禽流感的诊断和预防

禽流感 (ＡｖｉａｎＩｎｆｌｕｅｎｚａ ,ＡＩ)是由Ａ型流感病毒引起的一种禽类疾病。该病病毒属于正粘病毒科 ,鸡、火鸡、鸭、鹅均可感染。禽类感染后 ,可表现为亚临床症状、轻度呼吸系统疾病、产蛋量下降或急性全身致死性疾病1　临床症状及病理变化1.1　临床症状　禽流感的潜伏期为几小时到几日不等 ,其长短与病毒的致病性高低、感染强度、传播途径和易感禽的种类有关。症状可涉及呼吸道、消化道、生殖道及神经系统 ,一般没有特征症状 ,通常表现体温升高 ,精神沉郁 ,食欲减少 ,消瘦 ,母鸡产蛋量下降 ,咳嗽 ,喷嚏 ,呼吸罗音 ,甚至呼吸困难…     

禽流感的防制

禽流感 (ＡＩ)又称真性鸡瘟、欧洲鸡瘟 ,是由Ａ型流感病毒引起的一种高度接触性的急性或慢性传染病。火鸡、鸭、鸡、鹅等家禽、水禽及鸟类均可感染。禽流感病毒 (ＡＩＶ )主要侵害家禽的呼吸系统、消化系统、生殖系统和神经系统 ,高致病力的毒株引起家禽大量死亡 ,温和型的毒株对家禽的致死率虽不高 ,但呈现隐性感染 ,影响家禽的饲料转化率和产蛋率。ＡＩＶ具有众多血清亚型 ,各血清型毒株之间缺乏交叉免疫。ＡＩＶ抗原容易发生变异 ,给研制疫苗进行预防增加了难度。ＡＩＶ的变异性极强 ,病毒在增殖过程中经常由于抗原漂移或变换 ,发生基因…     

动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展

动物致病性ＲＮＡ病毒 ,比如猪瘟病毒 (Ｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒｖｉｒｕｓ,ＣＳＦＶ )、牛病毒性腹泻病毒 (Ｂｏｖｉｎｅｖｉｒａｌｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓ ,ＢＶＤＶ )、口蹄疫病毒 (Ｆｏｏｔａｎｄｍｏｕｔｈｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ ,ＦＭＤＶ)和风疹病毒 (Ｒｕｂｉｖｉｒｕｓ ,ＲＵＢＶ)等可引起动物严重的传染病。此类传染病在世界各地的间歇性暴发 ,给人类健康和畜牧业的发展造成了巨大的损失 ,各国为此都投入了大量的人力、物力进行防制。目前 ,动物ＲＮＡ病毒分子生物学方面的研究已成为大家共同注目的焦点。…     

猪生殖与呼吸综合征病毒的分子生物学研究进展

猪生殖与呼吸综合征 (Ｐｏｒｃｉｎｅｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅａｎｄｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＰＲＲＳ)是由猪生殖与呼吸综合征病毒 (ＰＲＲＳＶ)引起的一种新ＲＮＡ病毒病。它以母猪发热、厌食和流产、死产、干尸化胎、产弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。该病自 1987年首次在美国发现以来 ,先后流行于加拿大、德国、荷兰、西班牙、比利时、英国、法国、意大利、波兰、丹麦、马耳他等国家[1] ,现已遍及北美洲及欧洲 ,亚洲的日本、韩国、菲律宾及我国的台湾省也有疫情报道。近几年来 ,随着优良种猪的…     

鸡病毒性关节炎病毒的提纯结构蛋白及其免疫活性分析

采用差速离心和蔗糖递度超速离心法提纯了鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）Ｈ＿（９３０７）株，并用ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳技术分析其结构蛋白，该病毒主要由８条多肽组成（ＶＰ＿１～ＶＰ＿８），它们的分子量分别是１４５、１３０、１１５、７２、７０、６５、４２、３９ＫＤ。用Ｗｅｓｔｅｒｎｈｌｏｔｔｉｎｇ免疫印迹技术分析这些多肽的免疫活性，与同源病毒株抗血清出现５条可见的反应带，分别是ＶＰ＿１、ＶＰ＿２、ＶＰ＿４、ＶＰ＿５和ＶＰ＿７；与异源病毒抗血清反应只出现两条可见的阳性反应带，分别是ＶＰ＿１和ＶＰ＿２。     

瘟病毒致细胞病变的遗传机制及其非结构蛋白的功能

牛病毒性腹泻 黏膜病病毒 (ｂｏｖｉｎｅｖｉｒａｌｄｉａｒｒｈｅａ ｍｕｃｏｓａｌｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ ,ＢＶＤＶ)、边界病病毒 (ｂｏｒｄｅｒｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ ,ＢＤＶ )以及猪瘟病毒 (ｃｌａｓｓｉｃａｌｓｗｉｎｅｆｅｖｅｒｖｉｒｕｓ ,ＣＳＦＶ )在黄病毒家族中构成了瘟病毒属 (Ｐｅｓｔｉｖｉｒｕｓ)。瘟病毒是能够引起畜牧业严重损失的重要病原。这些具有囊膜的病毒粒子内包含长为9.5～ 12 .3ｋｂ的单股正链ＲＮＡ ,其基因组包含有长的开放阅读框架 ,在病毒或细胞蛋白酶的作用下 ,通过共翻译或翻译后修饰途径产生成…     

鸡减蛋综合征病毒的分子生物学研究概况

鸡减蛋综合征是由鸡减蛋综合征病毒 (ＥＤＳＶ)引起的以产薄壳或无壳蛋 ,产蛋率严重下降为主要特征的传染病。自 1976年荷兰科学家ＶａｎＥｃｋ等首次报道此病以来 ,许多国家及地区都报道了此病的流行 ,此病已成为当今世界范围内危害养鸡业的重要疾病之一。我国于 2 0世纪 80年代末在肉用种鸡群中发现减蛋综合征以来 ,许多地区均分离出该病毒[1] 。ＥＤＳＶ是禽腺病毒Ⅲ群中的唯一成员 ,与其他的禽腺病毒相比 ,具有独特的抗原性和生物学特性。鉴于此 ,各国学者对ＥＤＳＶ的分子生物学研究越来越重视。笔者就ＥＤＳＶ的基本生物学特性、基因…     

伪狂犬病病毒糖蛋白的研究进展

伪狂犬病病毒糖蛋白的研究进展向开军１）张楚瑜（武汉大学病毒研究所４３００７２）伪狂犬病病毒（ＰｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓＶｉｒｕｓ，ＰｒＶ）是引起家畜和野生动物Ａｕｊｅｓｚｋｙ′ｓ病（伪狂犬病）的一种疱疹病毒，其所致症状为神经功能失调、呼吸紊乱及繁殖障碍...     

杆状病毒表达载体的研究及应用

198 3年Ｓｍｉｔｈ[1] 创建了苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 (ＡｕｔｏｇｒａｐｈａＣａｌｉｆｏｒｎｉａｎｕｃｌｅａｒｐｏｌｙｈｅｄｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ ,ＡｃＮＰＶ )载体表达系统 ,1984年前田进[2 ] 组建了家蚕培养细胞 ,并在幼虫体内成功表达了浕 干扰素 ,其后众多科学家开展了杆状病毒表达载体方面的研究 ,取得了可喜的成绩。目前最常用于表达载体构建的杆状病毒有ＡｃＮＰＶ、家蚕 (Ｂｍｂｙｘｍｏｒｉ,Ｂｍ)核型多角体病毒 (ＢｍＮＰＶ)、粉纹夜蛾 (Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａｎｉ ,Ｔｎ)核型多角体病毒(ＴｎＮＰＶ)。随着越来越多…     

口蹄疫病毒12S抗原免疫学性质的研究

用口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）Ａ型１２Ｓ基础免疫，Ｏ型１２Ｓ加强免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／０细胞融合，筛迭，得到了一组群特异性单抗。用ＲＰＨＩ，ＡＧＤ，ＥＬＩＳＡ及阻断式和竞争式ＥＬＩＳＡ分析这组单抗得出以下结论：１２Ｓ抗原至少存在一个１２Ｓ独有的型间交叉的群特异性抗原表位，该表位是非中和性抗原表位，免疫原性较低；这组群特异性单抗可与ＦＭＤＶＯ，Ａ，Ｃ，Ａｓｉａ－１型１２Ｓ发生不同程度的反应，表明该表位存在于ＦＭＤＶＯ，Ａ，Ｃ，Ａｓｉａ－１型１２Ｓ上，但不同血清型的１２Ｓ表位构成存在细微的差别     

禽流感的研究进展

禽流感(Avianinfluenza,AI)又称鸡瘟(Fowlplague)、真性鸡瘟、欧洲鸡瘟,是由正黏病毒科、流感病毒属的A型流感病毒(AIV)引起的禽类的一种传染性疾病,鸡、火鸡、鸭和鹌鹑等家禽及野生鸟类均可感染。因宿主和病原的不同,发病情况多种多样。高致病性禽流感病毒可引起鸡群中100%的鸡发病,75%以上的病鸡死亡;无致病性禽流感病毒不引起任何症状,仅能从感染鸡的血清中检测出禽流感病毒抗体;禽群感染温和型禽流感病毒后,临床上仅表现为精神沉郁,采食减少,有呼吸道症状,排黄绿色稀粪,产蛋下降,零星死亡。根据禽流感病毒的致病性强弱,可将禽流…     

用口蹄疫非结构蛋白鉴别康复动物与注射疫苗动物的研究及应用

1996年 ,Ｂｒｏｗｎ等从口蹄疫病毒 (ＦＭＤＶ)感染的组织液中发现了病毒感染相关 (ｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ,ＶＩＡ )抗原 ,即ＦＭＤＶ非结构蛋白 3Ｄ ,并建立了琼脂免疫扩散 (ＡＧＩＤ)试验 ,用于进出境动物检疫 ,以区分ＦＭＤＶ感染动物和注射疫苗动物。之后Ｐｉｎｔｏ等在用ＡＧＩＤ试验进一步研究注射灭活疫苗动物的ＶＩＡ抗体时发现 ,注射疫苗前和接种一次疫苗的动物血清ＶＩＡ抗体均为阴性 ,而重复接种福尔马林灭活疫苗或ＡＥＩ灭活疫苗的动物 ,其血清中都不同程度的含有ＶＩＡ抗体。这一结果对用ＡＧＩ…     

鸡痘病毒282F_4弱毒株基因组BamHⅠ片段的克隆与分析

采用鸟枪法克隆鸡痘病毒（Ｆｏｗｌｐｏｘｖｉｒｕｓ，ＦＰＶ）基因组ＢａｍＨⅠ部分片段，用Ｔｈｇｏｘｉｇｅｎｉｎ一ｄＵＴＰ标记的ＦＰＶ２８２Ｆ_４弱毒株ＢａｍＨⅠ片段探针，点杂交，证实２２个克隆插入了ＦＰＶ２８２Ｅ_４弱毒抹ＤＮＡ的ＢａｍＨⅠ片段，选取具有代表性的大小不同的６个质粒ｐＵＡ、ｎＵＢ、ｐＵＣ、ｐＵＤ、ｐＵＥ、ｐＵＦ。６个质粒插入的片段Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ分别为７．３，４．９．４．２，３．６，３．２，３．０ｋｂ，分别以ＣｌａⅠ、ＥｃｏＲⅠ、ＥｃｏＲＶ、ＨｉｎｄⅡ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｃⅠ、ＳｍａⅠ、ＸｈｏⅠ进行单酶切，又经适当组合酶切。实验结果表明，在各片段在在的单酶切位点为Ａ：ＥｃｏＲⅠ、ＳａｃⅠ、ＸｈⅠ位点；Ｂ：ＥｃｏＲⅠ、ＸｈⅠ、ＨｉｎｄⅡ位点；Ｃ：ＣｌａⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ位点；Ｄ：ＳａｌⅠ、ＰｓｔⅠ位点；Ｅ：ＥｃｏＲＶ位点；Ｆ：ＥｃｏＲＶ位点。逃出７．３ｋｂ片段，选取片段中单一酶切位点ＢｇｌⅡ，插入痘苗病毒（ｖａｃｃｉｎｉａｖｉｒｕｓ，ｖｖ）Ｐ_７，５启动于和Ｐ_１１启动子控制下的报告基因ＬａｃＺ，构建成时时表达载体质粒，通过与ＦＰＶ２８２Ｅ_４株转染鸡胚成纤维细胞，一生的重组病毒，可以表     

猪伪狂犬病的诊断和控制措施

伪狂犬病 (Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓ ,ＰＲ)是由伪狂犬病病毒 (ＰＲＶ)引起的多种动物的一种急性传染病。猪伪狂犬病已在世界上 5 0多个国家和地区流行或暴发流行 ,近几年在我国也有不少集约化养猪场发生本病 ,但在甘肃省还未曾有此报道。 2 0 0 0年 3～ 4月 ,我省有 2个集约化养猪场相继发生了以初生仔猪在 3～ 4日龄突然整窝发生以呕吐、腹泻、出现神经症状和高致死率为特征的急性传染病。我们根据流行病学、临床症状和实验室检验结果确诊为猪伪狂犬病。1　发病情况Ａ猪场 :该场 1996年 6月投产 ,存栏母猪 3 0 0头。按常规免疫程序进行猪…     

鸡传染性贫血病毒的分离鉴定

在山东省从死亡率达７２％、混合感染多种病原微生物的海兰白蛋鸡和艾维茵肉鸡群中分离到３株鸡贫血病毒（ＣＡＶ），这些毒株耐体积分数５０％氯仿和７０℃水浴１５ｍｉｎ，能在ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞内增殖。用分离的细胞毒接种１日龄ＳＰＦ鸡呈现典型的鸡传染性贫血特征性的临床症状和病理变化；用间接免疫荧光检查感染的ＭＤＣＣ－ＭＳＢ１细胞涂片和鸡组织触片，可见特异的核内荧光。分离毒株能被ＣＡＶ－ＴＫ５８０３株抗血清所中和；５周龄ＳＰＦ鸡接种分离细胞毒可产生ＣＡＶ抗体；电子显微镜观察，分离毒株ＭＳＢ１细胞培养物中有大量２０ｎｍ左右的病毒粒子。应用特异性ＰＣＲ引物可扩增到预计长度的病毒核酸片段，进一步证实分离株为ＣＡＶ。     

用鸡胚监测火鸡疱疹病毒疫苗的效力试验

目前防制鸡马立克氏病 (ＭＤ)的措施主要是接种疫苗 ,但免疫失败时有发生 ,造成免疫失败的诸多因素中 ,最主要的就是疫苗蚀斑形成单位 (ＰＦＵ)的损失。为检测疫苗的效力和提高鸡群的免疫效果 ,笔者把火鸡疱疹病毒 (ＨＶＴ)疫苗接种于鸡胚卵黄囊 ,检查绒毛尿囊膜 (ＣＡＭ)上病毒痘斑生长情况 ,以此作为ＨＶＴ疫苗免疫前效力监测的手段 ,获得了满意效果。1　材料与方法1.1　疫苗　用国产和进口ＨＶＴ疫苗 3 0批次 ,分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 3个组进行试验。1.2　鸡胚　经隔离饲养、血清学检验 (ＡＧＰ)无ＭＤ抗体的种鸡所产蛋孵育的 4～ 5日龄健康鸡胚…     

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（ＤｏｔＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原,确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１∶４００,ＳＰＡ胶体金探针的工作浓度为１∶８０,该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点。用ＤｏｔＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（ＤｏｔＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管、肺、肾病料,ＩＢＶ阳性检出率均为１００％;对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测,ＩＢＶ阳性检出率分别为３４．５％和３１．０％,阳性符合率为９３．３％（Ｐ＞０．０５）。     

禽脑脊髓炎病毒的提纯和电镜观察

将禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）ＶａｎＲｏｅｋｅｌ株、１１４３株和ＮＨ９３７株分别经卵黄囊接种于６日龄ＳＰＦ鸡胚，接毒１０日后解剖鸡胚，收集尿囊液，采集脑、消化道和胰腺，用玻璃匀浆器制备２０％的组织悬液。组织悬液经３次冻融充分破坏细胞，释放病毒，然后以４００Ｏｒ／ｍｉｎ离心２０分钟，１００００ｒ／ｍｉｎ离心４０分钟。上清液经浓缩后轻轻加入已含２ｍｌＣｓＣｌ不连续密度梯度的５ｍｌ离心管内，再以４５０００ｒ／ｍｉｎｌ２℃离心２小时，在ＣｓＣｌ连续密度梯度内取出含ＡＥＶ的组分后经对蒸馏水透析除去ＣｓＣｌ，对聚乙二醇－６０００透析浓缩。病毒样本经１％磷钨酸负染后用透射电镜观察见到典型的ＡＥＶ粒子。     

对虾白斑综合征研究进展

对虾白斑综合征是由对虾白斑综合征病毒 (ｗｈｉｔｅｓｐｏｔｓｙｎ ｄｒｏｍｅｖｉｒｕｓ ,ＷＳＳＶ)引起的暴发性流行病 ,典型症状是病虾甲壳内侧出现直径 0 .5～ 2 .0ｍｍ的白色斑点 ,患病组织在电镜下可见病毒分布于细胞核内 ,重者胞质溃散 ,核破裂 ,释放出病毒粒子。ＷＳＳＶ的形态结构与杆状病毒相似 ,在组织细胞内不形成包涵体。该病病程短 ,死亡率高 ,病原不仅水平传播 ,还存在垂直传播的可能性。近年来 ,该病的诊断技术研究虽有较大进展 ,但防制手段仍显滞后 ,不能有效控制该病的发生和流行。1　对虾白斑综合征的发病情况2 0世纪 8…     

早花期和盛花期狗舌草中双稠吡咯啶生物碱对大白鼠的毒性试验

提取早花期和盛花期狗舌草中双稠吡咯啶生物碱（ＰＡｓ），分别按１００ｍｇ／ｋｇ给２组ＳＤ大白鼠腹腔注射。结果表明，２个时期狗舌草中ＰＡｓ对ＳＤ大白鼠均具有很强的肝毒性和一定的肺毒性及中枢神经毒性，以盛花期狗舌草中ＰＡｓ的毒性较弱；同时发现狗舌草对心、肾也具有一定的毒性作用。