由化脓棒状杆菌所致绵羊脓毒症的细菌学检查

化脓棒状杆菌常存于动物粘膜表面,可引起多种动物的化脓过程,特别是侵害牛、绵羊、山羊及猪,主要引起化脓性肺炎、化脓性关节炎、化脓性乳房炎以及其他各种化脓病灶。在许多情况下,本菌可为继发性侵入者。在我国一些地区所发生的骆驼“脓疱病”病例中,有的分得假结核棒状杆菌,有的则分得化脓棒状杆菌。至于由化脓棒状杆菌所致绵羊的脓毒症,则较少见。兹将所遇一例的细菌学检查情况报道如次,供参考。 某实验动物场,饲养有绵羊、山羊各数     

鹿源蜡状芽胞杆菌的鉴定及药敏谱测定

蜡状芽胞杆菌(Bacilluscereus)引起人的食物中毒及感染症(蔡妙英等,1985),早已被证实。现已确认该菌为人和动物的致病菌。在家畜,该菌引起猪中毒(魏建功等,1990)及骆驼感染(魏建功等,1990)等已见报道。但在野生经济动物,特别是梅花鹿,由此菌引起的感染尚未见记载。本试验对鹿源蜡状芽胞杆菌分离株的培养生长特性、形态及染色特性、生理生化特性、对实验动物的致病力以及药物敏感谱进行了研究。     

牛化脓隐秘杆菌的分离及其主要毒力基因的PCR鉴定

从2009-2012年多个奶牛场送检的5份以奶牛化脓性炎症为特征的病料中分离出5株细菌,根据其革兰氏染色的形态特征、培养特性、生化特性以及16SrRNA基因序列的BLAST分析,确定分离菌为化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes),并对分离菌的主要毒力因子基因进行了PCR鉴定和动物试验。结果显示,5株分离菌的16SrRNA基因序列与GenBank中收录的11株牛源化脓隐秘杆菌16SrRNA基因序列的同源性为99%以上。HLJ-1005株分离菌基因组中缺失胶原结合蛋白(CbpA)基因,但包含溶血素(PLO)基因、神经氨酸酶H(NanH)基因和神经氨酸酶P(NanP)基因,且HLJ-1005株分离菌的致病力明显弱于其他4株分离菌。证实,化脓隐秘杆菌的致病力与cbpA基因和nanP基因的存在相关。     

ELISA检测双峰驼假结核棒状杆菌病抗体的模拟试验

由假结核棒状杆菌所致的骆驼脓肿病,是一种呈地方性散发流行的传染病,其在我国甘肃、新疆、内蒙及宁夏等省(区)流行严重。诊断假结核棒状杆菌病的血清学方法很多,但都不甚理想,其中以IHA的特异性及敏感性较好。本研究的目的在于以实验动物为模型,探讨ELISA在检查双峰驼假结核棒状杆菌毒素抗体中的价值,并将其与IHA进行比较,对应用此法早期诊断双峰驼假结核棒状杆菌病的可行性提供实验室依据。     

伪结核棒状杆菌可视化LAMP现场检测方法的建立

为建立伪结核棒状杆菌可视化LAMP检测方法,根据伪结核棒状杆菌16S rRNA基因的特异性保守核苷酸序列设计2对引物,通过反应体系和反应条件的优化,建立了伪结核棒状杆菌可视化LAMP现场检测方法,并评价该方法的特异性和敏感性。结果显示,本实验所建立LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h。利用该方法检测大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌等山羊和绵羊常见的15种细菌的DNA样品,结果显示仅伪结核棒状杆菌检测为阳性,其他细菌检测为阴性。该方法对阳性质粒标准品pMD19-Cory的最低检出浓度为4.7 copies/μL。应用建立的LAMP方法和普通PCR方法对128份山羊皮下脓肿样品进行检测,结果显示LAMP方法和普通PCR方法的阳性率分别为21.1%(27/128)和20.3%(26/128),2种检测方法的总符合率为99.2%(127/128)。结果表明,本研究建立的可视化LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、快速的优点,为山羊和绵羊伪结核棒状杆菌感染的可视化现场快速诊断提供可行方法。     

四川省山羊皮下脓肿的流行病学调查及病原体分析

为调查达州、广安、攀枝花、巴中、资阳等四川省主要山羊产业区内的山羊皮下脓肿病的流行病学和致病病原,并对临床分离菌进行药物敏感性评价,以指导合理使用抗生素。在厌氧和常规培养条件下从临床病例中分离细菌,结合细菌的菌落形态和细菌生化特性分析,通过16Sr RNA基因序列分析进行细菌鉴定;测定分离菌的半数致死量(LD50)以判定其毒力强弱;使用CLSI推荐的K-B法进行药敏试验。结果表明,该病以1周岁左右的母山羊在春秋季发病为主,发病率为8.36%~11.27%,平均发病率为9.44%;分离的主要致病菌是伪结核棒状杆菌和金黄色葡萄球菌;其中伪结核棒状杆菌xw2株的LD50为107.5CFU/m L,金黄色葡萄球菌xj5株的LD50为109.7CFU/m L;药敏试验发现这两种分离菌的耐药现象比较普遍,对青霉素和庆大霉素的耐药现象比较严重,但20株伪结核棒状杆菌菌株对环丙沙星、利福平、头孢噻污的敏感率均≥85.00%,14株金黄色葡萄球菌菌株对氨苄西林、左氧氟沙星、利福平的敏感率均≥85.71%。     

巴氏杆菌人工接种感染试验

多杀性巴氏杆菌(以下简称巴氏杆菌)是畜禽巴氏杆菌病的病原菌。其分布遍及世界各地,常常引起畜禽巴氏杆菌病的发生和流行,造成畜牧业生产的很大损失。其所致的巴氏杆菌病是畜禽的一种重要传染病。巴氏杆菌取何种途径、在什么样的情况下引起发病,长期以来有两种说法:一是内源性感染,认为巴氏杆菌正常存在于动物体内,特别是呼吸道内,当遇到某些应激因素的影响,抵抗力降低时,就可侵入体内引起发病。另一种说法则     

山羊皮下脓肿病原菌三重PCR检测方法的建立与应用

为同时检测伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌和化脓隐秘杆菌3种引起山羊皮下脓肿的主要病原菌,选择针对这3种病原的特异性引物,经条件优化后建立一种可同时检测以上3种病原菌的三重PCR方法,评价了该方法的特异性和敏感性,并检测了临床样品.结果显示,所建立的三重PCR方法仅对伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌及化脓隐秘杆菌这3种目的...     

牛源纹带棒状杆菌的分离鉴定及其耐药基因与agr管家基因的检测

首次于牛鼻拭子中分离得到1株优势菌株,经16S rRNA鉴定该菌为纹带棒状杆菌。动物回归试验、小鼠致病性试验结果显示,该菌具有一定的条件致病性。药敏试验与耐药基因检测结果显示,该菌四环素耐药基因与大环内酯类药物耐药基因均呈显性表达。PCR检测结果显示,该纹带棒状杆菌存在毒力相关基因——agr管家基因(accessory gene regulator)。     

金丝猴急性肾盂肾炎一例

金丝猴急性肾盂肾炎一例宋培林石柱奎（广西桂林市七星公园５４１００４）肾盂肾炎通常是肾盂和肾实质受细菌侵袭引起的炎症，其病原为棒状杆菌和牛肾盂肾炎杆菌，大肠埃希氏菌、链球菌和变形杆菌等也可引发本病。１９９７年８月，我园１只约１４岁雄性川金丝猴发生急性肾...     

胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌株体内外培养转录差异的研究

为揭示胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌株在体内外培养转录的差异,将该菌培养至对数期采用滴鼻的方式攻毒SPF级昆明小鼠,取小鼠肺组织及菌体纯培养物采用Illumina Hi Seq2500高通量测序平台对该菌在体内外培养的转录差异进行转录组测序(RNA-Seq)分析。结果显示,小鼠肺组织中获取该菌的Clean reads与指定参考基因组的比对效率达15.68%,体外培养菌体的比对效率为97.99%;以后者转录组为对照,共筛选出差异表达基因(DEG)333个,其中上调基因113个,下调基因220个,挖掘新基因6个。对DEG进行GO、COG及KEGG等分析可见,DEG主要富集在能量的产生与转化、碳水化合物转运和代谢、无机离子转运与代谢、氨基酸转运与代谢等方面,主要集中在碳代谢、ATP结合蛋白转运蛋白、嘌呤代谢、氨基酸的生物合成、硫代谢等通路上。本研究对胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌株在SPF昆明小鼠体内及体外培养转录差异进行了分析,一定程度上揭示了该菌的致病机制,为后续胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌株致病机制的研究提供了依据。     

育成牛李氏杆菌分离株特性鉴定

李氏杆菌病是一种人畜共患疾病,本属有四种细菌,其中产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes)于1926年由Murray等人在英国首先查明,现世界各地均有报道。该菌可使50多种畜、禽和人致病,部分野生动物、鱼和甲壳类均能自然感染。我们从南京W牧场相继发生两例李氏杆菌病育成乳牛脑及肝组织中分离到1株产单核细胞李氏杆菌,鉴定结果表明与已知李氏杆菌特性一致,现将分离过程和鉴定结果报告如下: (一)材料和方法     

仔猪和马的李氏杆菌病病例

笔者于50年代末期至60年代中期曾在甘肃省靖远、临夏、天水等地调查了李氏杆菌病在仔猪中的流行情况。病猪均有明显的中枢神经系统症状。通过从自猪分离的六株细菌的分析,包括形态及培养特性、生化特性、对实验动物的致病力、血相等项目的检查,鉴定该菌为单核球增多性李氏杆菌。其共同特点为革兰氏染色阳性,无荚膜和芽胞,有运动性,发酵杨苷和蔗糖,对豚鼠有病原性。该菌与猪丹毒杆菌有许多相似之处,其主要区别点是:猪丹毒杆菌无运动性,不发酵蔗糖和杨苷,对豚鼠无病原性。剖检死于实验感染之     

肺炎克雷伯氏杆菌致病性试验

肺炎克雷伯氏杆菌(Klebsiella Pneumoniae)又称荚膜粘液杆菌、肺炎杆菌、佛里兰德(Friedlander)杆菌。该菌存于人类呼吸道,为引起肺炎的病原体。在家畜方面,有人曾自肺炎和败血症的患马、患猪的肺组织及内脏器官中分离到该菌。作者也从6个病猪场患“猪抽气病”的病猪体内和广东、广西、湖南等省、区流行的“牛喘气病”的病牛体内分离到该菌。通过人工复制、疫区病愈牛血清中免疫抗体的测定、流行病学调查、防治经验和药敏试验等都已证实A、B型肺炎克雷伯氏杆菌确实是牛喘气病的主要病原,也很可能就是原发性病原。为了进一步证实此问题,特进行了本试验。     

猪化脓棒状杆菌病的诊断

猪化脓棒状杆菌病的诊断阎兴民达能太哈斯巴图杨淑英李玉霞（内蒙古阿拉善左旗兽医站７５０３００）胡久明樊贵忠刘洪直王新杰（阿拉善左旗综合养殖场）棒状杆菌病是一种以某些器官组织发生化脓性或干酪性病理变化为特征的慢性传染病。国内有关伪结核棒状杆菌病报道居多，...     

应用SPA法鉴定猪丹毒杆菌的血清型的研究

迄今为止,猪丹毒杆菌血清型已报道有Ia、Ib、2、3、4、5……22及N型共24型。 近年来,随着对猪丹毒研究的深入,不同血清型猪丹毒杆菌与流行病学、致病力及免疫间的关系已为许多学者所重视。利用葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A简称为SPA)作为一种特殊载体,进行细菌的定型(群),国内外已有不少报道。我们将猪丹毒杆菌特异性分型高免血清标记于SPA,鉴定猪丹毒杆菌血清型。确证它同样具有快速、敏感和简便等优点,现将111株不同来源的猪丹毒杆菌血清型鉴定的结果报道如下。 材料与方法     

肺炎克雷伯氏杆菌致病因子的测定

A、B型肺炎克雷伯氏杆菌对人和家畜以及多种实验动物都具有致病性。但该菌的致病因子是什么?有关书刊中都非常缺乏这方面的材料,只是在上海二医院编著的《医用微生物》(人民出版社出版)一书中有“荚膜是很重要的致病因素”的论述,另在余编著的《细菌学》(人民出版社,1955)一书中也曾写道:“肺炎克雷伯氏杆菌对人体的致病力不     

副鸡嗜血杆菌基因文库的构建与筛选

为了筛选副鸡嗜血杆菌的体内表达基因,提取了副鸡嗜血杆菌的全基因组,构建了副鸡嗜血杆菌基因组的pET系统表达文库。运用PCR及核酸内切酶(SalⅠ+NdeⅠ)鉴定基因文库,并以病原菌吸附后的康复血清作为探针,采用菌落原位杂交的方法对基因文库进行筛选。结果显示,重组质粒中有0.5～2kb的片段插入,99%的基因包含在基因文库中;重复筛选后得到的阳性克隆再经过PCR与SalⅠ+NdeⅠ酶切鉴定后定向测序,并对测序结果在NCBI上进行分析后发现筛选获得的基因中,有1个表达为转运谷氨酰还原酶、1个表达为转录终止因子,1个表达为荚膜合成域2,还有2个表达为保守假想蛋白。结果表明,本研究应用体内诱导抗原技术(IVIAT)筛选到了一些副鸡嗜血杆菌体内诱导表达基因,并对基因的功能做了初步探讨,在找寻副鸡嗜血杆菌在体内生存以及致病关键基因的道路上前进了一步,为传染性鼻炎的预防和治疗积累了有价值的资料。     

牛源A型多杀性巴氏杆菌的生物学特性鉴定与致病基因检测

为研究在田间分离的1株牛源多杀性巴氏杆菌的生物学特性及致病特征,对该菌用平板划线法进行纯化;并利用文献中所提及的该菌分型引物及常见毒力基因引物对其血清型及毒力基因进行PCR检测;利用该菌进行动物致病力回归试验,以石蜡切片的形式观察病理变化;并对其具有较强致病性的原因进行分析。结果显示,该菌株为A型多杀性巴氏杆菌;该菌的半数致死量为25.85 CFU/m L,为强毒株;耐药性无明显变化;23种常见毒力基因中检测到19种。动物回归试验观察结果显示,小鼠出现呼吸急促,精神沉郁,畏寒,眼内出现分泌物等临床症状;病变器官组织学观察结果显示,其主要病变为肺泡充血、炎性渗出,脾淋巴细胞减少及巨噬细胞增多,肝细胞及肾小管上皮细胞广泛性坏死等病变。结果表明,该菌具有较强的毒力,病症久治不愈的原因与毒力因子的分布有关。     

弯杆菌性肠炎的病理生理学

空肠弯杆菌(Campylobacter Jejuni)于1957年首次指出与肠道疾病有关。由于它在公共卫生上的重要性,促使研究工作者进行了许多阐明其病原学特征及所致疾病的研究。现仅就近年来弯杆菌性肠炎的病理生理学研究进展情况概述如下。 (一)病原菌的性质 空肠弯杆菌在分类上属于螺旋菌科,弯杆菌属。本菌革兰氏染色阴性,呈多形性,对数期培养物呈弧形或螺旋性杆状,老龄培养物则以圆球形为主。本菌藉助其一或多根两端鞭毛而有迅速移动的运动力。在微需氧环境(5～10％氧,3～10％二氧化碳)中于42℃生长最佳。可在许多基础培养基包括布氏杆菌琼脂和缪勒—亨通琼脂上生长,但欲获得最佳的分离需添加营养补充物,如溶解的全血、硫酸亚铁、次亚硫酸氢钠、丙酮酸钠等。最近,Tenover等(1985)应用一种原来用于培养淋球菌的化学上特定的改良培养基,发现58％的空肠弯杆菌分离物至少对一种氨基酸是营养缺陷型,并且研究出一种可用于空肠弯杆菌流行病学研究的生长定型法。