血痕MN型物质快速检验法

MN血型抗原物质在许多特性上类似于ABH血型物质,同为脂溶性的红细胞膜抗原,对酸碱、高温等均有较强的抵抗力,经本室实验研究,血痕中MN血型物质的检测同ABH血型物质,其抗原、抗体的吸收反应可发生于固相与液固界面间,即该反应为一种界面现象,界面发生的反应是很快的。据此提出一种快速检验法:以氨水浸出血痕制膜(固相),可迅速吸收抗体(液相),然后用热解离法定型。     

血痕MN型物质快速检验法

MN血型抗原物质在许多特性上类似于ABH血型物质,同为脂溶性的红细胞膜抗原,对酸、碱、高温等均有较强的抵抗力。经本室实验研究,血痕中的MN血型物质的检测同ABH血型物质一样,其抗原、抗体的吸收反应可发生于固相与液相界面间,即该反应为一种界面现象。界面发生的反应是很快的,据此提出一种快速检验法:以氨水浸出血痕制膜(固相),可迅速吸收抗体(液相),然后用热解离法定型。     

SMCY性别特异融合抗原的克隆表达及其抗体制备

目的利用蛋白检测的快速性优势,研究不同性别在SMCY抗原氨基酸序列的差异,筛选出特异性氨基酸序列,并克隆表达性别特异融合抗原,制备相应抗体,建立一种快速鉴别法医物证性别的方法。方法通过对人SMCY和SMCX进行序列分析,发现了三段差异片段,采用搭桥PCR方法获得差异片段全长基因,连接入p ET-28a载体进行原核表达,用Ni柱纯化后的性别特异融合抗原免疫制备多克隆抗体,用ELISA法和western blot检测SMCY多抗与抗原的反应特异性,制作胶体金试纸条检测样本。结果筛选出具有性别特异性的氨基酸序列,获得SMCY性别特异融合抗原,成功制备出多克隆抗体及胶体金试纸条。结论获得SMCY性别特异融合抗原具有很好的抗原活性,制备的多克隆抗体可以与抗原特异性地结合,用于性别鉴定。     

人体组织中ABH物质分布的研究

本研究采用特异性红细胞粘附试验(SRCA 试验)方法,系统地研究了11例已知 ABO 血型及分泌状态尸体的38种组织器官 ABH 物质的定位与分布,发现粘膜、粘液腺及前列腺中均含有丰富的 ABH 物质,并受分泌状态控制。血管内皮细胞、复层上皮细胞、胰腺腺泡上皮及汗腺中也含有较多的 ABH 物质,但不受分泌状态的影响。新发现肺泡上皮、肝小胆管粘膜上皮亦含有 ABH 物质。其它组织器官除自身的血管内皮及红细胞含有 ABH 物质外,均未测出 ABH 物质。采用 SRCA 试验,室温放置13天的皮肤组织亦能正确地测出其 ABO 血型。     

人类分泌状态的研究及进展

ABO血型系统属人类的重要遗传标记之一。ABO抗原不仅存在于红细胞膜，也广泛存在于人体的体液和分泌液中。在体液及分泌液中分泌ABH血型物质的人称作分泌型（Seers－tors，See）。A型人分泌A物质，B型人分泌B物质，O型人分泌H物质。所有分泌型人都有H物质的分泌；不分泌ABH血型物质的人称作非分泌型（nonsecretors，uSe）[1]。分泌ABH血型物质，首先是在检测人精液和唾液时被证实[2]。后来的研究结果表明：在人类分泌型个体的消化道（唾液、胃粘膜、胆汁、胎粪）、泌尿生殖道（精液、阴道分泌物、卵巢囊肿液、尿）、呼吸道及乳汁…     

抗人N单克隆抗体的制备及其特性的研究

用ON型人红细胞免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得分泌IgM类抗人N单克隆抗体杂交瘤细胞株(ON_1D_3)。其培养上清液抗体效价为128～256,诱生小鼠腹水的抗体效价为8192;与Panel A红细胞反应呈抗N特异性;检测273名成人红细胞,只特异性凝集N(?)MN型人红细胞,不凝集M型红细胞。与猴等9种动物红细胞无交叉反应;酶修饰试验结果表明,ON_1D_3识别的抗原决定簇是唾液酸依赖性的。     

单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞的研制及应用

<正> 本文报道根据反向间接血凝(RPHA)原理,用单克隆抗A、抗B、抗H抗体分别在合适的pH值醋酸盐缓冲液中,致敏醛化人“O”型红细胞,制得单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞。用来检验人体液斑的ABH血型物质。单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞对相应分泌型人唾液的凝集效价为8192倍、4096倍     

用心脏组织检测死者ABO血型一例报告

<正> 利用人体组织检测人体的ABO 血型在法医学实践中具有十分重要的意义,本文作者已报道用红细胞粘连试验研究ABH 物质在人体组织中的分布,已证实心脏内膜组织亦含有与红细胞一致的ABH 物质。现报道一例利用福尔马林固定的心脏组织,成功测定出死者ABO 血型的实际应用案例。     

抗H单克隆抗体与抗H血清在法医检验应用中的比较

<正> 作者用抗H单克隆抗体和抗H多克隆血清与红细胞H抗原的亲合力和不同检材抗原的检出效果进行了比较,现将结果报告如下.1.亲合力的测定比较分别取HMcAb和抗HPcAb各一滴置于载玻片上与等量的10%O型红细胞生理盐水悬浮液混合,室温下肉眼观察红细胞开始凝集的时间和凝集成1mm凝集块的时间.(表1).     

用酶标抗体免疫组化法测定性交后阴道内容物中精子的ABO血型

应用间接酶标抗体免疫组化法测出了53例新鲜精液、5例陈旧精斑及40例阴道分泌液中的精子与阴道脱落上皮细胞的ABO血型,30例精子与不同血型分泌型阴道分泌液孵育,未发现精子吸附阴道液中血型物质的现象,同时发现人类睾丸曲精细管中部份生精细胞、精子细胞,精子;直细精管部份上皮细胞、精液、精子;睾丸网大部份上皮细胞及副睾管中的精液与精子均含ABH抗原,故认为精子上的ABH抗原主要是精子固有抗原,13例性交后阴道内容物中精子的ABO型测定结果:7例与供者血型吻合,6例不吻合。6例中5例从O型精子中测出了女方分泌型阴道分泌液中的A或AB物质,1例B型精子未测出B及H抗原,文中对这种现象进行了讨论。     

人体组织ABO血型检测方法的研究

探讨人体组织ABO血型检测方法。对已知ABO血型尸体的不同组织,用红细胞粘连试验、吸收—抑制试验和吸收－解离试验进行ABO血型测定。12例尸体的16种组织中均检出与尸体血痕相同的ABH物质。对不同温度保存的组织块进行ABH物质检测的结果显示,4℃保存的组织ABH物质的检出时间长于室温,空腔脏器的检出时间短于实质脏器。三种方法中,红细胞粘连试验简单易行,适用于基层单位,吸收－抑制试验用于组织块的测定时优于吸收－解高试验。     

抗人红细胞膜种属特异性单克隆抗体的制备──选择性杀伤免疫活性细胞法

常规抗体制备技术所获得的抗体，不能鉴别结构差异甚微的抗原，本文用环磷酰胺做为免疫抑制剂，诱导小鼠对猴的红细胞膜的免疫耐受；随后，用人的红细胞免疫小鼠制备单克隆抗体（选择性杀伤免疫活性细胞法）。成功地获得了三株分泌抗火红细胞膜种属特异性单克隆抗体的杂交瘤。与常规免疫程序比较，该方法提高了抗体的特异性。经鉴定，这三株抗体均具有良好的种属特异性，可鉴别人和猴等25种动物的血。     

胃组织血型测定证明输血错误一例报告

<正> 本文作者已报道用特异性红细胞粘附试验研究ABH物质在正常人体组织中的分布,已证实胃组织的粘膜上皮及胃腺中含有丰富的ABH物质,可用于检测ABO血型。现报告一例利用手术切除的正常胃组织检测其ABO血型,证实在医疗过程中因输血错误而导致死亡的病例。     

恒河猴ABO血型的研究

本文应用A型、B型、AB型血清，及抗－A与抗－B单克隆抗体对113只猕猴的ABO血型进行了测试。结果表明：在恒河猴（Macacamulatta）红细胞表面及血清中均未证明有类人凝集原和凝集素存在。但可根据其唾液中类人ABH型物质存在的情况判定该动物的类人血型。本实验检出的血型表型频率分别为：A型17．70％；B型52.21％；AB型20.36％；O型9.73％。该结果与国外报道的血型分布频率有差异。     

成人肾脏ABO组织血型1-4型糖链H物质的分布

目的观察1型H、2型H及3/4型H糖链在成人肾组织中的分布及其与分泌状态的关系。方法 应用抗ABO抗体及3种糖链特异的单克隆抗H抗体的免疫组织化学方法,检查分泌型与非分泌型个体肾组织中相应抗原物质的分布。结果 在分泌型和非分泌型人的肾远曲小管均表达2型H和3/4型H物质,1型H和3/4型H物质只在分泌型人肾集合管表达,在非分泌型人中不表达。另外集合管的2型H物质的表达与分泌状态无关。结论 人肾组织有ABH物质的表达,不同肾组织细胞表达的H物质结构差异与AB0型分泌状态有关。     

对12种动物MN抗原的调查

<正> 据文献报道,仅人与某些猿、猴等动物的红细胞中有 M 或 N 抗原。为了进一步查清动物是否有 MN 抗原,对本地区常见的12种735只动物进行了调查,其中有马100匹;牛50头;驴10头;羊50只;兔20只(青紫兰、巨星、大耳白等);犬10条(本地犬、狼犬、德国黑盖);猫5只;鸡200只(来克亨、九斤黄);鸭20只;鹅20只;麻雀50只;鱼20     

单克隆抗M、抗N抗体的研制及初步应用

用人血型糖蛋白 A 和人红细胞分别免疫 BALB/C 小鼠。用被免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,在37℃、5%二氧化碳培养箱中孵育10～15天,然后用 OM 和 ON 型指示红细胞分别检测培养上清液的凝集情况,筛选出能分泌高特异性和高效价抗 M 和抗 N 抗体的细胞株,并建立了 GM_4H3、GM_4H_4、N_2A_3和 N_2D_(10)细胞株。这些细胞株可持续分泌免疫球蛋白 G 类抗 M、抗 N 抗体。应用这些抗体,通过血凝法、解离法和 ELISA 斑点法,可进行血及血痕的 MN 分型。在血型检验中,优于多克隆抗 M、抗N 血清。     

检验ABH血型物质红细胞的研制——检验B血型物质红细胞的制备

<正> 目前,在法医物证检验中,ABH 血型物质的检验占物证检验的大部分。为寻求一个灵敏度高,操作简便的方法,我们将抗 B单克隆抗体结合在醛化人“O”型红细胞表面(红细胞致敏),利用该红细胞检验 B 血型物质获得了初步成功。经反复试验,证明此方法具有灵敏、快速、准确、简便而易于掌握等优点。现将其制备方法及特点报告如下.     

分泌抗人红细胞膜单克隆抗体细胞株的建立

以人的红细胞膜为抗原，采用选择性免疫抑制的程序，免疫BALB／C小鼠。经免疫的小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用血凝法筛选出3株分泌抗人红细胞膜种属特异性单克隆抗体的杂交瘤，即M1A7C4．M3A5B7和M3D9F1。连续传代2个月及复苏冻存半年的杂交瘤，仍能稳定地分泌抗人红细胞膜单克隆抗体。初步鉴定证明：该抗体具有稳定的种属特异性，可鉴别人与其它动物，特别是猴的红细胞，不与己知的血型特异性成分交叉，可凝集成人及脐带血的红细胞。     

唾液血型抗原分泌时限变化及温度对抗原活性的影响

探讨人唾液中ABH血型抗原不同时限的分泌量,以及保存温度对血型抗原活性的影响。应用时间决定性荧光免疫测定法（TR．FIA）对O型分泌型10例和非分泌型5例人在不同条件下唾液中H抗原量进行检测。唾液血型抗原的分泌量随时间而波动,进餐后降低明显,但不干扰分泌型的判定。37℃保存48h抗原活性完全丧失,6℃保存1周抗原活性几乎没有变化。结果表明,唾液分泌时段不影响分泌型判定,将唾液制成斑痕可长期保存样品。