检材量对硅珠法提取脱落细胞DNA的影响

犯罪嫌疑人遗留在犯罪现场的帽子、口罩、衣服、手套、运动鞋、袜子等含有机体脱落细胞,在实验室逐渐成为常规检材。由于这类检材含有的脱落细胞少,散在分布,给检验带来了一定的困难。本文通过增加取材量和在15mL离心管中消化后用硅珠法纯化DNA,能显著提高检验成功率。1材料与方法1.1检材本实验室日常受理的案件检材54例,其中帽子5例,口罩5例,衣服10例,手套20例,运动鞋10例,袜子4例以及对应的犯罪嫌疑人血样。     

DNA检验技术在一例强奸案件中的应用

受害人王某报案称某日晚23时30分许喝了很多酒到海洋浴室洗澡,后在包厢休息朦胧中被人强奸。经辨认该浴室保安倪某有重大作案嫌疑,但倪某拒不供认。技术人员提取受害人王某阴道擦试物、案发时受害人王某所穿短裤、受害人王某的血样、犯罪嫌疑人倪某的生殖器(龟头)拭子及其血样要求做DNA检验。现场提取检材(上述5份)依次编为1、2、3、4、5号。经初步筛检:1、2号检材PSA (-),精子未检见。其余3份检材检验结构见表1。表1案例检材检验结果检材D3S1358 vWA FGA Amel D8S11793号16/1614/1524/24 X/X 13/154号16/1614/1524/24 X/X 13/155号…     

混合血样品检测的克隆测序法研究

<正> 在法医生物物证检验的DNA分析中,经常会遇到多个个体的混合血样的检测,如受害人与犯罪嫌疑人的混合血,受害人阴道上皮细胞与犯罪嫌疑人精子细胞或男性上皮细胞的混合斑等。对这类检材     

限制性组合分析法推定男女混合斑中个体分型初探

正混合斑是指包含两名或两名以上个体的混合生物检材,在多数情况下,此类检材的DNA分型往往表现为两人或多人的混合分型,使结果分析较为复杂[1]。本文尝试采用2005年国际法医遗传学会(ISFG)推荐的关于混合斑结果分析中的计算方法对混合斑案件中单一个体DNA分型结果进行分析。1材料与方法1.1样本及检验样本由公安部物证鉴定中心提供强奸案件中床单上混合斑检材1份,为日常检案积累,根据案情调查证实该检材系混合斑。DNA检验采用Chelex法提取上述检材DNA,经DNATyperTM15 plus试剂盒扩增后在ABI 3130遗     

利用Y-STR检验直接侦破强奸杀人案1例

1案例资料易某某(女,8岁半),2006年1月27日失踪。3天后被人发现死于该村一废旧房屋内,死者下身赤裸,阴道口扩张,且多处撕裂,阴道口及臀部有大量分泌物,案件性质确定为强奸杀人。提取死者的阴道擦拭物等生物检材和排查出的12名重点犯罪嫌疑人血样,进行DNA检验。经检验从死者阴道擦拭物中检出精斑,但精斑与送检12名重点犯罪嫌疑人的基因型均不一致。进一步行Y-STR检验,结果12位犯罪嫌疑人与精斑的Y-STR基因型仍不一致,12名犯罪嫌疑人连同他们同一父系的所有男性个体均被排除。在进行更大范围的摸排后,再次送检16个父系个体的血样,进行Y-…     

接触DNA在侦查实践中的应用

随着DNA提取和检验技术的进步与不断发展,犯罪现场遗留的DNA对于刑事犯罪侦查中犯罪嫌疑人的确定有着举足轻重的作用,但同时犯罪嫌疑人的反侦察意识越来越强,在作案过程中以及实施犯罪行为后遗留在现场的物证微乎其微。因此在对现场物证进行采集的过程中,接触性生物物证的发现、提取和DNA检出越来越重要。目前在犯罪现场中接触性检材所占的比例越来越大,对于案件的侦破也发挥着越来越大的作用。然而这些接触性检材一般极其微量、体积小、较为隐蔽、肉眼不易观察,且现场的各种污染大大加快了这种微量检材的降解速率,因此对于这类检材的检验和分析就成了法医物证检验工作的重点和难点。本文综述了接触DNA的种类、采集和提取方法,影响其检出的因素以及检验中遇到的问题,以期能更好地将其运用到法医学鉴定实践中。     

微量生物检材DNA检验的研究

在日常检案中经常遇到微量的生物检材 ,由于重视不够 ,提取不当 ,检验效果不甚理想。为了充分发挥微量生物检材的作用 ,更好的为侦察破案服务 ,笔者对部分微量生物检材进行了PCR STR检验研究 ,并取得了一定效果。现报道如下 :1　方法和结果实验样品　均由非本实验室的志愿者提供 ,一次性牙刷 10个 ,日常用牙刷 4个 ,头皮屑 2人分 ,一次性纸杯 10个 ,面部擦拭斑迹 5份 ,梳子 2把。另取杀人案件现场嫌疑人遗留的衣服领子 1个 ,盗窃案件现场提取的犯罪嫌疑人饮酒用的瓷碗 1个。试剂与仪器采用 970 0扩增仪 (ABI公司 )及ABI 377测序仪 ,Pr…     

混合精斑DNA三种提取方法的比较

在法医物证学上,对于混合斑检材,一般采用Chelex法[1,2]抽提DNA,由于得率和纯度较低,检测存在失败的可能。为了提高成功率,作者对检案过程中抽提DNA的步骤进行了优化,现报道如下。1材料与方法1.1检验材料1号检材为卫生巾,2号检材为卫生纸,3、4号检材均为蓝色内裤,其中3号检材较脏且混有血痕。分别剪取1～4号检材微量,涂片经伊红美兰染色,镜检,1、2、4号检材均检见人精子,3号检材检见大量上皮细胞及少量人精子。1.2仪器与试剂梯度PCR仪(德国,Eppendorf);DYY-Ⅲ-4型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂);人STR六个双基因座复合扩增银染试剂…     

关于血缘关系鉴定中基因突变判断的探讨

利用十几个STR系统的基因座进行血缘关系鉴定时,如果仅有一个基因座不符合遗传定律,是否判断为基因突变,由于没有直接的论证手段,历来是个难解的问题[1-2]。本文通过两个案例对血缘关系鉴定中基因突变的判断进行探讨。1材料和方法1.1检材案例1:碎尸案,采集失踪者韩某的母亲及三个姐姐的血样。案例2:贩毒案,采集犯罪嫌疑人及携带的男婴的血样。1.2方法1.2.1DNA提取血样用Chelex-100提取法(总体积200μl)提取模板DNA。1.2.2STR分型[3]上述血样采用ProfilerPlus试剂盒(ABI公司)和Cofiler试剂盒(ABI公司),或Identifiler试剂盒(ABI公…     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。     

6种特殊生物检材的DNA提取

在许多案件中会遇到一些特殊生物检材，如鼻涕、经联苯胺染色的血痕、甲醇固定后经伊红美蓝染色的涂片、牙刷、汗斑及软骨等，如何充分挖掘这些特殊生物检材的证据作用，将对侦破工作和定罪量刑有重要意义。但是实际上，许多特殊生物检材在提取DNA时有一定困难，导致实验结果差。作者在实际检案中遇到了上述６种特殊生物检材时，用文献犤１犦建立的DNA提取方法，成功地提取了DNA并分型，报道如下。１案例简介案例１２００１年１月，河北省张某被头罩面罩的歹徒持刀入室抢劫杀害。送检检材为被害人张某血样、犯罪嫌疑人田某血样及罪犯弃…     

1例强奸猥亵案的DNA检验

1　案件资料1 1　简要案情2 0 0 3年 9月 2 2日 8时许 ,受害人徐某报案 ,被人强奸。经查 ,2 0 0 3年 9月 2 1日晚 2 1时许 ,犯罪嫌疑人梁某爬墙入室 ,用暴力、语言威胁 ,将其强奸数次。受害人徐某陈述 ,嫌疑人极其变态 ,过程中先后用玩具防真手枪、折叠扇捅戳其阴道数次 ,整个强奸猥亵过程持续近 7h ,给受害人带来极大的肉体及心灵创伤。嫌疑人梁某被抓捕后拒不交代其强奸行为及猥亵过程。1 2　检验1 2 1　材料　现场提取受害人徐某血样、阴道擦拭物、所穿短裤、玩具防真手枪、折叠扇及嫌疑人梁某的血样 ,检材 6份 ,依次编为 1、 2、 3、 4…     

EZ-tape在皮肤接触性检材DNA检验中的应用

正接触性检材在法医DNA检验中所占比例日益增大,其中皮肤接触性检材的检验更是其中的热点与难点之一。本研究使用EZ-tape脱落细胞粘取器转移皮肤接触性检材脱落细胞,获得了良好的效果,现总结如下。1材料与方法本实验室日常检案中受理的皮肤接触性检材共164份,其中工具手柄类15份,手印痕迹类72份,绳索类9份,面罩帽子类9份,衣物类18份,手套19份,     

Chelex-100法和QIAcube纯化法在接触性检材检验中的比较

<正>在法医DNA检验中,能否提取到足够浓度与纯度的DNA模板,是决定DNA检验成败的关键之一。本研究分别采用Chelex-100法与QIAamp DNA Investigator试剂盒结合QIAcube核酸自动化提取仪(QIAcube纯化法)提取实际检案中的DNA,同等条件下进行PCR扩增与电泳,比较分析二者的图谱,报道如下。1材料与方法1.1材料65份接触性生物检材来自本实验室日常检案积累,其中瓶口32份,工具手柄18份,绳索衣物类     

改良EVO150-8方法在DNA自动化检案中的应用

目的探讨改良EVO150-8方法在批量生物检材DNA检验中的应用价值,建立一种自动化、简单、快速的DNA提取方法。方法采用改良EVO150-8自动化核酸提取纯化仪器与DNA IQ磁珠法纯化试剂盒,对各现场提取的880份血迹、烟蒂、口香糖、精斑（混合斑）、组织、骨骼、脱落细胞等常见生物检材进行DNA提取与纯化,采用Identifiler试剂盒进行扩增检验,用3130XL电泳,GeneMapper ID V3.2分析软件进行分析比对。结果在880份生物检材中,有836份检材成功获得STR分型;检验92份检材仅需时128min。结论改良EVO150-8适合批量生物检材的自动化提取。     

10起案件陈旧微量生物检材的DNA检验分析

正作者对濮阳市1992-2002年间未破命案进行了梳理,收集了其中10起命案的生物学检材,进行STR检验,得到较理想的结果,并侦破了4起命案,现报道如下。1材料与方法1.1样本来源10起未破命案检材30份。(1)精斑类检材10份(内衣4份、阴道擦拭物4份、床单2份);(2)血痕类检材11份(木质载体2份、金属载体3份、棉纱载体6份);(3)接触类检材9份(提包1个、手表5只、     

利用DNA检验技术侦破无尸案1例

2001年某日,本市某区分局刑警大队接一对夫妇报案,称其女儿张某(女,29岁,三陪小姐)已失踪近一个月。办案人员经过调查,张某近期与鹌鹑养殖户金某(男,59岁)有过密切接触,并怀疑已被金某杀害,遂对金某采取强制措施,并对可疑现场进褐色血迹,但由于金某养殖并经常宰杀鹌鹑,这些血迹是否为本案的物证需要进一步检验。在现场通过种属试验确定其中5份检材为人血,并提取被害人父母及犯罪嫌疑人金某血样,以酚氯仿方法抽提DNA并纯化浓缩,用美国promega公司CTT、SilverⅢ、FFV银染试剂盒扩增检测9个STR基因座,结果见表1。表1中5号检材为门旁一废…     

刑事现场188份接触DNA检材法医学检验分析

目的分析188份接触DNA检材的提取、送检和检验结果,探讨接触DNA检出率及可能影响接触DNA检验的因素。方法收集本辖区2016年1月至2016年10月提取并送检的188份接触DNA检材,按照检材载体性质、提取方法、送检时间、检出率等进行分类,采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析和χ2检验。结果188份接触DNA检材成功进行STR分型的有38份,检出率为20.21%;其中表面质软、粗糙的载体接触DNA检出率58.82%,高于其它载体接触DNA检出率组的差异具有统计学意义;直接原物提取的接触DNA检材检出率42.11%,高于脱落细胞粘取器提取、棉签拭子转移提取的检出率组的差异具有统计学意义;送检时间早的检材检出率高于送检时间晚的检材组且具有统计学意义。结论接触DNA检材的检出率受载体性质、提取方法、送检时间等因素影响,日常现场勘查时要注重发现检出率高的载体上的接触DNA选择适当的方法提取,并及时送检。     

磁珠法在自动化核酸提取工作站中的应用

正在全国罪犯DNA数据库的建设过程中,需对大量人员样本进行检验,增加了检验人员的工作量。本实验将磁珠法与自动化核酸提取设备相结合以提高检验过程的准确性,减少因手工操作引起的失误,缩短检验时间,提高每次检验结果的可重复性及均一性。1材料与方法人员血样100份,为本实验室2009年上半年采集,载体为公安部物证鉴定中心生产的血样采集卡。     

温州汉族群体15个STR基因座遗传多态性

本文对347名温州汉族无关个体的15个STR基因座多态性进行了调查,在群体水平丰富我国STR遗传资料数据库。1材料与方法 347名祖孙三代居住在温州地区的汉族无关个体的血样来自本实验室日常检案积累。按行业标准GA/T383-2002《法庭科学DNA实验室检验规范》中Chelex法提取所有检材DNA。