23株猪瘟病毒E2基因主要抗原编码区序列差异分析

用RT PCR及测序获得了 17株猪瘟病毒 (HCV) 2 5 1bp的E2基因主要抗原编码区序列 ,经DNAstar软件对获得的 17株HCV及已发表的 6株HCV毒株序列进行了比较和分析 ,并构建了HCV遗传发生树。结果 ,这 2 3株与石门株的序列相比 ,所有毒株的碱基变化随机地分布于整个序列 ,无缺失和插入 ,其中变化较大的区域位于序列的 3′端。 2 3株HCVE2基因主要抗原编码区核苷酸及氨基酸同源性分别为 74.1%～ 10 0 %、79.7%～ 10 0 % ,其中 4株 2 0世纪 70～ 80年代分离毒株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 76.3 %～ 86.2 %、81.1%～ 87.8% ,10株 2 0世纪 90年代分离毒株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 75 .4%～ 10 0 %、79.7%～ 10 0 %。所绘制的遗传发生树分为 2个组群 (group) ,每个组群分为 2个亚组群 (subgroup) ,14株猪瘟 (HC)流行毒株在 2个组群中均有分布 ,2 0世纪 70～ 80年代分离的 3株 (75 % )在组 群 2 ,2 0世纪 90年代分离的 5株 (5 0 % )在组群 1     

广西猪瘟流行现状的调查分析

据对广西 13个发病猪场 (疫点 )猪瘟 (CSF)的流行病学调查分析 ,发现当地CSF流行以非典型为主 ,典型CSF同时存在 ,发病猪多在 3月龄以下且病程较长。母猪存在隐性感染 ,部分表现为繁殖障碍 ,一些临床健康猪存在着带毒问题。此外 ,从疑似CSF病料中扩增出牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) ,表明广西猪群中存在着BVDV的感染。分子流行病学调查结果表明 ,猪瘟病毒 (CSFV )广西流行株的基因型较复杂 ,分布 2个基因群的 4个亚群 ,其亲缘关系与 2个传统毒株石门株 (Shimen)和兔化弱毒株 (HCLV)相距甚远 ,最高可达 2 0 .0 %,说明广西CSFV流行株存在着遗传多样性。     

猪瘟病毒GSLZ株的分离与鉴定

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因.经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25 nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株.对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株...     

猪瘟病毒单克隆抗体的研究进展

概述了国内外研制的针对猪瘟病毒E2、Erns和NS3蛋白的单克隆抗体及它们在猪瘟病毒抗原性分析、抗原表位研究及猪瘟诊断和鉴别诊断中的应用,并对其今后的研究和应用前景进行了展望.     

猪瘟病毒E2糖蛋白A1亚区抗原性分析

采用Bac to Bac杆状病毒表达系统 ,对猪瘟病毒A抗原区内的 2 74 4～ 2 94 7nt基因片段(EC)进行了克隆、表达 ,并分析了表达产物的抗原性。研究发现 ,EC表达产物能与抗猪瘟病毒Al fort毒株E2蛋白的中和性单克隆抗体c2 4 10、a18发生特异性结合 ,且用其免疫动物后能诱导机体产生中和抗体。结果表明 ,A1抗原亚区位于E2蛋白 791～ 85 8位氨基酸区域。     

猪瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了猪瘟病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果,根据猪瘟病毒5′端非编码区的一段保守序列设计的LAMP引物能够在65℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果可直接用肉眼判断。结果表明,该检测体系具有极高的特异性,只能检测到目标病毒,与其他类似病毒如猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的核酸等无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标病毒核酸量,比普通RT-PCR的灵敏性高10倍。     

猪瘟病毒NASBA-ELISA检测方法的建立与应用

为建立猪瘟病毒NASBA-ELISA检测方法,以猪瘟病毒(CSFV)E2基因为研究对象,利用Prim-er 5.0和Blastn生物软件,设计并合成了特异的核酸序列依赖扩增(NASBA)引物和探针。经条件优化,确定的最佳扩增反应条件为42℃,反应1.5h。临床检测结果显示,用该方法可特异地扩增CSFV E2基因约155bp的目的片段,而对TGEV、PRRSV、PCV2、PPV、PEDV、APP和PK-15正常细胞等核酸的检测均为阴性,可最低检出1×100～1×101 copies/μL,其灵敏度比RT-PCR略高。应用该方法对采自重庆部分地区猪场的125份样品进行了检测;结果,猪瘟病毒阳性检出率为5.6%,NASBA-ELISA法与RT-PCR法的检出符合率为94.4%。结果表明,NASBA-ELISA方法可应用于CSFV的快速鉴别检测。     

猪瘟病毒荧光RT-PCR快速检测方法的建立

以猪瘟病毒5′端非编码区为靶核酸序列设计引物和探针,建立了一步法荧光RT-PCR检测猪瘟病毒。荧光RT-PCR仅检测出猪瘟C株、T株,未能检测出牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪呼吸系统冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、PK-15细胞和牛睾丸原代细胞;对猪瘟病毒T株的扩增反应产物进行了测序分析,与预期序列相符。荧光RT-PCR的检测极限可达到1 TCID50/mL,整个试验流程只需2 h。采用荧光RT-PCR和抗原捕获ELISA同时检测临床病料、猪副产品共207份样本,两种方法的检出率分别为17.4%和13.5%,两者符合率为95.7%(198/207);荧光RT-PCR的检出率高于ELISA,两者差异显著。结果表明,建立的荧光RT-PCR可用于猪产品、临床病料中猪瘟病毒的快速检测。     

用多聚酶链反应检测非洲猪瘟病毒的研究

用HindⅢ对非洲猪瘟病毒核酸的重组质粒pRPEL2进行酶切后,将第5片段插入到pT7/T3α-19上而得到亚克隆重组质粒pT7 ASFH5。用双脱氧末端终止法测定了该插入片段的核苷酸序列。在此基础上选择了一段含194bp的片段作为扩增模板,并人工合成了该片段两端含20个碱基的寡核苷酸作为引物,从而建立了诊断非洲猪瘟病毒的多聚酶链反应。与核酸杂交相比,该方法不但更为快速和简便,而且灵敏度提高了一千万倍左右.     

非洲猪瘟病毒解旋酶结构与功能研究进展

目前对非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的5个解旋酶(D1133L、QP509L、Q706L、B962L和A859L)的结构和功能知之甚少,了解ASFV解旋酶结构和功能有助于明确ASFV致病机制.本文通过结合生物信息学的方法综述了ASFV解旋酶的结构和功能的研究进展,从解旋酶的角度加深了对该病毒复制调控的认识.     

4株猪瘟流行野毒株病毒结构蛋白E2基因的核苷酸序列分析

应用RT-PCR和nPCR扩增由4株甘肃省近期(1997-1998)猪瘟流行野毒株的E2基因,将其克隆到pGEMTEasy载体上,经转化、筛选、鉴定后,测出核苷核序列.4株流行毒株的E2基因核苷酸序列同源性为89.2%-99.7%,相应的氨基酸序列同源性为93.8%-99.0%.这4株流行毒株;与C-株(疫苗种毒)E2基因的核苷酸序列同源性为82.2%-84.3%,相应的氨基酸序列同源性为87.9%-90.2%,表明近期猪瘟流行毒株与C-株的gp55蛋白之间存在一定的差异.     

金融全球化与转轨国家金融自由化的效应分析--以俄罗斯为例

自20世纪90年代以来,随着经济全球化的不断深化、贸易自由化和生产国际化的进一步扩大,金融全球化和金融自由化已成为一种更加明显甚至是必然的趋势;与此同时,原计划经济国家相继向市场经济转轨。在此背景下,金融全球化与转轨国家的经济和金融发展之间存在着互动关系,并具有内在的逻辑一致性。这一联动关系对经济转轨国家利弊兼具,经济转轨国家不仅要直面金融全球化所带来的利益和风险,而且要承受金融全球化与其经济和金融互动所产生的双重效应。同样,由于联动关系,如果转轨国家顺利融入金融全球化进程,并能获得较大的收益,这对金融全球化的可持续发展将是极大的贡献,否则他们的缺失或者不稳定将严重影响到金融全球化的可持续发展。     

广西高等职业教育与区域经济互动关系的分析

高等职业教育只有立足区域经济,才能获得持续发展的动力。本文通过对广西高等职业教育与区域经济联动发展的现状分析,提出完善高等职业教育与区域经济联动机制的思路。     

试析文莱对外关系的特点

1984年1月1日独立后,文莱从本国实际出发,积极利用各种有利条件发展对外关系。在政治交往中,广泛参与各种国际组织和地区性组织,发展与世界各国的友好关系;在经济层面上,利用本国的资源优势扩大与世界各国的经济往来;同时加强与穆斯林世界的友好交往,从而在国际交往中获得主动,维护国家利益。     

革新开放以来老挝与越南特殊关系的新发展

老挝人民民主共和国和越南社会主义共和国在反帝反殖的共同斗争中形成和建立了特殊的团结和友好关系,老越特殊关系一度成为老挝对外关系的核心。随着20世纪80年代中期老挝全方位外交方针和政策的确定和实施,老挝在发展对越关系时表现更为主动积极,老挝与越南的特殊关系不仅没有因为全方位外交方针的实施而发生变动,而是更为紧密,特别是在区域经济一体化等新形势下,双边合作还在不断深化和扩大,老越特殊关系正朝着更为巩固方向发展。     

新时代中越关系:机遇与挑战

中国和越南是一衣带水的邻邦,又同是社会主义国家。随着两国关系的全面改善和发展,中越关系在22年里取得长足发展。双方政治关系发展到较高水平,经贸关系迅速发展,文化交往日益密切,外交上越南将中国列为最重要的邻国和交往对象,并致力于建设面向21世纪的睦邻互信伙伴关系。2013年10月,中国国务院总理李克强访问越南,推进了中越关系进一步发展。     

新加坡对外经济关系的新格局

近年来,新加坡的外经济关系呈现出新的格局性变化。本文拟就新加坡与其他东盟国家、美、日、欧、澳、新、中国大陆、香港、台湾、韩国、印度等的经济关系作一分析。     

越南与印度关系:制衡外交的一个范例

越南和印度长期以来一直保持着亲密、友好的关系,并将这种良好的双边关系视为传统友好关系。越南革新开放以来,越印关系又有新的发展,最终演进到战略伙伴关系。根本原因是两国在外交战略的选择上有共同的需求:都希望借重对方的力量来达到制衡大国的目的。笔者认为,越印关系就是一种有实用目的的制衡外交的一个范例。     

Relationship Management with Managers of Countrywide Offices of SEESA: A Case Study

Employees are a crucial stakeholder group for organisations since they determine the degree to which they achieve their goals. It is therefore necessary to build strong relationships with the workforce to encourage employee engagement, which implies that employees’ individual goals are aligned to those of the organisation. To build strong relationships, internal communication should be managed strategically. However, when an organisation has offices around the country, internal relationship management can be impeded, which adversely affects the entity attaining its goals. In this qualitative study, the case of SEESA, a national labour law organisation specialising in providing legal services to employers, was investigated to determine the way in which it manages relationships with its nationwide managers. A mixed-method approach was followed, using semi-structured interviews and questionnaires to gather data. The findings indicated that, despite studies elsewhere indicating a communication and relationship building strategy as a prerequisite for building strong organisation-employee relationships, the outcomes of such relationships can be present without a formal internal communication strategy. This can occur provided the organisation is inclined towards a symmetrical world view, has an open culture and encourages two-way communication with top management. Suggestions for managing relationships with employees in nationwide offices are made.     

中俄关系进入全面发展的新时期

中俄关系经过了15年发展历程,现已建立了稳定的政治和法律基础。中俄两国的政治、经济和军事关系稳定发展,在国际事务中的合作不断加强。随着中俄在经贸、能源、投资和文化交流领域合作的进一步扩大,中俄关系进入一个全面发展的新时期,展现出十分广阔的发展前景。