微量检材DNA提取方法

法医DNA鉴定中常见的微量检材,是指含有微量核DNA的降解检材(例如陈旧骨骼等)和附着载体上生物组织量少的检材。为了获得“大量”的检材DNA就必须增加检材用量,扩大反应体系。应用大反应体系提取微量检材DNA时,常出现提取溶液DNA含量过低,而不能获得DNA沉淀。如果不采用有效的方法,就会由于提取操作不当而引起DNA损失,导致PCR反应失败,直接影响案件的侦破和法庭证据的科学性。本文应用正丁醇浓缩法成功地解决了微量检材DNA的提取问题,在实际的案件鉴定中取得了满意的结果。1材料与方法1.1微量检材所用微量检材均来自案件鉴定所用…     

特殊载体上微量生物检材DNA检验2例

<正> 1案例资料 案例1 2003年2月8日,在浙江某地一公共厕所内发生一起抢劫杀人案。现场勘查中仅提取到一副近视眼镜,没有其他物证线索,而排查出来的嫌疑人均不承认是该眼镜的主人,也未到过现场。作者通过     

伊丽莎白瓜上微量生物检材DNA检验1例

1案例简介与检验结果2005年6月10日5时许,廊坊市安次区某养猪场发现丢失仔猪百余头,价值6万余元。被盗猪舍墙外有一伊丽莎白瓜棚,瓜棚内瓜秧倒伏,并有杂乱足迹与瓜皮。现场提取到5块有新鲜牙齿印痕的瓜皮。通过使用Chelex法提取瓜皮上咬痕处脱落上皮细胞DNA,采用Identifiler试剂盒进行复合扩增,经ABI310型基因分析仪电泳分型,有4块瓜皮获得满意结果(见图1、图2、表1),为本案提供了有力的证据。2讨论一般在吃瓜过程中,口唇及口腔粘膜与瓜接触面大,摩擦力大,脱落细胞易粘于其上,同时吃瓜过程中,唾液分泌增多,遗留于瓜皮上的脱落细胞相应增…     

6种特殊生物检材的DNA提取

在许多案件中会遇到一些特殊生物检材，如鼻涕、经联苯胺染色的血痕、甲醇固定后经伊红美蓝染色的涂片、牙刷、汗斑及软骨等，如何充分挖掘这些特殊生物检材的证据作用，将对侦破工作和定罪量刑有重要意义。但是实际上，许多特殊生物检材在提取DNA时有一定困难，导致实验结果差。作者在实际检案中遇到了上述６种特殊生物检材时，用文献犤１犦建立的DNA提取方法，成功地提取了DNA并分型，报道如下。１案例简介案例１２００１年１月，河北省张某被头罩面罩的歹徒持刀入室抢劫杀害。送检检材为被害人张某血样、犯罪嫌疑人田某血样及罪犯弃…     

批量提取微量DNA在案件检验鉴定中的应用3例

随着DNA检验灵敏度的提高,越来越多的案件需进行微量生物检材DNA的检验,本实验室应用96孔板批量提取微量生物检材DNA,大大提高了检案效率,在案件中发挥了重要作用。现介绍如下：1方法1.1 DNA提取取细轴棉棒用TES浸湿棉棒上棉签后擦拭送检物品（如绳索、胶带、打火机、螺丝刀等）上可能有脱落上皮细胞的部位,     

果核微量生物物证DNA检材提取方法的考量

正近年来,犯罪现场物证呈现多样化、微量化的发展趋势。微量物证具有体积小、隐蔽性强、不易察觉、不易毁灭等特点~([1])。目前微量物证DNA检验工作的瓶颈主要在接触性DNA检材的发现和提取上,接触性DNA类生物检材因其DNA含量少、PCR抑制物多、DNA检验成功率低而成为法医DNA检验的重点和难点~([2])。本文结合实际工作中的3起案例,对果核上微量生物物证DNA的提取方法     

微量生物检材DNA检验的研究

在日常检案中经常遇到微量的生物检材 ,由于重视不够 ,提取不当 ,检验效果不甚理想。为了充分发挥微量生物检材的作用 ,更好的为侦察破案服务 ,笔者对部分微量生物检材进行了PCR STR检验研究 ,并取得了一定效果。现报道如下 :1　方法和结果实验样品　均由非本实验室的志愿者提供 ,一次性牙刷 10个 ,日常用牙刷 4个 ,头皮屑 2人分 ,一次性纸杯 10个 ,面部擦拭斑迹 5份 ,梳子 2把。另取杀人案件现场嫌疑人遗留的衣服领子 1个 ,盗窃案件现场提取的犯罪嫌疑人饮酒用的瓷碗 1个。试剂与仪器采用 970 0扩增仪 (ABI公司 )及ABI 377测序仪 ,Pr…     

犯罪现场生物检材真伪的分析

随着DNA检验技术的日趋成熟和广泛应用，其在案件侦破中的作用越来越显著，但潜在的隐患也日渐显现，一方面由于DNA检验技术灵敏度的提高，许多微量DNA检材都能得到成功分型；另一方面在不断提高生物检材检验水平的同时，犯罪分子也在时刻注意这些进展，利用生物检材伪装现场、     

应用激光生物检材发现仪提取痕量DNA1例

1案例资料 2013年某日,本地区村民何某家中的一只保险箱被窃。在中心现场提取到口罩一副,怀疑为犯罪嫌疑人遗留,要求进行DNA检验。1.1 DNA检验口罩在自然光下观察,未见可疑斑迹。将检材置于暗室,使用TL-445B台式激光生物发现仪（Tech-Long国际股份有限公司）用445nm纯蓝激光激发,佩戴专用眼镜则见可疑斑迹处出现荧光反应（图1）。     

浅议生物检材的来源及与犯罪的关系

确定生物检材的来源与犯罪活动之间的关系是提升DNA鉴定证据证明力的重要环节。本文从生物检材来源的分类、排除等方面阐述了确定生物检材的来源在提升证据价值、理解证据的证明力强度、提高办案质量等方面的重要作用。     

提取痕量检材DNA破获凶杀案1例

1案例2006年7月北京市某区发生一起入室杀人案,死者为女性(21岁),经法医尸体检验,鉴定为外力致机械性窒息死亡。提取以下五种生物检材并进行检验,现场插线板所连接电线上潜在的人体脱落细胞、死者指甲末端、死者阴道棉球拭子、死者心血和犯罪嫌疑人静脉血。用去离子水湿润的无菌脱脂棉,反复擦拭插线板所连接电线,小体系Chelex法[1]提取电线擦拭物和指甲甲缘附着物的DNA,用两步分离法去除阴道棉球拭子女性成分后,显微镜检,仅检见一个精子,用酚-氯仿法[2]提取精子DNA。PCR扩增采用PowerPlex!16System试剂盒(Promega公司美国),并用ABI-3…     

轮奸案中生物检材的提取1例

1案例 某日凌晨，刘某被两男子轮奸。现场提取受害人刘某的血液一份，内裤一条，长筒袜一只；嫌疑人朱某、王某的血液各一份。经初步检验，在长筒袜上未检出人精斑，在内裤前裤腰部、裆部及裆部后侧均检出人精斑，镜检找到精子。对三个部位的检材进行ABO血型检验，裆部后侧为A型，前裤腰部为AB型，裆部为AB型。受害人刘某的血型为O型，嫌疑人朱某血型为A型，嫌疑人王某血型为AB型。     

极微量检材的 MN血型检验1例

微量物证检验是法医工作经常遇到的一个问题 , 而极微量物证检材的检验又是某些重大疑难案例的难点 , 尤其当检材失去了分子水平检验的条件时 , 经典的常规物证检验方法在实际检案中也可以发挥一定的作用 . 本文报导的是用 MN血型检验侦破一起重伤致残案 .     

超滤管在陈旧生物检材中的应用

目的探讨millipore超滤管滤过方法对陈旧生物检材DNA分型检验的应用价值。方法将23份陈旧血样分别剪取同样合适大小的血片3组,标为A、B、C组,磁珠法提取DNA,分别用80μL、80μL、20μL洗脱液洗脱得到模板DNA,其中A、C组模板直接扩增,B组用millipore超滤管滤过浓缩后扩增。PCR产物用AB3130x L基因分析仪检测,Gene Mapper ID V3.2软件进行自动分型。所得实验数据用SPSS软件分析处理。结果 A组没有1例样本扩出全部STR基因座,B组有18例样本扩出全部STR基因座,C组有11个样本扩出全部STR基因座。结论应用millipore超滤管滤过方法可以明显提高陈旧生物检材的DNA分型成功率。     

两例强奸案中特殊生物检材的DNA检验

1案例案例1:某日晚11时许,某村发生一起上门抢劫强奸案。案犯在作案时,先将单身在家的被害人蒙面、捆绑住手脚,抢得财物后,又对被害人实施强奸。案犯离开后,被害人挣脱了绳索,但在报案前用水清洗了自己的大腿及会阴部,并洗涤了擦拭物品及床单。作者接案后,对被害人的阴拭、短裤等检材进行了检验,均未检见精子。后经询问了解,案犯在强奸过程中曾有过吮吸被害人两侧乳头的行为。用湿棉签轻轻擦拭被害人两乳后,采用Chelex法提取该擦拭物及被害人血样,用Profiler Plus进行扩增,ABI3100型测序仪电泳,分型结果(表1)表明:被害人两乳擦拭物中均检…     

铁锹柄分段转移接触性生物检材DNA检验1例

1案例资料 1．1简要案情 2007年11月13日晚，高某（男）被他人打死。尸体上遗留有带血迹的铁锹1把，铁锹头及锹柄下部粘有大量血迹。现场勘查分析，该铁锹应为作案工具。通过分析犯罪分子在作案时未带手套，铁锹柄上可能遗留有其接触性生物检材。     

触摸遗留人体生物检材DNA分型检验2例

1案例资料 1．1案例1 简要案情2007年7月至2008年2月，某市发生系列爆炸案，从现场提取自制导火线、捆绑爆炸装置用的绳结、旧棉花等可能留有犯罪嫌疑人脱落上皮细胞的检材。     

降解生物检材遗传标记检测的研究进展

降解生物检材遗传标记的检测一直是法医学实践和科研的难点。虽然PCR-STR分析技术能在一定程度上检测降解生物检材的遗传标记,但是对于某些高度降解的生物检材如骨骼、牙齿等的PCR-STR分型仍旧十分困难,存在不稳定性和分型异常现象。本文就近几年来PCR-STR分型技术在降解生物检材的法医实践中出现的问题和解决方法作一综述。     

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的 研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法 使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果 生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论 生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。     

从打火机上提取DNA成功分型1例

2009年8月在某市发生一起盗窃保险柜案件，勘查人员在勘查现场时在被撬开的保险柜中发现一支一次性打火机，怀疑是犯罪嫌疑人所留。为明确案情，将打火机送检，并成功对其表面提取的DNA进行了STR分型。