聚合酶链技术在莱姆病蜱传播途径研究中的应用

采用聚合酶链技术（ＰＣＲ）对采自甘肃省肃南县皇城区的草原革蜱进行了伯氏疏螺旋体传播途径的研究。结果，从３６组草原革蜱的成蜱标本中检测到９组阳性，阳性率为２５．０％；从３２组幼蜱中检测到７组阳性，阳性率为２１．９％；从８组蜱卵中检测到２组阳性，阳性率为２５．０％；还从蜱叮咬的１４份羊皮肤红斑组织中检测到６份阳性，阳性率为４２．８％，从而证明草原革蜱是该地区莱姆病的传播媒介，既可水平传播，也可垂直传播     

陇东南地区森林革蜱成虫季节动态调查

多年来，在甘肃省陇东南地区马类家畜中流行以高热、贫血和黄疸为主要特征的疫病，已查明其病原为驽巴贝虫（Ｂａｂｅｓｉａｃａｂａｌｉ），该病原的传播媒介是森林革蜱和草原革蜱。为了给防治工作提供可资借鉴的依据，我们从１９９６年开始，连续３ａ对当地的优势蜱种森...     

甘肃省媒介硬蜱的种类与地理分布

采用布旗法与家畜体表捕捉法 ,在甘肃省 6个不同地理区划内的部分县、市、区采集硬蜱标本 ,共发现了 2 0种硬蜱 :河西走廊有草原革蜱 (Dermacentornuttalli)、银盾革蜱 (D .niveus)、亚洲璃眼蜱 (Hyalommaasiaticumasiaticum)、麻点璃眼蜱 (H .rufipes)、小亚璃眼蜱 (H .anatolicum )、亚东璃眼蜱 (H .asiaticum ) ;河西走廊南山地有草原革蜱、嗜驼璃眼蜱 (H .dromedarri)、小亚璃眼蜱、亚东璃眼蜱 ;河西荒漠高原有草原革蜱和残缘璃眼蜱 (H .detritum ) ;中部黄土高原有草原革蜱、森林革蜱 (D .silvarum )、日本血蜱 (H .japonica)、长角血蜱 (H .longicornis)、青海血蜱 (H .ginghaiensis)、卵形硬蜱 (Ixodesovatus) ;陇南山地有草原革蜱、长角血蜱、刻点血蜱 (H .puncta ta)、卵形硬蜱、全沟硬蜱 (I .persulcatus)、血红扇头蜱 (Rhipicephalussanguineus)、微小牛蜱(Boophilusmicroplus) ;甘南山地山原地区有草原革蜱、草原硬蜱 (I .crenulatus)、全沟硬蜱、钝跗硬蜱 (I .pomerantzevi)、青海血蜱、草原血蜱 (H .verticalis)。草原革蜱分布于甘肃省 6个地理区划 ,其他 19种硬蜱的分布具有明显的地理特征     

马焦虫病传播者草原革蜱生物防治的研究——蜱经钴~(60)处理后对马体的不育效果及其安全性试验

草原革蜱经钴~(60)辐射后,在兔体进行试验(1981～1982年),证实其有效不育剂量为3000仑琴,其虫卵不育率可达100％。在上述工作的基础上将经钴~(60)(3000仑琴)处理后的草原革蜱雄虫,放置马体来观察虫体的不育效果及对马体的安全性(草原革蜱是经卵传递病原的,观察有否传播病的能力)。     

草原革蜱和森林革蜱形态结构与分子标记的比较

为了比较草原革蜱(采自内蒙古呼伦贝尔)和森林革蜱(采自宁夏固原)的形态结构与分子标记异同点,借助体视显微镜超景深系统观察了这2种蜱的形态结构;通过分子生物学技术,测定了这2种蜱COX1、ITS2及16S rDNA基因序列,并通过比对这3种基因的同源性、构建系统发生树,分析了这2种蜱的分子标记差异。结果显示,这2种蜱均具有珐琅斑,须肢粗短,缘垛整齐等革蜱属的典型特征。草原革蜱珐琅彩浓厚且色浅呈银白色,刻点小且分布均匀、夹杂少数大刻点,背突直而短,缘垛分布均匀;森林革蜱珐琅彩覆盖大部分盾板且色深呈深褐色,刻点粗细混杂、分布较为稠密,背突向背方弯曲,尾部缘垛较其他缘垛窄;两者具有显著的形态学差异。草原革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知草原革蜱基因序列的相似度分别为99.88%、99.90%、97.58%;森林革蜱COX1、ITS2、16S rDNA基因序列与GenBank中已知森林革蜱基因序列的相似度分别为98.64%、98.60%、99.53%。进一步对比这2种蜱的COX1、ITS2、16S rDNA基因序列,发现其相似度分别为99.76%、99.75%、98.29%。结果提示:虽然草原革蜱和森林革蜱形态学差异显著,但COX1、ITS2、16S rDNA基因序列相似度极高,两者可能为同一种的不同亚种或COX1、ITS2、16S rDNA基因不适用于革蜱属的种间鉴定。     

绵山羊边虫病的研究——绵羊边虫的蜱传播试验

通过蜱的传播试验,首次确定了我国西北广大养羊区有3种硬蜱是绵羊边虫的媒介蜱。甘肃省和宁夏回族自治区绵羊边虫的传播媒介均为草原革蜱,内蒙西部地区绵羊边虫的传播媒介为亚东璃眼蜱和短小扇头蜱。试验证明,上述3种媒介蜱对绵羊边虫都不能经卵传递,也不产生发育阶段性传播,唯一的传播方式为蜱成虫间歇性吸血传播。     

森林革蜱寄生于刺猬体表报道

森林革蜱寄生于刺猬体表报道杨芷云，王宗仪，金东航（河北农业大学保定０７１００１）１９９４年４月３０日在保定市某家属院发现一只体重约４５０ｇ的刺猖，其体表有２２只硬蟀寄生。刺猬表现高度贫血、消瘦，检查后不久死亡。收集的蜱经鉴定，确定为森林革蜱（Ｄｅｒｍ...     

森林革蜱与草原革蜱的超微形态学比较

借助光镜和扫描电镜观察了森林革蜱(Dermacentor silvarum)和草原革蜱(D.nuttalli)的形态特征,这两种形态近似的革蜱除了个体大小、盾板珐琅质颜色以外,在须肢第2节齿突形状、口下板齿型、雌蜱孔区、气门板形状、中垛的宽窄、第4对足胫节后的齿突及外距的长短等方面具有明显的差异.     

烟碱对硬蜱的杀灭效力试验

测定了烟碱对草原革蜱、日本血蜱、青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱 5种硬蜱的LD50 及毒效 ,结果 :对若虫的LD50 为 1.14～ 1.75 μg/虫 ,对成虫的LD50 为 45 .3 7～ 5 7.46μg/虫。 5 0 g/L烟碱醇溶液 5mL/m3 气雾熏蒸 ,青海血蜱与日本血蜱若虫 48h死亡率为 10 0 % ,成虫 72h死亡率为 10 0 % ,草原革蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱若虫 72h死亡率为90 .0 %～ 94.3 % ,成虫 72h死亡率为 72 .1%～ 82 .3 %。表明烟碱对硬蜱具有良好的杀灭作用 ,可作为环保型灭蜱药物的生物资源加以开发、利用     

四种硬蜱部分结构的扫描电镜观察

本文对残缘璃眼蜱(Hyalomma detritum)、亚东璃眼蜱(H.asiaticum)、草原革蜱(Dermacentor nuttalli)、森林革蜱(D.silvarum)成虫的多孔区、哈氏器、气门板在扫描电镜下的超微结构进行了详细描述和比较。这4种硬蜱多孔区的刚毛的数目、分布位置存在着种或属间的差异:残缘璃眼蜱刚毛数目为3根,亚东璃眼蜱为2根,两种革蜱均为1根,且同一蜱左右孔区的刚毛分布基本对称。进一步证实了硬蜱哈氏器的分类学意义,并补充了亚东璃眼蜱的哈氏器结构。4种硬蜱气门板的构造大体相似。观察结果表明,硬蜱多孔区的超微结构可能同样具有分类学特征,可做为种类鉴定的参考根据之一。     

森林革蜱Septin-2的原核表达及其免疫分析

为了了解森林革蜱Septin-2基因的结构、表达特征及生物学功能,通过对Septin-2基因进行克隆、原核表达及生物信息学分析,利用RT-qPCR方法检测该基因在森林革蜱不同发育时期以及不同组织间的表达丰度。结果显示,本实验室培养的森林革蜱庆阳株Septin-2基因中最大编码区为1 281 bp,可编码大小为426 aa的蛋白,主要功能区基因大小为868 bp,与森林革蜱陕西株（KAH7952853,XP＿037569269）的同一性最高,高达100%;森林革蜱Septin-2在卵巢中的表达丰度最高,且蜱饱血后的表达量明显高于饥饿状态的蜱,Septin-2基因能够表达37 ku的重组蛋白,并能被家兔抗森林革蜱血清识别。上述研究表明,Septin-2基因在蜱饱血及卵巢的发育过程中均表达。     

九种硬蜱成虫哈氏器的电镜扫描

用扫描电镜观察了分别属于扇头蜱属、牛蜱属、血蜱属、革蜱属和璃眼蜱属的镰形扇头蜱(Rhipicephalus haemaphysaloides)、微小牛蜱(Boo-philus microplus)、西藏血蜱(Haemaphysalis tibetensis)、微形血蜱(H.wellingtoni)、青海血蜱(H.qinghaiensis)、草原革蜱(Dermace-ntor nuttalli)、银盾革蜱(D.niveus)、麻点璃眼蜱(Hyalomma ruf-ipes)、亚东璃眼蜱(H.asiaticum)等9种硬蜱成虫的哈氏器。在这5个属间,哈氏器在囊孔形状、前窝的形状和深浅、感毛的数目、孔毛的位置和形状及长短、锥毛的位置、基盘的数目、远端毛的数目和位置上存在着区别。在同一属内,哈氏器结构也存在着区别。西藏血蜱、微形血蜱、青海血蜱的哈氏器在前窝形状、孔毛的长短和形状以及位置、锥毛的位置、远端毛的位置和数目上存在着区别。草原革蜱和银盾革蜱的哈氏器在前窝形状和深浅上存在着区别。麻点璃眼蜱和亚东璃眼蜱的哈氏器在锥毛的位置上存在着区别。     

甘肃省宁县两种羊巴贝斯虫的传递试验

将采自甘肃省宁县湘乐镇柏树底村自然感染绵羊的含虫血，用液氮保藏，带回实验室后解冻，经颈部皮下以５０ｍＬ分别接种未除脾绵羊１只，除脾山羊１只。用采自疫区羊体的半饱血若虫和成虫（后经鉴定系森林革蜱和长角血蜱）、饱血若虫（在实验室蜕化为成虫，系长角血蜱）、森林革蜱次代幼虫，各自分别叮咬感染１只未除脾绵羊。结果含虫血接种的绵羊和山羊均被感染，在血液涂片中观察到了两种巴贝斯虫，一种是大型的巴贝斯虫未定种，另一种是小型的绵羊巴贝斯虫，潜伏期为９～１１ｄ。蜱叮咬的羊只均未感染成功。     

甘肃迭部山羊体外寄生蜱的调查

甘肃迭部山羊体外寄生蜱的调查石淑珍，刘增加，杨银书，张健，王大虎（兰州军区军事医学研究所７３００２０）１９９３年春夏期间，作者在参加甘肃迭部地区自然疫源性疾病研究的同时，对该地山羊寄生蜱作了调查，兹将结果报告如下。（一）方法对灌丛草原和森林草原的羊群...     

张家川县绵羊血液原虫病的调查与防治

对甘肃省张家川县绵羊蜱媒血液原虫病进行了流行病学调查。结果发现 ,绵羊体表寄生蜱类 5种 ,即青海血蜱 (Haemaphysalisqinghaiensis)、长角血蜱 (H .longicornis)、革蜱 (Dermacentorspp .)、草原革蜱 (D .nuttalli)和微小牛蜱 (Boophilusmicroplus) ,其中青海血蜱为传播媒介优势种。绵羊泰勒虫 (Theileriaovis)感染率为 6 2 .2 % ,无形体 (Anaplasmaovis)感染率为 16 .7% ,且有双重感染的病例。体表喷洒药物灭蜱试验表明 ,5 0mg/L倍特对蜱类的半数致死时间 (LT50 )为 4 .91h ,用药后 3d体表残留活蜱数为 3.4± 2 .2只 ,14d后再次染蜱数为 4 9.7± 12 .0只 ,羊只血液原虫病感染率由38.1%降至 8.8% (P <0 .0 1) ,红细胞染虫率由 11.6 %± 6 .9%降至 5 .4 %± 2 .1% (P >0 .0 1)。     

甘肃省羊泰勒虫病的调查及分布特征研究

利用病原检查、蜱感染试验和除脾激发试验相结合的方法，在甘肃省１３个地区（州、市）４５个县对２１６８只绵羊和山羊的泰勒虫病进行了调查。结果表明，甘肃省酒泉、张掖、金昌、武威、兰州、定西、天水、陇南、临夏、甘南、庆阳和平凉１２个地区３５个县均有羊泰勒虫病的分布，其传播媒介为青海血蜱，它主要孳生于阴湿灌丛草原，具有代表性的陇南和天水两地区羊泰勒虫的感染率高达４７．０％～８６．６％。     

祁连山北麓铧尖地区莱姆病自然疫源地调查研究

在调查、访问和体检的350人中,发现莱姆病典型患者13例; 检查人血清279人份,检出抗体阳性率11.11％;检查牦牛血清99头份,检 出抗体阳性率70.71%;调查动物及鸟类80余种,其中以旱獭、野兔和鼠 类占居优势;调查吸血昆虫五类,其中以蜱和虻类占居优势;景观为山地,其中以干旱草原、草甸草原、灌丛草原和森林草原四类生境为主;从四类生境采集不同类型样本108组作了接种培养,仅从森林革蜱(Dermacentor silvarum)体内分离出伯氏螺旋体。基于上述,该地存在莱姆病自然疫源地。     

对琼扩阴性酶联免疫试验阳性自然感染传贫马的病理形态学观察

对琼扩阴性酶联免疫试验阳性自然感染传贫马的病理形态学观察曲连东，尹训南，蔡红，张宝山，戴玉坤戴素敏，哈萨（中国农业科学院哈尔滨兽医究研所１５０００１）（内蒙古呼伦贝尔盟兽医站）王立波，郭振梅，郭庆华佟福来（内蒙古牙克石市兽医站）（牙克石市图里河镇兽医...     

血红扇头蜱卵黄原蛋白基因的克隆及生物学特性分析

为研究卵黄原蛋白(Vg)基因对蜱虫卵的生理机制作用,参考GenBank中微小扇头蜱(登录号:EU086096)卵黄原蛋白基因的核苷酸序列,设计特异性引物,PCR扩增血红扇头蜱相关基因,将其克隆至pGEM-T Easy载体,并测序。对获得的阳性克隆进行序列分析,选取Vg基因的VWFD功能区设计表达引物,构建重组表达载体pGEX-4T-1-Vg,并进行表达纯化。用Western-blot鉴定表达产物的免疫原性。结果显示,获得的1 218bp的核苷酸序列片段与预期结果一致。系统发生树显示,血红扇头蜱与微小扇头蜱具有较高的同源性,两者之间的同源性高达93%,其次与变异革蜱、希伯来花蜱、肩突硬蜱的同源性分别为85%、78%、62%。序列分析显示,该基因含有1个由221个氨基酸组成的VWFD功能区。该功能区重组融合蛋白的分子质量约为51ku。Western-blot分析表明,该重组蛋白与家兔抗血红扇头蜱全蜱阳性血清、家兔抗长角血蜱全蜱阳性血清、家兔抗残缘璃眼蜱全蜱阳性血清以及家兔抗草原革蜱全蜱阳性血清均出现不同程度的反应活性。结果表明,经表达Vg基因VWFD区域而制备的重组抗原对于不同蜱种血清具有广谱性。     

蜱细胞培养技术

蜱细胞培养技术郭中敏，玛丽亚木，努素甫·艾力，谭立新（指导老师：郭固）（新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐８３００００）蜱细胞培养是一相当年轻的组织培养技术。Ｗｅｙｅｒ（１９５２）首次报道了关于培养散状扇头蜱组织的结果，但真正蜱细胞培养研究的报告是由Ｒ...