微小型线虫酸卡红改良染色毛细玻璃管封存法

我在研究4毫米以下的轮环线虫过程中,感到甘油透明玻片封存法有两个缺点;一是虫体形态较为模糊,二是只能观察一面。如用酸卡红染色后树胶封片法,标本常易发生干皱,甚至面目全非。这对于珍稀或需要作四面详细观察的标本,颇感难以满足要求。笔者改良了酸卡红染色技术,并试用毛细玻璃管封存法,能弥补这些缺陷,不但虫体形象清晰,且能作四面察看结构。封存标本经保存一年后,颜色和形态与当初无异。现将操作方法介绍如下: (一)酸卡红改良染色 将已经70％酒精固定的微小型线虫连同固定液置于小试管或小瓶中。吸去固定液,加入约20倍容积的酸卡红染色液(酸卡红配制:卡红4克、盐酸2毫升、蒸馏水15毫升,先将盐酸与蒸馏水混合投入卡红,再加85％酒精95毫升,宜加 1～2滴氨水中和之,取上清液或过滤后应用),加橡皮     

隐孢子虫病的诊断研究——隐孢子虫卵囊染色标本光镜检查

用5种不同染色方法对病牛粪便涂片染色,藉助卵囊和标本背景染成不同的颜色进行形态观察与鉴别诊断。试验结果,抗酸和Giemsa染色方法较好;负染法可作为大量粪样检查时初筛标本使用。     

伊氏锥虫毛细管集虫直接镜检法

有关镜检各种锥虫的更为敏感、快速的方法,近十几年国外先后报道的有血容计离心技术(HCT)、毛细管离心技术(CCT)、微型阴离子交换器/离心法(MAEC)、暗视野/相差白细胞层检查法(DG)、硅酮离心法(SCM)和最小离心机微量毛细管法。国内至今尚无这方面的研究报告仍沿用压滴标本法。有鉴于此,我们从国内基层兽医诊疗机构的设备条件出发,参照上述各种方法,建立了一种用于伊氏锥虫检查的毛细管集虫直接镜检法,在实验室和野外条件下,将此法与压滴标本法作了比较,成绩颇佳。 (一)材料和方法     

实验小鼠的旋核虫

笔者曾多次在弓形虫继代小鼠和口服免疫抑制剂小鼠的腹液中发现一种快速运动的寄生原虫,经鉴定为小鼠旋核虫(Spironucleus muris) (一)虫体检查和形态特征 小鼠新鲜腹液压片镜检,虫体色淡,活动迅速,在一个视野中片刻即逝,以致堆以观察到固定的形态。腹液涂片经姬姆萨染色后镜检,始易观察清晰。虫体呈长梨形,前端稍钝,后端变锐,大小为8.51～10.64×2.20～2.34μm,双核相对并列于前端,从虫体前端发出6根前鞭毛,从虫体     

实验感染山羊伊氏锥虫病血清蛋白组份动态变化的研究

用伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)腹腔接种8只健康山羊,定期采血,分别用双缩脲法和醋酸纤维素薄膜电泳法分析血清总蛋白及其各组份的动态变化。结果表明:血清总蛋白含量感染前后及与对照组相比差异不显著(P>0.05)。而血清蛋白中的各组份的比例实验前后具有明显地变化。各组份均具有明显的动态变化;血清白蛋白(A)呈明显的下降趋势(P<0.001);β球蛋白亦呈明显的下降趋势(P<0.001);γ球蛋白呈明显的上升趋势(P<0.001)。被感染的8只山羊在57天的血液压滴镜检中未见虫体,但第33天采血接种小白鼠,可使其发病死亡,血液压滴镜检有大量锥虫。     

一种内蒙古绵羊结节虫的描述和分类意见

1965年夏,哈尔滨兽医研究所草原工作组对内蒙古自治区锡林郭勒盟阿巴哈纳尔旗地区的绵羊寄生虫进行了初步调查。在鉴定寄生虫标本过程中,发现一种结节虫,因为当时条件所限,未作详细的观察和量度。其后作者对这种结节虫标本作进一步观察和量度,发现在某些形态特点方面与旧种比较有显著区别。现仅根据一只绵羊大肠内采集的雄虫2条和雌虫6条的观察和测量结果描述如下。     

鹦鹉热衣原体外膜抗原特性的研究——鹦鹉热衣原体不同纯化方法的比较试验

应用提纯物玻片姬姆萨氏染色镜检法、光学显微镜跟踪检查法、蛋白质含量紫外吸收检测法和电子显微镜技术对衣原体纯化方法作了比较研究,结果表明泛影葡胺法和改良蔗糖法优于氯仿法,用这两种方法提取的衣原体纯度高,颗粒形态清晰,结构完整,背影杂质少,提取的衣原体蛋白质浓度高。泛影葡胺法和改良蔗糖法可用于鸡胚中增殖的鹦鹅热衣原体的纯化。     

羔羊腹泻病原轮状病毒的电镜观察

我们从拉萨市当雄、林周、达政县采集病羔粪样,经ELISA法检出的轮状病毒阳性粪样,回归初生羔羊腹泻成功;用人工复制病羔粪样提取物,接种羔羊肾细胞,产生CPE;任选人工复制的羔羊粪样和肾细胞培养物,在中国科学院上海生物化学研究所制成悬滴负染标本,进行电子显微镜观察,见到了典型的轮状病毒粒子。这是首次发现羔羊轮状病毒性腹泻存在于西藏高原,轮状病毒是西藏羔羊腹泻的病原之一。     

孔雀组织滴虫病的治疗

作者对锦州北湖公园患组织滴虫病的15只孔雀用914行静脉注射治疗,全部治愈,并对末发病的孔雀用该药进行预防治疗,亦收到满意效果。 临床表现及剖检变化 患病孔雀精神不振,两翅下垂,闭目呆立,头常卷于翼下,行动迟缓。常排白色或黄绿色粪便,粪中带血或全为血液。对死亡的4只孔雀进行剖检,盲肠异常膨大,两只为双侧性,其他两只为单侧性膨大,肠壁肥厚,粘膜坏死,溃疡。盲肠腔内充满酐酪样物质,充塞物横切面呈同心层状。肝脏表面有豆大或指肚大的灰黄色或黄绿色的圆形病灶,其中1只较重,病灶密布整个肝脏。经取盲肠内容物,以生理盐水稀释作悬滴标本镜检,可见有圆形或变形虫体的运动,并可见有1根鞭毛的摆动。     

猪痢疾病料送检条件的探讨

近几年来,我省某些基层单位送检的猪痢疾病料,往往检验不出猪痢疾密螺旋体(T.h.),究其原因,常是保存和送检方法不当所致。为此,我们将猪痢疾病猪粪便用不同的稀释液稀释后和原粪分别置4～6℃的冰箱和25～28℃室温中,观察T.h.的存活情况。 (一)材料和方法 1.样品稀释液:磷酸二氢钾4.25克,无水磷酸氢二钠6克,L-半胱氨酸0.5克,吐温     

气相色谱分析法在细菌快速检验中的应用

自从koch于1876年创用固体培养基分离细菌以来的百余年中,对细菌的鉴定和传染病的诊断始终未能摆脱Pasfeur和koch等人所倡导的纯培养概念,所以长期以来,国内外不少检验室对细菌性标本的检测,尽管作了不少的改进和发展,基本上还是从这个概念出发,弊病较多。为此,许多有志之士颇重视对细菌快速检验技术和应用。气相色谱分析法(Gaschromatograrphy analysis,简称GC)就是近十年逐渐被国内外一些检验室所接受的一种新技术。GC法在生物医学上的应用进展较快,成为分子生物学研究中的重要方法之一。在微生物的鉴定方面用此法进行了广泛而深入的探索,在快速检出厌氧菌上,经不断改善后,日臻完善。GC法具有快速,简便、灵敏高效等优点。     

转染βG基因 HHCC细胞的裸鼠转移模型的复制

将人肝癌细胞株(HHCC)细胞和转染β-葡萄糖苷酸酶(βG)基因HHCC细胞体外培养,观察细胞形态结构,用流式细胞仪测定细胞周期,并采用裸鼠脾种植法研究转βG基因HHCC细胞的转移特性;接种后60 d收集转移灶,常规制片,HE染色镜检.结果,转染βG基因HHCC细胞内多见颗粒性物质,微绒毛及突起增多,溶酶体增多,内质网及核糖体丰富,糖元颗粒堆积,某些细胞出现变性、坏死.转染βG基因HHCC和HHCC相比较,其细胞周期发生明显改变,S期细胞增多(P＜0.05),G2期细胞减少(P＜0.05);裸鼠脾种植后60 d,发现试验组出现广泛转移,在肝、肾、肠系膜淋巴结肉眼可见转移灶,而对照组仅在肝细胞中有个别散在的瘤细胞.试验结果表明,转染βG基因可增强HHCC细胞在裸鼠体内的转移能力.     

协同凝集试验在炭疽诊断上的应用

国内自1979年开展金黄色葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SpA)研究以来,协同凝集试验(Co-agglutination,CoA)已广泛用于某些细菌、病毒、螺旋体、立克次体等病原的鉴定和某些传染病的诊断。但是,一般实验室仍以沉淀反应(Ascoli试验)诊断炭疽,因为该试验在敏感性、特异性上存在一定问题。近两年来,我们用SpA菌体CoA法代替Ascoli试验进行炭疽诊断,结果较为满意。     

犬眼睑鳞状上皮细胞癌的组织病理学诊断

对一例自然患病犬眼睑增生组织进行组织病理学观察,以确定增生组织的病理学类型。对病犬进行血常规及生化检查,取手术切除增生组织标本,经福尔马林溶液固定后,进行常规石蜡包埋、切片、HE染色、SABC法免疫组织化学试验,并利用NIS-Elements高清晰度彩色图文分析系统记录观察结果。结果显示,血常规及生化检查白细胞浓度偏高;HE染色镜检,可在增生组织内见到明显的角化珠和细胞间桥。免疫组织化学检测结果显示,细胞角蛋白、上皮膜抗原、S-100蛋白均为阳性。结果表明,该眼睑增生组织为鳞状上皮细胞癌。     

用热油治疗马骡裂蹄

我们用热油治疗马、骡裂蹄,疗效确实,经治16例全部治愈。 方法 将患马驻立保定,刷洗患蹄,清除裂口内污物,用小凿子适当修正裂口,削去裂缝两侧干枯角质,匣于热油滴入裂口,但不要修得太深,以免损伤蹄真皮。取食油100克,明矾1克。将油煎沸加入明矾,用棉球蘸取热油由裂口上端向下滴入,滴满裂口为止,注意不要滴到蹄冠部以免烫伤。每隔4天滴烫一次,在间隙时间内,每日涂冷油1次。裂口过大时,滴入热油后可用凡士林封闭裂口,防止水分蒸发。在治疗时注意不要烫伤蹄角质。     

BA-ELISA检测空肠弯曲菌的研究

应用抗空肠弯曲菌共同抗原的单克隆抗体,以BA-ELISA法对猪、鸡胴体、脏器及粪便标本中的空肠弯曲菌进行检验。建立的BA-ELISA法具有较强的特异性,在参试的15种其它细菌中,除与幽门弯曲菌出现交叉反应外,与其它细菌均为阴性反应;其敏感性可达3.2×10~4cell/ml。对猪的140份、鸡的142份标本进行了检测,BA-ELISA和常规分离培养法的阳性率分别为38.6％、37.1％和50％、48.6％,两种检验方法的结果相差不显著,BA-ELISA法可在27小时内报告结果,而常规分离培养法则需5～7天,这为空肠弯曲菌的检验提供了一种快速、敏感的方法。     

猪胃溃疡病的几种特殊类型

笔者通过对13188例商品猪胃溃疡病的调查,观察到部分病例为特殊类型的溃疡病变,与一般溃疡病变在形态及发病部位上有所不同。本文对猪特殊类型溃疡病的观察报道如后。 (一)材料和方法 随生产流程,对貌似健康猪屠宰后,逐头沿胃小弯切开,检测。观察记录胃食管区及贲门部、幽门部、胃底部、胃窦括约肌、幽门管部等部位的溃疡、炎症等病变。选取部份典型病变组织,用10％福尔马林溶液或酒精福尔马林溶液固定,常规石蜡切片,H·E染色,镜检。     

TLR4/MyD88通路在油酸促进BRL 3A细胞脂肪变性中的作用

为研究TLR4通路在油酸(oleic acid,OA)致BRL 3A细胞脂肪变性中的作用,用不同浓度的OA(0、1.2、1.8、2.4 mmol/L)处理BRL 3A细胞24 h,再用显微镜观察细胞损伤状况,DAPI染色观察细胞核形态,油红O染色观察脂滴生成量,甘油三脂(TG)试剂盒测定TG含量,Western-blot检测TLR4通路蛋白TLR4、My D88、TBK1的表达量。结果显示:与对照组相比,随着OA浓度增加,细胞损伤增加,细胞核变形、破碎、皱缩,呈一定的浓度梯度依赖性;细胞内脂滴生成量增加,TG含量显著增加(P0.05);与对照组相比,TLR4、My D88及TBK1的表达量随着OA浓度增加呈显著或极显著增加(P0.05或P0.01)。这表明油酸可能通过TLR4/My D88途径促进BRL 3A细胞发生脂肪变性。     

北京及周边地区乳牛乳腺炎的调查与病原菌分离鉴定

为了解乳牛乳腺炎的发病原因,对北京及其周边地区4个奶牛场的乳牛乳腺炎的发病情况进行了临床调查、诊断和检测,采集患临床型乳腺炎和隐性乳腺炎乳牛的乳样;用接种法对采集乳样进行培养,对可疑菌落进行分离、接种、染色、镜检鉴定.结果显示,从采集的266份乳样中分离到7种434株病原菌,其中葡萄球菌150株,链球菌204株,革兰阴性杆菌80株.证实,北京及其周边地区乳牛乳腺炎的主要病原菌为葡萄球菌和链球菌,且细菌混合感染引起的乳牛乳腺炎有上升趋势.     

非洲一体化历史进程之百年审视及其理论辨析

20世纪初叶以来兴起的亚非复兴运动,具有十分复杂而广阔的世界文明史重建与人类现代性再次探索的意义。在此过程中,基于自身文明形态与制度特征而艰难推进的非洲一体化运动,不仅具有十分复杂的背景与动力,而且始终呈现出与众不同的发展轨迹、追求目标与曲折历程。透过非洲文明形态与历史个性的深度观察,我们需重新评判百年来非洲一体化复兴运动的基本特点及其成败得失。非洲跨越式、多层次重叠的一体化复兴运动,与百年来非洲大陆的政治建构、经济发展、文明重建及当下政治经济发展新情势有着复杂的互动关系。非洲一体化发展的机遇与挑战俱存,理想图景可期可待。同时,该学术命题之研究需注重理论思考、学理探讨与方法创新。