方法简单、快速、可靠,为染色混合精斑涂片的PCR分析提供了新方法.     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

抗P30胶体金免疫试纸条(又称精斑试纸条)是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原(PSA,又称P30)进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果,却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况,为验证及比较灵敏度及特异性,本文进行了一些探讨,现报道如下。1材料和方法1.1材料精斑试纸条:购自美国E-boat Dallas公司。样品:10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者,阴道分泌液斑…     

食用油中毒物的提取方法

在实际检案中经常遇到利用食用植物油投毒作案,如何提取出毒物成为检验成功与否的关键。笔者经过多次实验,发现用乙腈-有机溶剂分配提取法效果较好,介绍如下:1材料60%乙腈水溶液;2%硫酸钠溶液;分液漏斗(500ml)一个。2操作方法取检材约20ml于分液漏斗中,加入60%乙腈水溶液,充分振摇约10min,分出乙腈提取液,加6倍提取液体积的2%硫酸钠溶液稀释,然后用正已烷、石油醚或氯仿、二氯甲烷提取(极性弱的可用正已烷、石油醚,极性强的可用氯仿、二氯甲烷),浓缩后,可直接检验。图1现场油碗中敌敌畏的总离子流图3案例应用2003年1月8日,某村村民陶某(男,3…     

阴道液斑的检验近况

在强奸案的法医物证检验中,过去多只注重检验遗留在被害人的衣、物、身体和现场上的精斑及型物质证实犯罪,但有时可能检不出精斑,而在嫌疑人的衣服和身体上却可能有阴道液斑,或者遗留的斑迹系精液-阴道液混合斑(以下简称混合精斑),因而阴道液斑的检验有时有其重要意义。现将阴道液斑检验概况作一概述。 1 阴道液的成分 阴道液是阴道粘膜的漏出液、分泌液、脱落上皮细胞及卵管、宫内膜、宫颈粘液、阴道正常菌群代谢产物等组成的混合物,阴道脱落上皮细胞随月经周期呈周期性变化,分泌液的性状及量也     

角蛋白、粘液、弹力纤维和DIC微栓的染色法

为较好地快速检测羊水栓塞和羊水吸入的组织中多种灵敏度高的有形物质，我们选用酸、碱性染料和混合性试＃似I成人和新生儿尸检组织进行实验性对照研究，建立了一种同时显示角蛋白、粘液、弹力纤维和微栓的新染色方法。材料和方法一、材料选用选自产妇和新生儿的尸检组织进行15％中性甲醛固定，常规脱水、透明和浸蜡的石蜡切片4～6urn。二、试剂配制和染色方法1．试剂配制（l）Victorisblue染色液：Victorisblue（维多利亚蓝）Zg，糊精0．sg，间苯二酚4g，蒸馏水200ml、将上述物质混合煮沸smin，再另将煮沸的30％三氯化铁25ml加入上液中，…     

人体皮纹无污染捺印新途径

当前捺印皮纹的主要的、常用的方法即油墨捺印。这种捺印方法,具有严重污染被捺印人皮肤的缺点,且施墨量、捺印力度与方向难以掌握。目前,对于活体皮纹,主要是引进了国外的药膜面卡片捺印技术;对于尸体皮纹,主要是运用载体转印粉末显现的方法。笔者另辟途径,设想通过胶带(或胶卡片)捺印皮纹,再经染色剂将纹线染色增弧反差,来实现比前法更简便易行的无污染捺印。本法所需的材料:·透明胶带(WING TAI TAPE/ADHESIVE CO·LID)·酸性品红(上海试剂三厂)·水(蒸馏水或自来水)操作方法如下:1.称取酸性品红1克置于烧杯中,量取水20毫升倒入烧杯,摇至完全溶解。2.取水至方盘中3/4深度。3.拉剪胶带(快速拉扯,防止产生小气泡和拉胶纹)若干段,然后分别让人体手、     

一种快速批量DNA检测方法

本文在硅珠法提取DNA的基础上,研究建立了一种快速高效批量提取、扩增、检测DNA的方法。现介绍如下。1材料与方法1.1样本所有嫌疑人员的血样均用滤纸采集。1.2主要仪器设备及试剂9700扩增仪(ABI公司)、3100遗传分析仪(ABI公司)。裂解液(12g硫氰酸胍、10ml0.1M Tris-HCL,pH6.4、0.8ml0.5MEDTA,pH8.0、0.5ml TritonX-100),硅珠悬液(6g SiO2加水到100ml),10%十二烷基肌氨酸钠(SLS),Profiler Plus试剂盒(ABI公司),去离子甲酰胺、Rox500内标(ABI公司)。1.3方法DNA提取分别剪取2mm×3mm大小的血痕放入96孔板相应的孔中。用排枪…     

尿中苯丙胺、甲基苯丙胺、MDA和MDMA的固相微萃取和GC/MS/SIM测定

目的研究固相微萃取(SPME)用于尿中苯丙胺(AMP)、甲基苯丙胺(MET)、3,4-亚甲二氧基苯丙胺(MDA)和3,4-亚甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA)的提取。方法样品调节至碱性和用盐饱和后用顶空SPME,内标为MET-d5。萃取纤维为100μm聚二甲基硅氧烷(PDMS)。用气质联用选择离子检测(GC/MS/SIM)。结果0.2μg/ml加标尿样,AMP、MET、MDA和MDMA的富集倍数分别为22,60,13和47。检出限(S/N=3)为0.4～9.5ng/ml。线性范围为0.05～1μg/ml。0.2、0.5和1.0μg/ml加标尿样,相对回收率77.9%～112.4%,变异系数2.7%～18.0%(n=5)。用该方法分析5个案件样品,和常规液液萃取结果接近。结论顶空SPME法用于尿中AMP、MET、MDA和MDMA等化合物的分析,无需有机溶剂,富集效率高,提取-富集-进样一体化,简单方便实用。     

试纸法检测ACP

精斑(seminal stain)是检验强奸案的常用物证,因此做好精斑检验十分重要。ACP试验以其灵敏度极高(1/2万)和简便、直观而成为基层法医物症检验人员最常用的精斑预试验方法,但其缓冲液及显色剂的配制很繁琐,并且,容易失效(4℃冰箱中的储存期为半个月左右),需经常配制,至使试剂的使用效率极低,造成药品的浪费。 笔者通过多次试验,证明定性滤纸具有吸水性强,均匀吸附电解质,易干燥等特点,可将ACP试验用试剂吸附于定性滤纸上,凉干,得到ACP试纸。现将该试纸的制作、使用方法及优点介绍如下:     

腐败生物样品中抗凝血类杀鼠药的HPLC分析研究

介绍以氯敌鼠、华法令为代表的五种抗凝血杀鼠药的HPLC定性定量分析方法.在酸性条件下液-液提取和C_(18)柱固相萃取方法处理生物样品;选用C_(18)分离柱,流动相分别为:水、乙腈,邻酸二氢钾缓冲液(pH7.0)和甲醇/0.8%醋酸,均做梯度洗脱,DAD检测器,检测波长285nm,外标定量,测得血和肝中的提取回收率>60%.在0.01ug-1.0mg/ml范围内呈现良好的线性关系.适用于腐败生物样品抗凝血类杀鼠药中毒案件的检验及有关临床监测.     

反相高效液相法测定异烟肼

目的建立反相高效液相色谱方法定量分析血液、肝脏、及胃内容中异烟肼含量的方法。方法采用液液萃取方法,液相色谱条件为symmetryRC185μm,(4.6mm×250mm);乙腈:10mmol/LK2PO4(97∶3);1.0ml/min;检测波长为265nm。结果该方法的线性范围是0.4μg～40μg,γ=0.9999,最小检出波度为0.1μg/ml。结论该方法准确、快速,适用于毒物分析鉴定。     

人精浆SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳谱型研究

本文采用SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳(SDS-PAGGE)研究了102例中国正常男子精浆蛋白的电泳谱型,得到了具有精液特征性的,可与人阴道液、唾液、初乳及血清进行鉴别的人精浆蛋白电泳谱型,并可作为精斑的确证。另发现一种-83kd 变异型。频率为8. 82±2. 81%。提高了精斑的个人识别机率,在实际应用中取得了初步成效。     

改良的锇酸脂肪染色法

<正> 锇酸亦称四氧化锇,是一种金属氧化物,为无色结晶体,价格昂贵。市售包装有0.5g和1g等,均以玻璃管密封。锇酸染色法[1]是一种古老的染色方法,常用于诊断脂肪栓塞、脂肪心、脂肪肝等疾病,特别适用于经过甲醛固定的病理组织。与其它苏丹类的脂肪染色方法相比,锇酸染色法效果好,且能长期保存,适用于法医办案工作,尤其是案件以后的复查;其缺点是费用较高。1 染色方法