褪黑激素对犬脂肪干细胞向雪旺细胞分化过程中凋亡发生的抑制作用研究

为了探讨褪黑激素(Mel)对犬脂肪干细胞(ADSCs)向雪旺细胞(SCs)诱导分化过程中凋亡发生的影响。本实验将犬ADSCs诱导分化为SCs,并使用免疫荧光法进行鉴定。采用CCK8法选取Mel的最佳浓度。应用q RT-PCR法和Western-blot法检测无Mel组和Mel处理组中ADSCs向SCs诱导过程中细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Bcl-2和Bax的m RNA和蛋白表达水平。结果显示,50 nmol/L Mel处理过的细胞活力最高;ADSCs向SCs诱导后S-100和GFAP呈阳性表达,并且观察到Mel的添加并不会影响到SCs的表型特征。ADSCs向SCs诱导后Bcl-2表达量明显低于对照组,Caspase-3、Caspase-8和Bax的表达量显著高于对照组,细胞凋亡较多;在加入Mel后Bcl-2表达量显著升高,Caspase-3、Caspase-8和Bax的表达量显著下降。结果说明Mel可以显著抑制犬ADSCs向SCs诱导分化过程中的凋亡发生。     

丙酸睾酮对神经支架桥接修复犬坐骨神经缺损的作用

为研究丙酸睾酮对神经脱细胞支架桥接修复犬坐骨神经缺损的作用,选杂种犬6只,手术制备坐骨神经3 cm缺损模型,并用同种异体神经脱细胞支架桥接修复,将修复犬随机均分为试验组和对照组。试验组在犬修复肢小腿外侧注射丙酸睾酮;对照组在犬相应部位注射等量生理盐水。术后4个月,行肌电图检测、腓肠肌湿重比率、腓肠肌和修复神经的组织形态学观察。结果显示,试验组和对照组腓肠肌湿重比率分别是(77.73±2.72)%、(64.59±3.98)%,神经传导速度分别是(21.23±2.23)m/s、(15.7±1.02)m/s,波幅分别是(1.64±0.89)mv、(1.28±0.82)mv。两组间湿重比率、传导速度、波幅均差异显著(P0.05)。试验组中的再生神经纤维数量多于对照组,板层结构清晰完整且优于对照组。结果表明,丙酸睾酮对同种异体神经脱细胞支架桥接修复犬坐骨神经缺损和生理功能恢复均具有促进作用。     

周围神经浸出液对犬脂肪干细胞向神经膜细胞分化的影响

本研究旨在研究周围神经浸出液对犬脂肪源性干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)向神经膜细胞(Schwann cell,SCs)分化的影响。采用Ⅰ型胶原酶消化法体外原代培养犬ADSCs,并应用流式细胞术进行表型分析,同时观察所培养细胞的成脂成骨分化能力。分离犬坐骨神经,无菌剪碎、浸出和过滤制备犬周围神经浸出液。将周围神经浸出液作为诱导剂,作用于犬ADSCs,7d后分别通过倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光试验和Western-blot观察SCs标志蛋白GFAP和S-100的表达情况。结果显示,周围神经浸出液作用于犬ADSCs 7d后,大多数细胞形态由原来的三角形或梭形变为两端伸出2个细长突起的长梭形,非常像成熟SCs的形态;免疫荧光和Western-blot试验显示,周围神经浸出液诱导ADSCs后,细胞出现GFAP和S-100阳性表达。以上结果提示,周围神经浸出液能有效诱导犬ADSCs向SCs分化。     

犬Mnx1基因过表达载体的构建及其对脂肪间充质干细胞向胰岛β细胞分化的影响

本研究旨在构建犬Mnx1基因腺病毒过表达载体,并探究Mnx1基因过表达对犬脂肪间充质干细胞向胰岛β细胞方向分化的影响。本试验构建了腺病毒重组表达载体pAD-Mnx1,经293A细胞包装扩增后产生具有感染性的重组腺病毒,将其按感染复数(MOI)100感染犬ADSCs后,分别在第3、6、9、12和15天观察绿色荧光蛋白的表达情况、细胞形态变化和胰岛β细胞发育相关基因的表达情况。结果显示,ADSCs在感染后24 h出现绿色荧光,形态无显著变化;Mnx1基因表达可激发胰十二指肠同源盒1(Pdx1)基因、神经元素3(Ngn3)基因、肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(Mafa)基因、NK2同源盒2(Nkx2.2)基因、NK6同源盒1(Nkx6.1)基因、神经分化因子1(Neurod1)基因、成对合基因4(Pax4)和GATA结合蛋白4(Gata4)基因等内源性基因的表达。结果证实,腺病毒介导的过表达载体pAD-Mnx1可在犬ADSCs超表达Mnx1基因,从而诱导犬ADSCs向胰岛前体细胞分化,具有进一步诱导犬ADSCs形成胰岛β细胞的可能。     

米尔贝肟对犬钩虫的体外作用

为了评价犬钩虫对米尔贝肟的体外敏感性,试验设空白对照组,米尔贝肟高、中、低剂量组及伊维菌素对照组,考察了药物对犬钩蚴三期幼虫形态和活力的影响及对其移行能力的影响。结果显示,未添加药物的钩蚴大部分保持笔直,而几乎没有弯曲或者卷曲,而在药物添加组,部分钩蚴出现大于45°角的弯曲,弯曲程度远远大于未添加药物的正常虫体;米尔贝肟用药量在1×10-5 g/mL时,8h杀虫率达100%,米尔贝肟用药量为1×10-6 g/mL时杀灭犬钩虫幼虫的显效时间及杀虫效果与伊维菌素组差异不显著(P>0.05);米尔贝肟和伊维菌素对犬钩蚴的移行有显著的抑制作用。结果表明,犬钩虫对米尔贝肟在体外具有一定的敏感性。     

兔脂肪间质干细胞的分离培养与鉴定

取兔腹股沟皮下脂肪组织,用Ⅰ型胶原酶消化,分离培养脂肪间质干细胞(MSCs),并用免疫组化和体外诱导分化方法对其表面分子标志和多向分化潜能进行鉴定。结果显示,兔脂肪组织中能够分离培养出脂肪MSCs,该类细胞表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34、CD45及HLA-DR表面分子标志,并具有可分化为脂肪细胞、神经细胞和成骨细胞的多向分化潜能,证实兔脂肪组织中存在具有多向分化潜能的MSCs。     

三种杀虫剂对犬跳蚤的杀灭作用

三种杀虫剂对犬跳蚤的杀灭作用赵巨奎，徐耀基，丘勇胜（广州市宠物研究中心５１０４０５）为了防治犬跳蚤感染，作者用敌百虫、倍特（Ｂｕｔｏｘ）和除癞灵对犬跳蚤进行了离体杀灭试验及临床应用效果观察。１材料和方法１．１离体试验用虫体供体外杀蚤试验用的虫体采自某...     

巧用速眠新对犬的催吐作用

速眠新是兽医临床上常用的麻醉剂之一 ,它具有麻醉诱导时间短、麻醉效果确实、安全系数较大和操作简单等优点。其副作用除了对动物心血管和呼吸功能有轻度抑制以外 ,还常引起犬出现呕吐 ,尤其是注射不规范时其呕吐比例很高。 2 0 0 2年 8月笔者所在医院门诊收治 1条已拒食 2d的病犬。临床检查未见明显异常 ,拟自静脉输液补充营养 ,因该犬脾气狂躁 ,需对犬进行镇静后再进一步诊治。即用少量速眠新给犬注射 ,患犬出现呕吐。检查呕吐物中有一较大的桃核 ,说明胃内异物的存在是该犬的主要病因。经补液处理后 ,该犬当日就恢复正常。受到这一巧合…     

利用CRISPR-dCas9系统促进脂肪干细胞的成骨诱导分化

为了建立一种快速促进脂肪间充质干细胞成骨诱导分化的方法,本研究利用CRISPR-dCas9系统快速激活成骨前体基因的表达,通过对细胞内前体基因转录的检测和诱导分化后茜素红染色来确定成骨诱导分化的效率。结果可见,通过CRISPR-dCas9系统可以快速地启动RUNX2和OSX基因的转录;经成骨诱导分化后茜素红染色显示,基因编辑过的细胞成骨诱导更快。本研究结果表明,通过CRISPR-On系统可以有效地促进成骨前体细胞相关基因RUNX2和OSX的表达,从而使得骨前体细胞相关基因可以被快速地内源性激活,使得脂肪间充质干细胞快速进入成骨诱导分化状态,促进成骨分化的潜能。     

苯噁唑对犬二甲苯胺噻唑中枢抑制的拮抗作用

二甲苯胺噻唑(静松灵)是近年来国内兽医临床上广泛使用的化学保定剂,对多种动物都具有明显的镇静、镇痛、肌肉松弛和麻醉作用,但对动物的呼吸、循环和消化系统的功能也有一定副作用,如果使用不当或动物个体敏感都可能产生过度的中枢抑制而危及动物的健康。     

硒对汞致雏鸡肝功能损伤的拮抗作用

选用健康伊沙褐雏鸡250只,分为对照组、汞中毒组、3个水平的硒保护组,研究汞对血清中门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影响以及硒与汞之间的相互作用效应.试验结果表明,汞可使血清中AST、ALT、ALP活性显著升高(P＜0.01),使肝组织中GSH-Px活性降低(P＜0.01),引发肝组织脂质过氧化,致使肝组织中MDA含量显著增高(P＜0.01),且有时间-效应关系;硒可使血清中AST、ALT、ALP活性显著降低(P＜0.01),使肝组织中GSH-Px活性显著升高(P＜0.01),阻止肝组织脂质过氧化,致使肝组织中MDA含量显著降低(P＜0.01),且有时间-效应关系.从而说明汞中毒损伤肝功能;硒对汞致肝功能的损伤具有拮抗作用.     

人工感染鸭肝炎病毒对雏鸭肝组织的损伤作用

用不同毒力的鸭肝炎病毒(DHV)感染雏鸭,在感染后第1、3、5和7d分别测定对照组和试验组雏鸭肝组织丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果表明,试验组在人工感染后第5 d MDA含量显著升高,而GSH-Px活性明显降低.提示自由基参与了鸭病毒性肝炎(DVH)的发生发展过程,在DHV诱导的细胞凋亡过程中自由基可能起着关键性作用.     

葛根素对镉致大鼠肝毒性损伤的保护作用

为探究葛根素对镉致大鼠肝毒性损伤的保护作用,将36只雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照组、葛根素组、镉组、镉与葛根素共处理组。葛根素组、镉与葛根素共处理组大鼠以200 mg/kg剂量每日灌服5 g/L羧甲基纤维素钠溶解的葛根素;对照组和镉组大鼠每日灌服相同剂量5 g/L羧甲基纤维素钠;从第15天开始,镉组、镉与葛根素共处理组大鼠在灌胃的同时自由饮用镉水(50 mg/L),持续90 d。试验结束后,剖检采集大鼠肝,测定肝系数,用HE染色观察肝组织病理学变化,用比色法检测肝组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果显示:与对照组相比,镉组大鼠肝组织发生明显病理学变化,肝系数和SOD活性极显著降低(P0.01),MDA、GSH含量和CAT、GSH-Px活性极显著升高(P0.01);与镉组相比,镉与葛根素共处理组大鼠肝组织病理学变化减轻,肝系数和SOD活性显著或极显著升高(P0.05或P0.01),MDA、GSH含量和CAT、GSH-Px活性显著或极显著降低(P0.05或P0.01)。结果表明,葛根素对镉所致的大鼠肝毒性损伤具有一定的保护作用。     

犬细小病毒免疫球蛋白对犬细小病毒中和活性的研究报告

犬细小病毒免疫球蛋白是治疗该病的主要药物。本研究针对静脉注射用犬细小病毒免疫球蛋白、多克隆抗体进行了血凝抑制试验比较,并在细胞上对其进行了蛋白毒性试验和中和活性试验等对比研究。结果发现,免疫球蛋白和高免血清多克隆抗体的血凝抑制价分别为1×211和1×210,它们稀释16倍以后对细胞无毒性作用,其中静脉注射用犬细小病毒免疫球蛋白的中和抗体效价为1∶873,明显优于多克隆抗体的中和效价(1∶426)。以上研究结果为静脉注射用犬细小病毒免疫球蛋白对犬细小病毒病的治疗提供了细胞学上的依据。     

犬腺病毒1型对犬北极狐和银狐的致病性比较

为比较本实验室保存的狐源犬腺病毒1型(CAdV-1)对犬、北极狐和银狐的致病性,以犬、北极狐和银狐为实验动物,建立3组CAdV-1 F1301株的感染模型。攻毒后监测各组动物的临床症状,并计算CAdV-1对这3种动物的半数致死量(LD_(50)),收集感染致死动物的脏器组织,采用病理组织观察、免疫组织化学试验和实时荧光定量PCR等方法比较CAdV-1对犬、北极狐和银狐的致病性。结果显示,3组实验动物均出现神经症状,CAdV-1对犬、北极狐和银狐的LD50分别为106.5T CID50、105.5TCID50和103.0TCID50。病理组织观察和免疫组织化学试验结果显示,3组动物的肝均出现较严重的病理损伤,且均呈CAdV-1强阳性,银狐的脾、北极狐的肺和脾均呈CAdV-1阳性。荧光定量PCR结果显示,3组动物肝中均检测到高拷贝数的病毒DNA,其中银狐肝中的病毒DNA载量高达10~(8.83)copies/g,显著高于北极狐(P0.05)和犬(P0.01),银狐脑组织中的病毒DNA载量也显著高于北极狐(P0.01)和犬(P0.01)。结果表明针对CAdV-1,银狐的易感性大于北极狐,北极狐的易感性大于犬;CAdV-1对3组动物的主要靶器官为肝,银狐的脾和脑以及北极狐的脾和肺也为CAdV-1感染的重要靶器官。本研究为CAdV-1的病理学诊断和综合防控提供了参考。     

大鼠胚胎脊髓组织移植修复脊髓损伤的研究

用E14～16天Wistar鼠胚脊髓组织植入成年Wistar大鼠夹压伤的胸髓内,术后1～6个月经组织学及细胞化学反应检查,显示移植物同宿主脊髓接触紧密,移植物中生长发育的神经组织,以“组织桥”样结构向宿主脊髓延伸并与之融合;移植物与宿主脊髓组织间的界面(i-nterface)有神经纤维相互伸延。示踪剂HRP可由脊髓伤区的尾端跨越伤区,在伤区头端的颈髓及其以上的脑干内恒定地出现了较多的标记细胞。这些主要结果证明,胚胎脊髓组织与宿主脊髓已经建立了解剖联系。     

电针麻醉对犬头、颈部的止痛作用及扩区手术的试验报告

(一)前言 电针麻醉手术成功的主要因素,在于选择适当的刺针穴位配方和有效的电刺激,待无痛觉反应出现时,一面观察患犬的感受性,一面进行电针麻醉的手术操作。 石崎智等于第14次兽医麻醉会、1976年及1977年日本临床兽医学会、1976年东京兽医畜产学会,对电针麻醉施行手术的可能性和适应症作了简要报告。本文着重介绍电针麻醉对犬的头、颈部止痛作用,并报告扩区手术的结果。     

槲皮素对己烯雌酚诱导的仓鼠生精细胞氧化损伤的保护作用

为研究槲皮素(Que)对己烯雌酚(DES)诱导的体外培养仓鼠睾丸生精细胞氧化损伤的保护作用,将生精细胞分别用DES和不同浓度(10、20、30μmol/L)的槲皮素处理,用倒置显微镜观察生精细胞的生长状况,用MTT法测定生精细胞的存活率,用分光光度法检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量。结果显示,Que显著抑制了DES引起的生精细胞损伤,除低剂量组差异不显著外,中、高剂量组细胞存活率显著上升(P0.01);Que显著提高了培养液中SOD的活性和细胞中GSH-Px的含量(P0.01)。说明槲皮素可有效对抗自由基,抑制脂质过氧化,减弱DES导致的生精细胞损伤,提示Que是缓解环境雌激素生殖毒性的有效成分之一。     

六茜素对犬的亚急性毒性试验

六茜素对犬的亚急性毒性试验杜小丽，梁建平，张继瑜，贺子林，徐忠赞，赵广才，伏慧明，李金善（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）为了扩大六茜素的适用范围，减少用药的盲目性，为临床用药提供可靠的依据，作者对犬进行了亚急性毒性试验。１材料和方法１．...     

细菌CpG-DNA对犬免疫增强效果的研究

以犬瘟热病毒为模式病毒,将CpG-DNA与铝胶、蜂胶2种对照佐剂分别与犬瘟热病毒灭活疫苗配合,给犬接种疫苗前后用微量中和试验抽查血清中和抗体效价,根据抗体效价高低判断佐剂的免疫增强效果.结果表明,3种佐剂疫苗均能诱导产生特异性抗体,但组间抗体效价有显著差异(P＜0.01),CpG-DNA的免疫增强作用明显高于其它2种佐剂,CpG-DNA所诱导的抗体效价较蜂胶佐剂高5倍,较铝胶佐剂高7倍.