MiniSTR在DNA高度降解检材检验中的应用

自本世纪80年代中期以来,短串联重复序列(Short Tandem Repeats,STR)检验已经成为法庭科学鉴定中最常用、发展最成熟的技术[1,2],已被广泛地应用于各类案件检验.STR数据成为各国法庭科学数据库的主要构成[3].     

铁锹柄分段转移接触性生物检材DNA检验1例

1案例资料 1．1简要案情 2007年11月13日晚，高某（男）被他人打死。尸体上遗留有带血迹的铁锹1把，铁锹头及锹柄下部粘有大量血迹。现场勘查分析，该铁锹应为作案工具。通过分析犯罪分子在作案时未带手套，铁锹柄上可能遗留有其接触性生物检材。     

接触性生物检材DNA提取方法的比较

正在现代犯罪行为中,现场物证呈现多样化、微量化的趋势,接触性生物检材所占比例越来越大。接触性生物检材DNA模板量低,检验分型效果不稳定,随着法医DNA检验技术的不断提高、各种纯化试剂盒和检验设备的研发和应用,其检出率逐渐提高~([1-2])。本研究采用Chelex-100法与DNA IQ~(TM) System(DC6700,     

96孔过滤板在接触性DNA自动化检验中的应用

目的将96孔过滤板用于自动化工作站,对接触性DNA进行检验。方法收集553份现场提取的附着在烟蒂、饮料瓶、门窗把手、电源网线头、作案工具、手套上的微量接触性生物检材,在96孔过滤板上进行裂解后整体离心,分离载体与裂解液;应用自动化核酸提取纯化仪结合M48磁珠纯化试剂盒提取纯化DNA,采用IdentifilerPlus试剂盒进行扩增,3500XL测序仪电泳分型,ID-X专家系统分析结果。结果在553份检材中,成功获得STR分型的有271份,检验成功率在31.6%~97.3%之间,烟蒂、饮料瓶检材的成功率均在90%以上,提取纯化过程约90min。结论将96孔过滤板用于自动化工作站,可在实现批量接触性DNA的快速、自动化提取的同时,有效提高接触性DNA检出率。     

Chelex-100法和QIAcube纯化法在接触性检材检验中的比较

<正>在法医DNA检验中,能否提取到足够浓度与纯度的DNA模板,是决定DNA检验成败的关键之一。本研究分别采用Chelex-100法与QIAamp DNA Investigator试剂盒结合QIAcube核酸自动化提取仪(QIAcube纯化法)提取实际检案中的DNA,同等条件下进行PCR扩增与电泳,比较分析二者的图谱,报道如下。1材料与方法1.1材料65份接触性生物检材来自本实验室日常检案积累,其中瓶口32份,工具手柄18份,绳索衣物类     

触摸检材DNA的STR检验

触摸检材是指附有人体手部脱落细胞的生物检材。刑事案件中此类检材由于与人体接触时间短,所含脱落细胞量少,STR检验的难度相对较大。笔者在实际检案中利用硅珠法处理这类检材取得了较好的效果。     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。     

微量生物检材DNA检验的研究

在日常检案中经常遇到微量的生物检材 ,由于重视不够 ,提取不当 ,检验效果不甚理想。为了充分发挥微量生物检材的作用 ,更好的为侦察破案服务 ,笔者对部分微量生物检材进行了PCR STR检验研究 ,并取得了一定效果。现报道如下 :1　方法和结果实验样品　均由非本实验室的志愿者提供 ,一次性牙刷 10个 ,日常用牙刷 4个 ,头皮屑 2人分 ,一次性纸杯 10个 ,面部擦拭斑迹 5份 ,梳子 2把。另取杀人案件现场嫌疑人遗留的衣服领子 1个 ,盗窃案件现场提取的犯罪嫌疑人饮酒用的瓷碗 1个。试剂与仪器采用 970 0扩增仪 (ABI公司 )及ABI 377测序仪 ,Pr…     

特殊检材的DNA检验3例

法医物证鉴定中,较常见的生物学检材有现场血痕、精斑、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及在抵抗中遗留在当事人指甲缝中的生物成分DNA[1].但在实际工作中,发现提取的生物检材复杂多样,对于一些疑难检材在DNA提取方面便成为难点,而这些特殊检材的成功分析往往对案件的定性和侦破起着至关重要的作用.现将3个案例中4份特殊检材的DNA检验报道如下.     

杀人案件中接触性DNA检验的分析

<正>1案例资料1.1简要案情2010年9月3日,韦某(男,42岁,残疾)被人发现死于家中,颈部缠有白色电线、白布,旁边有木棍1根,上附暗红色斑迹。现场卧室内凌乱,床上有被人翻动过的枕头,枕头拉链被拉开。死者家中的香烟丢失。初步分析认定该案属于入室抢劫杀人。对现场     

电工胶带上人体接触性DNA检验

<正>1案例检验1.1检材实际案例中提取的电工胶带3份,其中1号检材为某敲诈案犯罪现场(办公室)内针孔摄像头上缠绕的电工胶带;2号检材为某持枪抢劫案现场提取的碎裂枪头碎片上缠绕的电工胶带;3号检材为某爆炸案现场提取散落的电线末端上缠绕的电工胶带。1.2检验方法样本提取分别将上述3份电工胶带与缠绕物体剥离,各剪取0.5cm×1cm大小,置于1.5m L离心     

锡纸表面接触性DNA检验方法比较

目的研究不同检验方法对锡纸表面接触性DNA分型结果的影响。方法1名志愿者洗手后分别触捏锡纸条10s,每次实验30份样本均为当天分两次制作完成。分别采取植绒拭子擦拭转移直扩法、植绒拭子擦拭转移M48磁珠法、锡纸实物整体浸入M48磁珠法进行实验。结果30个样本采用植绒拭子擦拭转移直扩法全部获得完整STR分型,且不受表面粘附灰尘抑制物影响;30个样本采用植绒拭子擦拭转移M48磁珠法提取纯化,5个样本存在不同程度等位基因缺失;30个样本采用实物整体浸入M48磁珠法提取纯化,均未获得STR分型。结论采取植绒拭子擦拭转移直扩法检验结果最好,且操作方便,可作为首选;植绒拭子擦拭转移M48磁珠法效果仅次于直扩法,可视情况选用;但实物整体浸入M48磁珠法提取纯化效果最差,不可采用。     

X-STR在精斑混合检材检验中的法医学应用

目的应用X和Y染色体STR分析含有相同父系祖先个体DNA的混合检材。方法用差异裂解法提取混合检材基因组DNA,用PowerPlex 21试剂盒、GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统27Y试剂盒、SureID?PathFinder扩增荧光检测试剂盒和GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统17X试剂盒检测混合检材。结果根据X-STR和Y-STR单倍型成功鉴别具有相同父系祖先的嫌疑人,确定混合检材中存在4个男性个体DNA。结论 X-STR可以应用于检验精斑混合检材,结合Y-STR数据可区分相同父系男性个体,并辅助判断混合检材中男性个体的数量。     

直扩试剂盒检验接触DNA检材初探

<正>接触性微量DNA检材的检验是法医物证学实际检案中的难点,目前所涉及相关检材呈现多样化、微量化趋势[1]。法医学实践中Identifiler Direct直扩试剂盒主要用于违法人员数据库建设,而用于现场检材则较少,用于微量DNA检材则更少。本文总结本实验室近年来采用该试剂盒对接触性微量DNA检材进     

DNA扩增技术用于轮奸案检材的检验

轮奸案物证检材的精斑成份往往来自多个个体，检验时相互干扰，影响环节较多。所以，对轮奸案精斑检材的提取检验及结果分析有很多问题值得探讨[1]。本文作者根据检案实践，对轮奸案件的检材搜集、DNA提取、分型等方面应注意的问题进行分析。实例资料例1．1993年1月至1994年3月，某市发生十几宗少女被轮奸系列案，其中一宗案件现场搜到18份卫生纸团。经检验，11份有人精斑。先后抓获谭某、奥莱等10名嫌疑人，疑犯均否认与案件有关。经DNA检验，其中2份卫生纸上精斑APO、DIS80、P33．6、D17530、HUMTH01、FABP等6个位点基因型均与…     

全基因组扩增在微量检材DNA分型中的应用

目的探索全基因组扩增技术对微量检材DNA分型的有效性。方法通过显微操作制备含1~20个细胞的模拟微量检材样本,在常规PCR-STR分型前加入全基因组扩增步骤,从等位基因不平衡、等位基因丢失、基因座丢失、伪等位基因(包含stutter峰)等方面探究PEP和MDA两种全基因组扩增方法对微量检材DNA分型的有效性。结果 MDA扩增效率高于PEP,但等位基因丢失和伪等位基因严重;PEP方法的正确分型率高于MDA,但小片段DNA优势扩增现象较严重。结论 MDA方法并不适合目前以STR分型为主导的法庭科学,当微量检材样本的绝对量相当少时,可以考虑使用PEP方法来扩大样本量,以满足重复检验的要求,但可能面临大片段DNA扩增失败的风险。     

衣物类生物检材DNA检验的研究

目的建立对衣物类生物检材STR检验的有效自动提取纯化方法。方法对100例衣物类生物检材用EZ1DNA Investigator试剂盒、EZ1Advanced XL工作站的Large-Volume程序(大体积法)进行提取纯化,AmpFLSTR~Identifiler~Plus荧光STR复合扩增,3500x L型遗传分析仪分析结果。结果 69份检材中检出了单一DNA分型结果,9份检出了混合基因型,22份未检出基因型。结论该方法对衣物类生物检材DNA提取纯化后进行荧光STR检测,可应用于法庭科学实践。     

微量口腔脱落细胞检材的DNA检验

目的寻求提高微量口腔脱落细胞检材的DNA检验成功率的简便有效的提取方法。方法对不同载体上的100份微量口腔脱落细胞检材采用小体积Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用IdentifilerTM复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从25根饮料吸管上提取的DNA量在0.72～116.7.8ng,16个水杯杯缘提取的DNA量在2.15-142.5ng,31个饮料瓶(罐)口提取的DNA量在1～34.65ng,10根筷子上提取的DNA量在3.35～26.6ng,12个果核中提取的DNA量在0.294～21.4ng,6份吃剩的骨头中提取的DNA量在0.88～5.88ng。100份检材性别及9个以上STR位点分型成功率平均为59.38%。除了使用者的个人原因外,检材的提取送检方式、检材的质地、饮料的性质对提取的DNA量有显著影响,是否加蛋白酶K对提取的DNA量无显著影响。结论采用小体积Chelex-100法可对60%左右的微量口腔脱落细胞检材提取DNA进行STR分型。     

接触性检材502胶熏显后手印脱落细胞的DNA提取

目的建立接触性检材中手印定位、检材转移、DNA提取纯化的方法。方法 66例接触性检材经502胶熏显,手印接触部位明确后,分别采用普通擦拭法及丙酮擦拭法进行检材上手印脱落细胞的转移,并使用超微量磁珠法试剂盒提取纯化手印脱落细胞DNA,扩增后分析结果。结果用丙酮擦拭法得到的33例检材有30份获得了较好的STR分型结果,峰值范围为1 000~4 000 RFU,峰型均匀;而普通擦拭法很难获得理想的STR分型。结论通过丙酮擦拭法转移502胶熏显的手印脱落细胞,STR分型效果更优良,可应用于法庭科学实践。     

直接扩增法用于常见现场检材DNA检验

<正>本文采用PowerPlex16 HS和Identifiler-Direct试剂盒,对血斑及烟蒂等检材进行直接扩增,以探讨直接扩增技术对常见现场检材的有效性。1材料与方法1.1样本现场提取各种载体上(包括衣物、地面、植被等)的血迹30份、烟蒂50份以及受害人、嫌疑人的血斑样本20份(滤纸或纱布),为本实验室日常检案积累。