实验感染肝片吸虫水牛血液和肝中NO和TNF-α变化的研究

用酶法和放射免疫方法测定２０ 头健康水牛血清及肝匀浆中一氧化氮（ Ｎ Ｏ） 和肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα） ,研究了水牛血液和肝组织中 Ｎ Ｏ 和 Ｔ Ｎ Ｆα的正常水平以及感染肝片吸虫后的动态变化。结果慢性、急性感染组水牛血清 Ｎ Ｏ 含量均从感染肝片吸虫后第３ 周开始逐渐升高,并在第５ 、７ 、１１ 、１３ 周显著高于对照组,以后一直在高于对照组的水平波动,直至试验结束;感染肝片吸虫的水牛肝组织 Ｎ Ｏ 含量也高于对照组。慢性和急性感染组水牛血清 Ｔ Ｎ Ｆα都从感染后第５周开始升高,并分别在第７ 、１５ 、２１ 周和１３ 、１７ 周显著或极显著高于对照组。且反映肝损伤的特征性酶谷草转氨酶（ Ａ Ｓ Ｔ） 、谷氨酸脱氢酶（ Ｇ Ｌ Ｄ Ｈ） 和γ谷氨酰转肽酶（ Ｇ Ｇ Ｔ） 在不同时期均有不同程度的升高。结果提示, Ｎ Ｏ 和 Ｔ Ｎ Ｆα可能参与宿主抗肝片吸虫和介导肝片吸虫诱导肝损伤的过程。     

肝片吸虫诊断抗原提纯方法的研究

用肝片吸虫成虫粗制抗原经葡聚糖凝胶(Sephadex G-200)分离到4个蛋白峰,以间接血凝法(IHA)测定各峰抗原活性,除第Ⅳ峰外,其余各峰均有活性,以Ⅱ、Ⅲ两峰的特异性最强。提纯抗原能检出人工感染10～100个囊蚴14天以上的羊抗体。提纯抗原保存60个月,其效价不变。     

分泌抗肝片吸虫单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用纯化的肝片吸虫可溶性抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选和３次克隆化培养后获得３株分泌抗肝片吸虫单克隆抗体的杂支瘤细胞（３Ａ＿６、３Ｂ＿８、３Ｄ＿５）。３株杂交瘤细胞分泌的特异性单克隆抗体经ＥＬＩＳＡ检测均属ＩｇＧ＿１亚类，上述杂交瘤细胞经反复冻存、复苏和连续传代培养，证实其分泌抗体的性质稳定。     

甘肃省庆阳地区肝片吸虫中间宿主的感染及种类调查

用从甘南绵羊和合水山羊胆囊中收集的肝片吸虫虫卵孵化出毛蚴,实验感染采自合水的各种淡水螺,并用从阳性螺收集的囊蚴感染家兔,确证小土蜗(Galba pervia)和梯状土蜗(G.laticallosiformis)为该地区肝片吸虫的中间宿主。     

肝片形吸虫体内谷氨酸的定性及定量研究

用反相梯度洗脱柱前衍生化荧光检测高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），测得肝片形吸虫体内谷氨酸（ＧＡ）的含量为８２．３０μｇ／ｇ±９．５３μｇ／ｇ虫湿重，虫体尾部ＧＡ含量略高于头部。经体外培养证实，肝片形吸虫能摄取外源性ＧＡ。     

肝片形吸虫及其培养液内花生四烯酸代谢物水平和作用探讨

用体外培养的方法分析了肝片形吸虫及其培养液内花生四烯酸代谢物水平.结果表明,肝片形吸虫虫体匀浆中的PGE2、TBX2和6-keto-PGF1α水平分别为0.93pg/g±0.12 pg/g,0.26pg/g±0.02pg/g和0.43 pg/g±0.09 pg/g;培养液中分别为52.50 ng/L±2.14 ng/L,32.17ng/L±7.18 ng/L和124.81 ng/L±44.33 ng/L;均以PGE2和6-keto-PGF1α为高.提示肝片形吸虫成虫有PGE2、TBX2和6-keto-PGF1α等花生四烯酸代谢物存在,这类代谢物可能对宿主机体有作用.     

基于TPX和CatB4重组蛋白的绵羊肝片吸虫病间接ELISA诊断方法的建立

为了建立早期快速诊断绵羊肝片吸虫病的血清学方法,原核表达肝片吸虫TPX和CatB4重组蛋白.分别以TPX、CatB4重组蛋白作为包被抗原,建立2种检测肝片吸虫血清抗体的间接ELISA方法.采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了筛选.蛋白免疫印迹结果显示,重组蛋白...     

一氧化氮对As_2O_3抑制马立克氏病病鸡肝肿瘤生长的影响

人工复制鸡马立克氏病(MD)病例模型,通过腹腔注射三氧化二砷(As2O3,按体重3.0mg/kg),分别于注射后第35,40和45d观察了马立克氏病病鸡的病理学改变,并检测了肝肿瘤组织一氧化氮(NO)含量,总NOS(T-NOS)、诱导型NOS(iNOS)与构建型NOS(cNOS)活性和iNOSmRNA的表达水平,探讨了NO在As2O3抑制MD病鸡肝肿瘤生长中的作用。结果表明,MD病鸡肝肿瘤组织内的NO含量,T-NOS、cNOS及iNOS的活性增高,iNOSmRNA表达水平升高,As2O3能够显著抑制肝肿瘤生长,使肿瘤组织内的NO含量,T-NOS、cNOS及iNOS活性和iNOSmRNA表达水平降低,并呈现时间效应。证实NO在AsO抑制MD病鸡肝肿瘤生长中发挥着重要作用,这是AsO抗肿瘤作用的机制之一。     

山羊和猪的肉孢子虫种类及其实验感染终末宿主的研究

在云南省家畜肉孢子虫调查中,发现当地山羊、猪各有2种肉孢子虫感染,即山羊犬肉孢子虫(Sarcocystis capracanis)、家山羊犬肉孢子虫(S.hircicanis)、猪人肉孢子虫(S.suihominis)、米氏肉孢子虫(S.miescheriana)。描述了各虫种的形态,并通过实验感染研究了各虫种的终末宿主。     

REV感染的SPF鸡免疫器官中免疫相关因子动态变化的研究

先天性免疫反应是机体抵御病原微生物感染的第一道防线.为了解禽网状内皮组织增生症病毒(REV)感染的SPF鸡早期的天然免疫反应,本研究利用qRT-PCR技术检测了REV感染的SPF鸡主要免疫器官中的免疫应答情况.结果 显示,与病毒未感染组相比,感染鸡免疫器官中天然免疫受体TLR3和TLR7和Ⅱ型干扰素IFN-γ以及Vip...     

刚地弓形虫代谢分泌抗原对山羊IFN-γ、TNF-α、IL-2和IL-4表达水平的影响

为了探索刚地弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)对山羊的免疫保护机制,将山羊随机分为6组,即E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊血清,用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的表达水平.结果显示,各免疫组免疫后IFN-γ、TNF-α、IL一2、IL-4的含量分别为175.40～215.60、89.95～253.80、230.40～301.50、39.20～54.20 pg/mL,而免疫前分男q为14.00～18.75、30.91～42.20、10.75～18.30、20.40～24.60 pg/mL,对照组分别为16.50～36.56、37.75～58.20、11.50～21.75、21.6l～27.60 pg/mL,免疫组在免疫后体内IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量明显升高,均显著高于对照组(P＜0.05).表明,E/SA可引起IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4水平的升高,说明E/SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答.