口蹄疫A型细胞组织培养弱毒疫苗、细胞组织培养兔体反应弱毒疫苗的研究——1970、1971及前几年的工作总结

口蹄疫A型细胞组织培养弱毒疫苗及细胞组织兔体反应弱毒疫苗从1969年元月至1972年元月,先后在陕西省凤县、洛南、永寿,青海省西宁市(西宁奶牛场及某部队奶牛场),甘肃省成县,黑龙江省呼伦贝尔盟等地做过不同目的试验。在各级革命委员会和革命领导小组的正     

口蹄疫A型细胞组织培养弱毒疫苗、细胞组织培养兔体反应弱毒疫苗的研究——对黄牛安全及效力试验

A型细胞组织培养弱毒(即APK弱毒株),在培育过程中,曾先后多次用猪作过安全和免疫试验;根据注射同批苗对乳猪的试验(13日龄哺乳猪),接种2.0毫升,其中2头各三蹄出现水泡,观察14天,没有发现死亡。将细胞毒通过乳兔造苗(含毒10％)接种带仔母猪,剂量为6.0毫升,在观察14天中,鼻镜、上唇、四蹄、乳房均无反应。对50～60天的     

口蹄疫A型细胞组织培养弱毒疫苗,细胞组织培养兔体反应弱毒疫苗的研究——对黄牛安全、效力和对纯种奶牛安全试验

(一)疫苗制造:用细胞组织培养弱毒(即APK弱毒)60代制苗,病毒滴度10~(-6.5),含病毒50％,甘油40％,汉克氏液及1％硫柳汞10％,pH=7.6～7.8,疫苗经无菌检查合格(厌气肝汤、普通肉汤、琼脂斜面培养5天无细菌生长),疫苗注射成年小白鼠(皮下接种0.3毫升,腹腔接种0.3毫升各3只),成年家兔2只皮下接种3.0毫升,观察7天,均无死亡为合格。注射剂量为成年黄牛臀部肌肉注射2.0毫升,1～2岁犊牛臀部肌肉注射1.0毫升。     

口蹄疫A型鸡胚弱毒的研究——A_Ⅳ系弱毒兔体反应毒灭能疫苗安全效力及区域试验

遵照农业部的指示,在毛泽东思想伟大红旗的光辉照耀下,在无产阶级文化大革命的推动下已顺利完成了AⅣ系弱毒兔体反应灭能苗的试制和安全效力,区域试验工作。现将试验结果报告于后。     

口蹄疫A型兔化弱毒冻干试验

冻干方法已广泛地应用于菌(毒)种和菌(疫)苗的生产实践。近年来随着兽医科学研究事业的发展,口蹄疫各个品系的强毒株和弱毒株不断增加,为了使用冻干方法保存口蹄疫病毒和弱毒毒株,我们初步探索几种常用冻干赋形剂对口蹄疫A型兔化弱毒冻干性能的测定。由于某些条件限制,只进行了两次试验。     

口蹄疫A型兔化弱毒培育试验总结

1959年在总线路、大跃进、人民公社三面红旗的光辉照耀下,遵照伟大领袖毛主席:“鼓足干劲,力争上游,多快好省地建设社会主义”,“中国应当对于人类有较大的贡献”的教导,在试制兔组织适应毒氢氧化铝甲醛疫苗的同时,利用A型兔组织适应毒进行了A型兔化弱毒培育的研究;在培育过程中,遵照毛主席的教导:“外因是变化的条件,内因是变化的根据,外因通过内因而起作用”,吸取其他弱毒培育的经验,逐渐提高乳兔日龄,促其定向变异,以期获得一株安全有效的弱毒疫苗。     

猪水泡病与口蹄疫A型联合弱毒疫苗的研究

猪口蹄疫和水泡病在某些地区同时流行,影响生猪生产和出口援外。为了研究解决预防这两种病的联合疫苗,我们用我所培育的口蹄疫A型鸡胚弱毒和水泡病上海龙华系鼠化弱毒作成联合疫苗,进行了初步试验。现将结果报告于下。 甲、安全效力试验 一、试验材料 (一)疫苗: 1.口蹄疫A型疫苗:用我所培育的A型鸡胚化弱毒104和107代,制成含毒10％、含     

猪口蹄疫灭能苗的研究——1972年工作总结

选育毒力强、毒价高、抗原性好的毒株,我们还是第一次,无一点经验。毛主席教导我们:“我们看事情必须要看它的实质,而把它的现象只看作入门的向导,一进了门就要抓住它的实质,这才是可靠的科学的分析方法”。猪口蹄疫病毒的本质具有的现象是什么?我们设想毒力的强弱是一个与病毒本质有关的现象,而毒力这一现象,可以通过流行病学和病理学的现象表现出来。这就是我们选育制苗毒株的指导思想。应用这一指导思想,我们同广     

口蹄疫A型鸡胚弱毒的研究——A_V系直线系弱毒对牛、猪的安全、效力试验

为了改进AN系弱毒对牛、猪的安全性,在继续改进AⅣ系弱毒和进行灭能苗的同时,开展了Av弱毒的培育。 用AⅣ系155代鸡胚毒改为静脉接种12日龄的鸡胚,已传至131代。兹将有关传代及对牛、猪的安全、效力试验等情况报告如下:     

猪瘟兔化弱毒牛肾细胞疫苗的研究——疫苗试制、检验、保存及区域试验

自1981年初开展猪瘟兔化弱毒牛肾细胞疫苗的研究以来,先后完成了一系列基础实验。在1983年试制第1批牛肾细胞苗的基础上,又重复试生产6批苗,经效检,均合乎标准。现将疫苗试制、检验、保存及区域试验结果报告如后。材料与方法(一)种毒 系农业部成都药械厂提供的480代冻干毒和F505代兔脾毒(湿毒),经本室复壮,选择定型热兔脾脏作为种毒,要求毒价不低于2×10~(-5)ID/ml。也可选用5万倍合格的细胞毒做种毒,脾毒和细胞毒以新鲜者为佳。     

O、A两型口蹄疫弱毒疫苗单独、混合或分别不同部位同时注射的安全性试验

鉴于生产防疫的需要,在没有双价疫苗的情况下,就现行生产的口蹄疫弱毒疫苗可否同时注射,故进行此试验。 一、疫苗制造: (一)O型疫苗:用OMⅡF_(129)制成含毒量为10％甘油苗(6604批),毒价为LD_(50)=7.75。     

口蹄疫A型鸡胚弱毒的研究——A_Ⅳ系弱毒对牛、猪的安全、效力、最小免疫剂量的测定

前次实验告报说明,该系弱毒的毒力已基本稳定,对牛和猪安全而且免疫原性也令人满意,但试验数据较另星,不足以说明问题,所以又重复进行了安全、效力和免疫持续期以及最小免疫剂量的测定,现将试验情况报告如下:     

口蹄疫O型弱毒疫苗毒价(病毒滴度)与免疫关系试验

本试验之目的在于明确疫苗的毒价与产生免疫之关系。当大量生产疫苗时毒价达到多少才能出厂(合格),既降低成本又能安全有免疫力,所以做此初步试验。 一、疫苗(为本所实验室制造): (一)6501批氢氧化铝苗:1965年9月14日制造,保存近8个月。含10％OMⅡF_(131)R_1毒。注射前对乳鼠毒价为:10~(-4)～4/4;10~(-5)～2/4;10~(-6)～0/4;10~(-7)～0/4,最小致死量为10~(-5.5)。     

口蹄疫单层细胞组织培养疫苗的研究——组织细胞苗及组织细胞兔体反应苗(对仔猪)

(一)口蹄疫A型组织细胞苗及组织细胞毒兔体反应苗对50～60日龄杂种断奶仔猪的安全效力试验。 (二)口蹄疫A型组织细胞苗及组织细毒兔体反应苗对10～13日龄杂种哺乳猪的安全试验。 (三)口蹄疫A型组织细胞苗及组织细胞毒兔体反应苗对50～60日龄纯种断奶仔猪的安全效力试验。     

口蹄疫毒型鉴定的补体结合反应试验

一、反应要素: 1.溶血素:生药厂出品; 2.补体:新鲜健康公海猪血清; 3.红血球:2％公绵羊红血球悬液; 4.血清:口蹄疫O、A、C、ZB型高免海猪血清, 5.抗原:病畜水泡皮毒。     

猪瘟兔化弱毒疫苗RT-LAMP检测方法的建立

根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)野毒株、猪瘟兔化弱毒疫苗(HCLV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的NS5B基因序列,利用在线软件Pri mer Explorer V4Software,设计了一套环介导逆转录等温核酸扩增(RT-LAMP)引物,建立了特异性检测HCLV的RT-LAMP方法。在BstDNA聚合酶作用下,65℃恒温反应1h即可完成扩增过程,扩增产物可通过20g/L琼脂糖凝胶电泳或加入SYBR GreenⅠ染料进行分析。经检测,该方法对于CSFV、BVDV以及其他猪源病毒无特异性扩增,具有良好的HCLV特异性;其灵敏度与本实验室建立的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测结果一致,均达到5个拷贝。分别用这两种方法对58份市售猪瘟弱毒疫苗进行检测,结果符合率达100%。表明,建立的HCLV RT-LAMP技术可以应用于基层实验室或养殖场,便于养殖户对疫苗中的弱毒含量进行监测。     

牛、羊接种口蹄疫O、A型弱毒甘油苗后的血清保护抗体测定试验

全国各地根据需要逐渐开展口蹄疫O、A两型弱毒疫苗的共同注射,以节省时间与力量,为群众所欢迎。但接种后牛、羊产生抗体如何,国内资料甚少。农业部兰州兽医药品厂对用于生产血清的牛只进行了O、A两型口蹄疫预防注射,我所亦对在徐家坪饲养的健康黄牛、绵羊、山羊进行了O、A两型疫苗的预防注射,于注射后不同时间采血分离血清作乳鼠的血     

各种血清牛、奶牛、羊接种口蹄疫O、A型弱毒甘油苗后的血清保护试验

全国各地根据需要逐渐开展口蹄疫O、A两型弱毒疫苗的共同注射,节省时间与劳力,为群众所欢迎,但对牛接种后产生抗体如何,未能选定适当条件进行测定。由于农业部兰州兽医药品厂用于生产血清的牛只每隔3～4个月进行一次口蹄疫疫苗预防注射,同时经常进行采血制造血清,便于获得试验血清,故选定该厂牛只进行血清保护试验,测定中和抗体指数。     

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。     

鸡毒霉形体弱毒疫苗的研究——鸡毒霉形体弱毒F株免疫效力测定

以点眼的方法,用鸡毒霉形体F株的培养物对1、3和20日龄鸡进行了免疫接种试验,经过致病性株R株的攻击,根据气囊损伤保护率计算,免疫接种鸡可获得85％以上的保护,在攻击后14天内,免疫接种鸡比对照鸡体重增加明显。免疫力持续至少7个半月以上。F株的冻干培养物仍保持着良好的免疫作用。试验结果表明:鸡毒霉形体F株是个优良的疫苗株,可用于生产鸡毒霉形体活疫苗。