精斑检验干扰因素的研究

目的研究精斑检验中预试验与确证试验结果的关系,以及取材时间、生活习惯对确证检验结果的干扰。方法取376例阴道拭子,用酸性磷酸酶(ACP)染色法、斑点ELISA法和抗人精PSA金标试纸法检测检测精斑。结果ACP阴性时,可检出P30、精子,性生活后精斑确证检验大部分阳性检出分布在48小时以内样本中,结果经X2检验,P<0.01,差异性显著,而不同的生活习惯对P30检测具有显著性差异。结论研究结果对精斑的检验以及检材的提取具有推广应用和指导性意义。     

精斑预试验试剂纸快速检测法

笔者根据基层技术工作的特点,利用自制试剂纸作精斑预试验,现将试剂纸的制作过程和试验操作及结果报告如下。1　试剂纸和显色纸的制作按酸性磷酸酶试验配制缓冲液和显色液;将干净的定性滤纸数张浸泡于缓冲液中,充分浸透,将其取出,自然晾干,即实验所用试剂纸;用同样的方法将数张滤纸浸泡于显色液中,浸透、晾干、制成显色纸。2　实验操作及结果将0.3cm0.3cm精斑检材置于干净器皿上(载玻片、白瓷板、试管、现场干净的玻璃、搪瓷、陶瓷等器皿),加入1滴水(约0.05ml),使检材完全浸湿,挤压后将检材取出,用试剂纸沾取检材浸出液,置于显色纸上,若为精…     

抗P30胶体金免疫试纸条灵敏度和特异性探讨

抗P30胶体金免疫试纸条(又称精斑试纸条)是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原(PSA,又称P30)进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。但在实际案件中,有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果,却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况,为验证及比较灵敏度及特异性,本文进行了一些探讨,现报道如下。1材料和方法1.1材料精斑试纸条:购自美国E-boat Dallas公司。样品:10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者,阴道分泌液斑…     

碘化碘钾法检验精斑150例

1 150例精斑检验结果的概况 (1)102例是案发后1个月内的斑迹,均出现多量的碘化碘钾结晶阳性反应,镜下(40×15倍)容易发现精子。 (2)23例是案发后2～3个月的斑迹,均出现多量的碘化碘钾结晶阳性反应,镜下皆发现精子。 (3)25例是用棉签蘸取被奸人尸体的阴道内液斑,在案发后1个月内进行试验,也都出现碘化碘钾结晶的阳性反应,同时发现精子。另用无精液的阴道液斑,作空白对照试验,均呈阴性结果。 2 陈旧的精斑检材和配制不同时间碘化碘钾试剂的实验情况     

用滤纸提取检验微量炸药

·检材的提取:1.案犯包装炸药后其双手可能接触到的物品上,如手套、烟盒、火柴等,遗留在这些物品上的微量炸药用蒸馏水(或丙酮)浸湿的滤纸粘擦,备检。2.嫌疑人的手掌、指甲及衣服夹窝部等处,将滤纸用蒸馏水(或丙酮)浸过后放在上述部位粘擦,夹窝部要将滤纸敷上轻弹衣服,备检。3.在嫌疑人住处,提取其可能包装、存放炸药的部位,如桌面、椅面、地面等地方的尘土。4.提取嫌疑人上下衣口袋中的尘土,可将口袋翻出,轻轻弹到滤纸上备检。检验方法:1.用滤纸作载体检验:提取的检材分成几份于滤纸上,直接加乙二胺、奈氏试剂和硫酸一二笨胺等试剂检验。2.用滤纸代替脱脂棉提取检验:将提取检材的滤纸每页分     

双面胶带法快速检验精斑

精液及精斑是常见的生物物证,精斑的确证主要有3大类方法:形态学检查、免疫学检验及生化分析,而形态学检查是认定精斑存在最简便、可靠的方法[1]。在实际检案中,笔者总结了一种简单实用的精子快速检出方法———双面胶带法。介绍如下:1设备与材料1.1器材双面胶带,载玻片,盖玻片,分离针,吹风机。1.2试剂染色Ⅰ液(酸性品红液):将媒染剂硫酸铝5g溶解于100ml煮沸的蒸馏水中,再加0.1g酸品红于溶液中进行搅拌,使之充分溶解。染色Ⅱ液(苦酸靛蓝胭脂红液):取靛蓝胭脂红1g,置于饱和苦味酸溶液300ml中进行溶解,过滤后使用。1%的盐酸溶液,95%乙醇溶液,…     

热压法转印被墨汁和碳素墨水掩盖的书写字迹

我们选用几种转印效果较好的试剂,结合加热的方法,可使被掩盖的书写字迹转印出来,现介绍如下: (1)材料和方法 调温电熨斗1个,双圈牌Φ15cm定性滤纸,乙醇、二甲基甲酰胺、草酸、氯化铵等有机溶剂,厚页纸和薄页纸。 在平整的硬性材料上放置两张滤纸,将检材置于其上,字迹向上。取滤纸1张,根据检材所用的书写材料和涂抹物质,选用合适的试剂,将滤纸浸湿,取出后吸去多余的试剂,覆盖在检材上,再     

精斑定性检验52例回顾分析

在性犯8罪物证检验中,确认精斑存在与否是非常关键的.检验精斑的方法很多,如P30检验、抗人精血消沉淀环及琼脂糖扩散试验等,其特点各异.最近笔者以Dot-ELISA进行P30检验、抗人精血清沉淀环试验及沉渣涂片镜检精子3种不同的方法对52例性犯罪案件进行了检验并做了统计分析,报告如下1 检验方法(1)P30检验,以DO-ELIA直接法进行(HRP-P30购于公安部第二研究所)(2)沉淀环试验,所用抗人精血清效价为1:2000,分别购于公安部第二研究所及淮北市公安局(3)精子检验,沉渣涂片,用美蓝染色后直接镜检,一般可用化人精血清沉淀环试验后的沉渣涂片,不必干燥     

无精子精斑的DNA检验1例

１９９８年１０月１６日,河北省×市发生一起强奸杀人案,现场提取避孕套１只。经当地公安机关检验,避孕套内检出精斑,血型为Ｂ型,与嫌疑人王×血型相同,送来要求进行ＤＮＡ检验。材料与方法１．送检材料　现场提取避孕套１只,内有可疑液体,当地公安机关将其转移至干净纱布上。将此检材编为１号;嫌疑人王×血斑１份,编为２号。２．精斑检验　取１号检材少许,浸泡、离心,取上清液经抗人精抗体环状沉淀试验和ＰＳＡ胶体金标试纸检验,结果均为阳性;取沉渣经伊红美蓝染色、镜检,未检见精子,只检见上皮细胞。３．ＤＮＡ的提取　剪…     

混合斑中精斑ABO血型的检验

<正> 1988年,壹岐裕志等报告了用吸附抗α_2-SGP 血清的硝化纤维素膜(NCF)检验混合斑中的精斑 ABO 血型,但耗时。本文作者通过对此方法的改进,采用常彩琴等研制的抗人精特异蛋白血清(anti-human seminalpeculiar protein,ASPP),采用蛋清粘片热解离法检验混合斑中精斑 ABO 血型,耗时短,效果好。现介绍如下。     

无精子精斑的STR基因型检验研究及在物证鉴定中的应用

在对强奸案的法医物证检验中,有时会遇到因行为人曾经做过输精管结扎术或行为人患无精子症,此时,行为人遗留下的精斑中无精子(精斑预试验和抗人精试验均阳性,但找不到精子),一般称为无精子精斑.对此种物证如沿用常规的精斑DNA提取方法检验,毫无结果.为了解决检案中对无精子精斑无法确定犯罪嫌疑人的问题,作者对此进行了试验研究,取得了满意的效果,并成功的应用于实际鉴定工作中.     

用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,结果正确检出精斑的准确率达100％。对混合多人精液稀释液的最高检出稀释度为1/10000,非精斑检材均不出现阳性反应。该法的特异性完全适合精斑确证检验鉴定的需要,其灵敏度明显高于传统的精斑确证检验方法。本法操作简单,无需特殊仪器设备,使用的抗体来源方便,便于应用。     

PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.     

PSA试验在精斑检验中的应用探讨

目的通过比较、分析PSA实验结果,探讨PSA试验在精斑检验中的合理应用。方法对检材进行PSA试验后,通过差异裂解法获得上清及沉渣STR分型。结果经STR检测,与PSA试验结果存在不一致,其中假阳性13例,假阴性1例;上清中检出男性成分2例,男女混合9例。结论 PSA试验存在一定假阳性及假阴性率,检验经差异裂解法分离得到的上清不仅可以增加精斑检验的成功率,还可以作为补充为精斑检验带来更多有价值的信息。     

胶乳凝集试验及其在精斑检验中的应用

<正> 精斑检验在鉴定法医学性犯罪案件中有很重要的作用,精斑确证试验的方法主要有:形态学方法、化学方法、生物化学方法及免疫学方法。这些方法各有其优点和一定的局限性,目前仍较多地采用精子检出法和抗人精液血清琼脂双扩,而输精管结扎术者及精子缺乏症者其精斑中无精子,抗人精液血清特异性不够好便难以检出。近几年来用特异性抗-P30血清作     

双面胶带法快速检出精子

在性犯罪案件中,确认精斑存在与否非常关键,而检出精子是认定精斑存在最简便、最可靠的方法,并且不需要特殊的试剂和仪器,同时也为案件以后进行DNA检验打下基础,适用于各基层实验室.作者在工作实践中,总结了一种简单实用的精子快速检出方法-双面胶带法,现介绍如下.     

5种免提取试剂盒检验滤纸血痕结果的比较

目的探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果。方法陈旧滤纸血痕(存放时间12～14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组。应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果。结果陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91%～100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次。结论本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次。     

抗人精浆特异蛋白血清的制备与纯化

本文报导检验混合斑中精斑ABO 血型所用抗人精浆特异蛋白(anti-human seminal peculiarprotein,ASPP)血清的制备及用溴化氢活化琼脂糖4B 为载体的亲和层析纯化抗血清方法,并指出纯化时的最佳条件。该血清可准确地分离混合斑中精斑的ABO 血型。     

性侵犯案件中对于精斑试纸条使用灵敏度以及特异性的研究

抗原胶体金免疫试纸条也就是精斑试纸条,这是一种使用色谱层析技术以及免疫学方法通过前列腺特异性抗原对特异性进行检测的办法.该办法在实际操作过程中具备简单、所耗费时间短、得出的结果容易判断以及没有特殊设备要求等诸多优势而在日常精斑确证试验中在法医学的实际检案上.在实际检测过程中,很可能会出现精子检测不到或者是男性的DNA不能进行扩增情况的发生,为对此种办法的灵敏度和特异性进行验证和比较,本文特对此课题做一探讨,相信本文能够对相关课题研究起到抛砖引玉的作用.     

Chelex快速处理法成功检测肛门拭子1例

在实际办案中 ,法医检验精斑多集中于阴棉、内裤、擦拭物 ,而肛门拭子检验较少 ,笔者遇到一例 ,并成功检出犯罪嫌疑人所留精斑的基因型。2 0 0 2年 3月 ,谢某 (女 ,4 2岁 )在中山市东区某出租屋被杀。提取死者谢某阴棉、肛门拭子及嫌疑人曾某、于某、周某等人血纱 ,进行ＰＣＲ检验比对。血痕、混合斑ＤＮＡ提取见文献[1] 。ＤＮＡ扩增 :采用ＰＥ公司Ｐｒｏｆｉｌｅｒｐｌｕｓ试剂盒扩增。电泳采用 310遗传分析议电泳分型。第一次检验事主阴棉中精斑 9个ＳＴＲ位点基因型均与嫌疑人曾某相同 ,偶合概率为 1.3× 10 -12 ,从而认定精斑为曾某所…