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为了研究旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶的功能,对GenBank中旋毛虫基因组数据库和旋毛虫EST数据库进行检索,获得旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的cDNA序列并设计引物。以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后测序并进行生物信息学分析。结果显示,成功克隆到3个旋毛虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的cDNA序列(TsTPx1,TsTPx2,TsTPx3)。TsTPx1cDNA含有1个由747个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码248个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质的理论分子质量为28.2ku,理论等电点为9.00。TsTPx2cDNA含有1个由588个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码195个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质理论分子质量为22.1ku,理论等电点为6.52。TsTPx3cDNA含有1个由594个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码197个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质理论分子质量为22.4ku,理论等电点为6.08。TsTPx1、TsTPx2、TsTPx3都具有1个AhpC-TSA结构域和1个1-cys Prx_C结构域。同源性分析表明,TsTPx1、TsTPx2、TsTPx3与其他线虫硫氧还蛋白过氧化物酶的一致性在60%左右。 相似文献
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近三十年来,随着现代科学技术的发展,生物医学领域的许多科技工作者应用先进的生物科学理论和技术,对干扰素进行了广泛而深入的研究,并取得了新的进展。现就干扰素的本质和特性,基因结构和诱导合成,生物功能与表达机理,动物实验及兽医临床应用等问题分述如下。 (一)干扰素的本质和持性 1.干扰素的本质:天然干扰素是具有多种调节功能的糖蛋白,分子量不等,一般在20000左右,具有蛋白质的化学通性。按其抗原性不同,分为α、β、γ三个类型,每个类型根据其氨基酸排列顺序不同,又分为几个亚型。例如,α干扰素有11个以上亚型,它们的基因组成有10~30%的差异,氨基酸序列有20%左右不同;β干扰素有4个以上亚型(IFN—β_1、β_2、β_3、β_4),它们的mRNA分子分别为0.9、1.1、1.2、1.9kb,人β_1干扰素的氨基酸序列如下: 相似文献
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早在1940年Verwey研究金黄色葡萄球菌型特异性抗原时,用化学方法提取到了一种蛋白质,称其为葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A,简称SPA),以后Jensen(1959)、Lofkvist(1963)等相继对其进行了研究,并且都分离到了这种抗原。后来,Grov等(1964)用离子交换树脂的方法对这种抗原成分进行了系统分析研究,不仅证明它是一种蛋白质(含氮量为15.38%)而且指出其氨基酸含量占总量的99%,其中有:亮、缬、脯、丙、苏、甘、丝、谷A、天门冬A乃赖氨酸等10种氨基酸。由于A蛋白具有可与多种哺乳动 相似文献
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科学工作者很早就注意到遭受创伤的青蛙在不干净的水中仍能存活 ,并不受到感染。直到 2 0世纪80年代初期 ,随着蛋白质分离、纯化和鉴定技术的不断提高 ,人们逐渐认识到在青蛙体内存在有抵抗感染的物质———肽抗生素 (peptideantibiotics) ,又称为抗菌肽或抗微生物肽 (antimicrobialpeptide)。最近的研究表明 ,在其他动物、植物及人体内都存在有这一类具有抗菌活性的物质 ,肽抗生素已成为当今生物科学的又一研究新热点。肽抗生素是动物、植物和人体基因组中一段基因编码的一些富含带阳离子氨基酸残基的短肽 ,是生物体内经诱导产生的一种具有… 相似文献
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为了研究旋毛虫组织蛋白酶B的功能,对GenBank中旋毛虫基因组数据库和EST数据库进行检索,获得旋毛虫组织蛋白酶B的cDNA序列并设计引物。以旋毛虫肌幼虫总RNA为模板,进行RT-PCR,将PCR产物克隆到pMD18-T载体后测序并进行生物信息学分析。结果表明,成功克隆到旋毛虫组织蛋白酶B基因(TsCB1)的cDNA序列,TsCB1cDNA含有1个由1 449个核苷酸组成的完整的开放阅读框,编码482个氨基酸残基组成的多肽,蛋白质分子质量理论值为55.1ku,理论等电点为7.66。TsCB1第1~35位氨基酸残基为信号肽序列,有2个潜在的N-糖基化位点,具有1个生长调节素B结构域和半胱氨酸蛋白酶结构域,半胱氨酸残基活性位点被丝氨酸残基所替换,同源性分析表明与其他线虫组织蛋白酶B的一致性在60%左右。 相似文献
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以旋毛虫感染猪血清为抗体探针,对旋毛虫3日龄成虫cDNA文库进行免疫筛选,将获得的阳性克隆进行测序,用分子生物学软件对所得cDNA序列进行了分析.序列分析结果显示,阳性克隆Zh68 cDNA全长为1 372 bp,含有1个1 287 bp的完整的开放阅读框架,编码由429个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为47.5 ku,等电点为8.45.SMART分析表明,1~18位氨基酸为信号肽序列,37~277位氨基酸为典型的丝氨酸蛋白酶胰蛋白酶类结构域,其中His88、Asp142、Ser233为催化中心的3个主要氨基酸残基,78~80位氨基酸为N-糖基化位点(NCS),另外还有6个保守的Cys形成二硫键.BLASTn同源性分析表明,与其他生物丝氨酸蛋白酶的基因序列无明显的同源性,为1个新的cDNA分子.BLASTp蛋白质同源性分析表明,与丝氨酸蛋白酶的同源性为30%左右.Southern-blot杂交表明,此基因在旋毛虫基因组中属于多基因家族,具有基因多态性.cDNA的PCR结果表明,此基因在旋毛虫肌幼虫、新生幼虫及成虫期均有表达. 相似文献
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法国猪伪狂犬病自1970年以来日趋严重,给国民经济造成很大损失,已引起有关部门的重视。法国兽医学者托马等,通过低温在细胞上系列传代,培育出Alfort_(26)弱毒疫苗株,已用于生产实际。 (一)Alfort(26)弱毒株的培育 作者用从患猪伪狂犬病的病猪体分离的Alfort(27)强毒株,在猪肾的PK_(15)、R·P·《D》、R·P·《T·G·》三个细胞系上低温传代而致弱的。在第一代,于含有2%氨基酸的MEM培养液中添加5%的犊牛血清。第二代培养于含有10%的犊牛血清的MEM培养液中。在传代中培养 相似文献
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“一样的古镇,不一样的乌镇。”这句话鲜明地道出了乌镇的别致和神秘。
我在这个有着1300多年建镇史的古镇上行走时,仿佛膛在从古筝里流出来的水中,又如同乘着深沉而又厚重的风。在这里,唐代银杏宛在,六朝遗胜犹存。 相似文献
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捕食性真菌Duddingtonia flagrans杀虫机理是近年来生物防制领域的热点,而对其发酵液中的蛋白质组进行深入分析和研究,有利于揭示D.flagrans杀线虫的生化机制。本研究首次采用基于液质联用的蛋白质组学非标记定量(label free)技术,对线虫幼虫诱导下的D.flagrans发酵液与普通营养菌丝发酵液进行了大规模蛋白质表达相对定量分析。结果,共鉴定出蛋白质258个,其中46个为显著差异表达蛋白质。进一步对差异蛋白质进行GO注释,结果表明,经线虫幼虫诱导的D.flagrans发酵液中差异蛋白参与的蛋白功能和生物学过程更加多样,以催化和结合功能为主,同时还参与感知环境刺激、信号转导、过氧化活性及胞壁合成等过程。进一步分析表明,与对照组相比,过氧化氢酶和三羧酸循环中柠檬酸甲酯合酶前体上调表达加快了有氧呼吸,推测D.flagrans分泌胞外蛋白酶还需要氧化应激。此外,丝氨酸酶与酪氨酸酶前体显著差异表达,可能该类酶是D.flagrans侵染线虫的重要毒力因子。KEGG代谢通路分析表明,差异蛋白还主要参与了糖、脂质和氨基酸等初级产物以及次级代谢物的合成与代谢过程。通过对差异蛋白质组的深入解析和研究,有利于揭示D.flagrans对线虫的作用机理,为应用D.flagrans对线虫生物防控提供了强有力的支撑。 相似文献
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通过对856只犬、636只狐皮肤病病因调查和临床观察,发现犬、狐皮肤病中以螨感染率高,螨和真菌混合感染性皮肤病危害较大。调查结果表明,皮肤病中疥螨病占45.49%,耳痒螨病占20.84%,蠕形螨病占9.22%,真菌性皮肤病占12.36%,维生素和微量元素缺乏性皮炎占5.68%,狐自咬症占4.07%,病毒性皮炎占1.07%,过敏和湿疹占1.67%,其中螨和真菌混合感染性皮肤病达51.84%,同时发现蠕形螨还可通过胎盘感染,从而为防治该病提供了科学依据。研制的癣螨净886擦剂、癣螨净887浴液、癣螨净888注射液和宠物香波对犬、狐皮肤病的治愈率达95.00%以上,对人兽共患皮肤病也有较好的疗效,尤其是癣螨净888注射液对螨、真菌感染性皮肤病均有良好治疗作用,效果优于伊维菌素制剂。 相似文献
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提取猪细小病毒(PPV)YK株基因组DNA,利用PCR技术扩增得到了NS1基因全序列,将其克隆到pMD18-T质粒载体并进行了序列测定和分析。结果表明,NS1基因全长1989bp,编码662个氨基酸。氨基酸序列中含有在PPV复制过程中起重要作用的保守基序GKRN,并有3个潜在的糖基化位点NISN、NFSN和NLTR。PPVYK株的NS1基因与其他PPV毒株NADL-2(4973)株、NADL-2(5075)株、NADL-2(5034)株和Kresse株相比,核苷酸同源性分别为98.3%、99.9%、99.9%和99.7%,氨基酸同源性分别为99.7%、99.7%、99.7%和97.7%。结果说明,NS1基因具有高度保守性。 相似文献