应用酶标D_7E_8单抗Dot-ELISA快速检验人血痕G1m(3)因子

人类免疫球蛋白的亚类因子具有遗传多态性和很好的稳定性，在法医物证检验和遗传学研究中具有重要意义。1983年NeullP和Gerard等人用杂交瘤技术研制出Glm（3）单克隆抗体和相应的检测方法“－”。由于其方法操作繁琐，灵敏度不高，一直未用于法医检案。因Glm（3）因子分布频率好，且人类独有，适合法医亲子鉴定和个体识别。本文作者利用自制的酶标D，E。抗Glm（3）单克隆抗体，建立了D0t－ELISA法检验血．痕Glm（3）方法。该法简便灵敏，快速准确。现报道如下：材料与方法一、试剂与仪器1．自制辣根过氧化物酶标记的D7E8MCAb（HRP…     

SMCY性别特异融合抗原的克隆表达及其抗体制备

目的利用蛋白检测的快速性优势,研究不同性别在SMCY抗原氨基酸序列的差异,筛选出特异性氨基酸序列,并克隆表达性别特异融合抗原,制备相应抗体,建立一种快速鉴别法医物证性别的方法。方法通过对人SMCY和SMCX进行序列分析,发现了三段差异片段,采用搭桥PCR方法获得差异片段全长基因,连接入p ET-28a载体进行原核表达,用Ni柱纯化后的性别特异融合抗原免疫制备多克隆抗体,用ELISA法和western blot检测SMCY多抗与抗原的反应特异性,制作胶体金试纸条检测样本。结果筛选出具有性别特异性的氨基酸序列,获得SMCY性别特异融合抗原,成功制备出多克隆抗体及胶体金试纸条。结论获得SMCY性别特异融合抗原具有很好的抗原活性,制备的多克隆抗体可以与抗原特异性地结合,用于性别鉴定。     

用酶标抗人IgG单克隆抗体直接ELISA法检测微量血痕种属

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)在法医物证检验中已有许多研究和报道。国外不仅用于血痕种属鉴别,而且还应用于血型及器官特异性的检测。笔者采用酶标抗人 IgGMcAb 作直接 ELISA 法鉴别血痕种属.获得满意效果。     

男性个体Amelogenin基因座Y片段缺失1例

在法医物证检案中,男性个体Amelogenin基因座Y片段未检出的案例时有报道。笔者在检案中遇到1例,现报道如下。     

法医门诊实践1025例

笔者于1989年至1994年间,面向社会开办法医门诊工作,收到良好效益。现将6年来记录在案的1025例门诊活体检案实践分析讨论如下: 1 资料分析 1.1 法医门诊检案数及其比例 1989年至1994年,我县法医总检案数(以现存伤情鉴定书,尸检报告及物证化验报告计算)总共1373起(件),其中法医门诊检验1025例;尸体检验157具;物证检验191件(见表1)门诊检案数占法医总检案数的74.7％。     

微量生物检材常规初检后再行PCR检验的方法

在实际检案中，经常遇到案发现场可获取的生物检材量微，在进行必要的种属检验、精斑确证实验、ABO血型检验等常规物证初检后，便无多余的生物检材移送DNA实验室进一步做法医DNA检验。因此，笔者通过对检案中遇到的上述微量物证检材的再行处理利用，在本实验室条件下，对其进行了TH０１、HUMACTBP２、AluVpA、DIS８０等位点的DNA－PCR分析，获得了良好的效果。使其在实际办案中更充分地发挥了证据作用，报告如下。１材料与方法检案中已经种属或ABO血型检验后的血痕、唾液斑（如烟蒂外层纸）浸泡凹板，加入３００μl去离子水，…     

雪地中尿液的DNA检验

尿液样本因为提取难度较大，很少有作为物证检材进行法医鉴定的案例，国内亦未见报道。现报告对雪地中遗留尿液进行法医 DNA鉴定的检案 1例，希望在此基础上建立一套尿液 DNA检验的较成熟的方法。     

抗人Tf及抗人Hb试剂盒的比较

目的研究比较抗人Tf(转铁蛋白)和抗人Hb(血红蛋白)试剂盒的实验方法。方法采用胶体金标记单克隆抗体结合免疫层析技术,对不同稀释度的人血、动物血进行检测,并对保存时间、溶解度等影响因素进行研究。结果抗人Tf和抗人Hb试剂盒同样具有简单、快速、灵敏、稳定、特异性好的优点,但抗人Tf试剂盒能检测出陈旧及难以溶解血痕。结论抗人Tf试剂盒适用于法医物证的血痕种属检验。     

大庆地区汉族人群CSF1PO、TPOX、THO1基因座遗传多态性

本文对大庆地区汉族人群CSF1PO、TPOX、THO1等3个基因座的遗传多态性进行调查,现报道如下:1材料与方法251份血样为大庆市公安局刑事技术支队法医物证检验室日常检案积累。Chelex-100法[1]提取血样样本DNA。Gene-Print(STR Multiplex System CSF1PO-TPOX-THO1试剂盒(Promega公司     

关于兔抗人血清常规制备方法的改进

目前在法医物证检验中,应用动物的抗人血清做沉淀试验来鉴别人血与兽血仍是一种常用的方法。以往,我们免疫抗人血清常用的是较大剂量凝固血清免疫的方法或用新鲜人血清免疫的方法,所获得的抗体血清效价一般为10000～20000倍,并且非特异性较强,免疫过程中,易出现过敏死亡现象。我们经过反复试验,改进了免疫程、抗原量以及免疫动物的选择,制备出了     

NaCl溶液浓度对抗人P30胶体金检测试纸条试验的影响

抗人P30胶体金检测试纸条（简称试纸条）具有简单、快速、准确、灵敏、高度特异性及便于携带等优点，在法医实际检案中应用广泛。作者在实际检案中发现用不同浓度的NaCl溶液浸泡检材，对抗人P30胶体金检测试纸条结果有一定的影响，并针对此进行了实验观察，现将结果报告如下。     

FXⅢA凝血因子蛋白与核酸水平遗传多态性研究

FXⅢA可在蛋白水平上应用于法医物证检验[1,2],它的A亚基基因座作为一个STR位点相当普遍地应用于DNA水平的法医物证检验中,是法医学中的一个特例。为此,我们首次对北京汉族人群的FXⅢA,从蛋白水平和DNA水平分别研究其遗传多态性,并获得了群体遗传学数据。1材料与方法1.1实验材料1.1.1样本无关个体血样采自北京地区无血缘关系的献血员。1.1.2主要仪器与试剂1.1.2.1蛋白水平MultiphorⅡ型多功能电泳系统(LKB);Pharma-lyte pH3.5～10,pH5～7(Pharmacia);一抗为兔抗人FXⅢA血清(DAKO),二抗为辣根过氧化酶标记的羊抗兔IgG(华美生物…     

极微量检材的 MN血型检验1例

微量物证检验是法医工作经常遇到的一个问题 , 而极微量物证检材的检验又是某些重大疑难案例的难点 , 尤其当检材失去了分子水平检验的条件时 , 经典的常规物证检验方法在实际检案中也可以发挥一定的作用 . 本文报导的是用 MN血型检验侦破一起重伤致残案 .     

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《中国法医学杂志》是中国法医学会主办、国内外公开发行的法医学学术性期刊。主要发表国内法医损伤病理学、法医血清学、法医毒物分析、法医人类学、法医物证检验、法医临床学等分支学科的新进展、新观点、新技术和新成就 ;报道法医学检案经验和首例或罕见的典型案例 ;开办学术讲座和登载教学实践 ,心得、体会。本刊宗旨是 ,为我国法医学工作者提供学术讨论、经验交流、业务学习和互通信息的园地 ,为国际学术交流开辟窗口 ,以提高我国法医学检案、教学和科研的水平 ,发展法医科学、振兴中国法医学事业服务。1　栏目及稿件要求本刊设有论著…     

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<正> 《中国法医学杂志》是中国法医学会主办、国内外公开发行的法医学学术性期刊。主要发表国内法医损伤病理学、法医血清学、法医毒物分析、法医人类学、法医物证检验、法医临床学等分支学科的新进展、新观点、新技术和新成就;报道法医学检案经验和首例或罕见的典型案例;开办学术讲     

微滴式数字PCR技术用于生物样品种属鉴定和绝对定量

目的 运用微滴式数字PCR技术进行生物样品的种属鉴定和绝对定量.方法 选择人mtDNA两个编码基因ND4和16S rRNA,设计特异性引物与探针,用人来源及常见动物样本验证种属特异性,再用重组质粒和2组共16份人来源生物检材,倍比稀释.使用微滴式数字PCR技术进行种属检验和绝对定量,验证其灵敏度和稳定性.结果 人重组质粒FAM （ND4）可进行人来源样品的检测,其检测结果与各级稀释梯度基本吻合,微滴式数字PCR技术可以检测出反应体系中低至单拷贝的DNA.结论 微滴式数字PCR技术可以进行生物样品的种属鉴定和绝对定量,并具有很高的灵敏度和特异性,可应用于日常法医物证检验.     

检验人精浆特异蛋白P30免疫胶体金试剂条的研制

目的制备用于检验人精浆特异蛋白P30-主要是来自法医学案件的免疫胶体金层析试剂条.方法选取针对不同抗原决定簇的抗P30单克隆抗体细胞株,并制备其小鼠腹水,分离纯化单克隆抗体.制备胶体金并以纯化抗体包被,制成免疫胶体金,以免疫胶体金浸泡玻璃纤维.选取适宜的硝酸纤维素膜并于其上不同位置以未金标的另一株P30单克隆抗体和羊抗鼠IgG包被.搭建试剂条并检测其灵敏度和特异性.结果所制成的试剂条灵敏度至少可达4ng/ml;对6人份混合的人精液物质在稀释20万倍后仍出阳性结果,且无非特异性反应.结论检验人精浆特异蛋白P30的免疫胶体金试剂条可对嫌疑人精物质做出排查,有利于法医物证检验.     

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混合精斑DNA三种提取方法的比较

在法医物证学上,对于混合斑检材,一般采用Chelex法[1,2]抽提DNA,由于得率和纯度较低,检测存在失败的可能。为了提高成功率,作者对检案过程中抽提DNA的步骤进行了优化,现报道如下。1材料与方法1.1检验材料1号检材为卫生巾,2号检材为卫生纸,3、4号检材均为蓝色内裤,其中3号检材较脏且混有血痕。分别剪取1～4号检材微量,涂片经伊红美兰染色,镜检,1、2、4号检材均检见人精子,3号检材检见大量上皮细胞及少量人精子。1.2仪器与试剂梯度PCR仪(德国,Eppendorf);DYY-Ⅲ-4型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂);人STR六个双基因座复合扩增银染试剂…     

应用ELISA检测人IgG进行血痕种属鉴别的研究——酶联免疫在物证检验中的应用研究之一

本文应用 ELISA-双抗体夹心法,通过检出血中的人 IgG 鉴定人血痕。双抗体夹心法是常用来检测抗原的一种方法,但在法医学上用于测定血痕种属尚少报道。我们建立的这种方法,新鲜人血痕的阳性结果可测到64万倍。保存三年的陈旧血痕仍可测出。马、牛、羊、狗、猪、鸡、鸭、鸽、兔、驴、骡和鹌鹑均为阴性。由于本法灵敏度高、特异性好、试剂易得,勿须贵重仪器,在物证检验中便于推广。