弓形虫排泄分泌抗原研究的新进展

简要介绍了弓形虫排泄分泌抗原的制备及其组分,对近几年国内外排泄分泌抗原在免疫功能及应用方面的研究进展加以综述,并对其在疫苗研制上的成果和前景进行了探讨,旨在为弓形虫病疫苗的研制提供参考。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——原头节排泄分泌抗原的免疫原性

本文首次在绵羊阐明了细粒棘球绦虫原头节排泄分泌(ES)抗原及原头节可溶性粗抗原的免疫原性。应用体外培养技术制备原头节ES抗原,用超声波粉碎法制备原头节可溶性粗抗原。将抗原与等体积弗氏不完全佐剂乳化后经肌肉及皮下分两次免疫绵羊,最后一次免疫后14天攻击感染细粒棘球绦虫虫卵1000枚,攻击感染后7个月剖检试验羊。结果表明,原头节ES抗原在绵羊诱导的免疫保护力(减囊率)达92.07％,原头节可溶性粗抗原为74.89％。本实验还观察了血清抗体应答、T细胞应答与免疫保护之间的关系。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——六钩蚴排泄分泌抗原的免疫原性

本实验应用体外培养方法制备细粒棘球绦虫六钩蚴排泄分泌(ES)抗原,将其与弗氏不完全佐剂乳化后免疫绵羊2次,最后一次免疫后2周每只试验绵羊攻击1000枚虫卵,攻击后7个月剖杀试验羊观察肝肺包囊寄生情况。结果表明六钩蚴ES抗原具有很好的免疫原性,诱导的免疫保护力(减囊率)达96.04％;混合抗原为93.39％,囊液抗原为76.21％,囊壁抗原为30.62％。免疫后试验羊的抗体滴度与免疫保护力之间存在正相关关系。     

弓形虫速殖子排泄分泌抗原的SDS－PAGE分析

弓形虫速殖子排泄分泌抗原的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析马军武，杜重波，张德林，李惠萍（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）弓形虫速殖子排泄分泌抗原（Ｅ／ＳＡ）是虫体在入侵宿主细胞及细胞内外增殖游离过程中向血液、体液或培养上清液释放的可溶性抗原成份（Ｃｈ...     

弓形虫代谢分泌抗原对猪T细胞亚群的影响

为了研究弓形虫代谢分泌抗原对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG(未乳化)组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组.分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集仔猪外周血,用流式细胞仪对各试验组外周血中CD4+及CD8+T淋巴细胞亚群的动态变化规律进行检测,用IHA对抗弓形虫抗体水平做检测.结果显示,弓形虫代谢分泌抗原免疫仔猪后第4周,免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体效价与对照组相比均有大幅度升高;感染后第1周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值较感染前有不同程度降低,感染后第2周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值上升至免疫后水平,CD8+水平下降,感染后特异性抗体效价进一步升高.表明,弓形虫代谢分泌抗原能够提高仔猪外周血CD4+及CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体水平.     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——六钩蚴排泄分泌抗原及原头节可溶性粗抗原的SDS-PAGE

本文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)首次对细粒棘球绦虫六钩蚴排泄分泌(ES)抗原的多肽组分进行了分析并同时对牦牛源棘球蚴原头节可溶性粗抗原的多肽组分进行了分析。应用10％凝胶,采用垂直板型电泳、考马斯亮蓝R-250染色进行SDS-PAGE的结果表明,六钩蚴ES抗原至少由14种多肽组分组成,分子量范围270～17.5KD,其中主要组分6种。原头节可溶性粗抗原至少由25种多肽组分组成,分子量范围230～17KD,其中主要组分13种。本项研究为功能性抗原的进一步分析、分离奠定了基础。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原的研究──六钩蚴排泄分泌抗原的反应原性

本实验应用体外培养方法制备细粒棘球绦虫六钩幼排泄分泌（ＥＳ）抗原，应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）首次对六钧蚴ＥＳ抗原的反应原性进行了初步分析。以５μｇ／ｍｌ包被反应板分别与已知阳性、阴性血清；人工感染血清，免疫血清，疫区屠宰绵羊血清；肝片吸虫、细颈囊尾蚴以及边虫感染的绵羊血清反应，结果表明六钩蚴ＥＳ抗原具有较好的反应原性。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００层析对抗原有一定的纯化作用。纯化六钧蚴ＥＳ抗原可望用于绵羊棘球蚴病的免疫诊断。     

多头绦虫抗原特性的研究——原头节及其排泄分泌抗原的免疫原性

应用多头蚴原头节可溶性抗原和将原头节进行体外短期培养后获得的排泄分泌（ＥＳ）抗原，以４ｇ／Ｌ抗原量与等体积的白油－司班佐剂乳化后，按每次２ｍＬ剂量对试验羔羊进行３次免疫。于最后一次免疫后２周，攻击感染２５００个多头绦虫虫卵，攻击后２２５ｄ剖杀各组羔羊。结果感染对照组羔羊全部感染了多头蚴，所含原头节为圆形或椭圆形，大小为０．３９０～０．４１０ｍｍ×０．３９５～０．４１５ｍｍ。原头节可溶性抗原及其ＥＳ抗原免疫组有２／３羔羊获全保护；１／３羔羊未能获保护，但其多头蚴包囊的大小、原头节数目及大小均小于感染对照组。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——六钩蚴排泄分泌抗原、原头节、囊液及囊壁抗原的二维电泳分析

应用二维电泳、考马斯亮蓝G-250染色对细粒棘球绦虫六钧蚴排泄分泌抗原、原头节、绵羊及牦牛棘球蚴囊液以及囊壁抗原进行了初步分析。结果5种抗原分别显示多肽斑点108、64、85、124及83个;其中特异斑点分别为44、40、46、87及37个。对六钩蚴ES抗原多肽斑点的分析尚属首次。     

伊氏锥虫排泄分泌抗原特异性成分分析

伊氏锥虫排泄分泌抗原特异性成分分析谢超孙恩贵刘俊华王祥生（解放军农牧大学军事兽医研究所长春１３００６２）伊氏锥虫排泄分泌抗原（ＥＳＡ）是伊氏锥虫在繁殖阶段所释放的代谢产物。近年来的研究表明，锥虫ＥＳＡ在抗感染中起着重要作用，而且在一定程度上对宿主有免...     

猪弓形虫病的诊治

１９９８年７月,怀安县第六屯乡第九屯村大约克夏和长白猪相继发生以高热、腹式呼吸、眼圈发红、双耳发绀、食欲减退或废绝为特征的疾病,幼猪多发,最后呈败血症死亡。发病情况存栏猪２０２头,其中有两次购入的幼猪８５头于７月２０日发病,至９月２３日相继发病６５头...     

猪弓形虫病的治疗

几年来,笔者对弓形虫病进行药物治疗试验取得满意效果,共治疗4571例,治愈率达95％以上。具体治法 六甲氧嘧啶、磺胺嘧啶钠、10％葡萄糖、维生素C(5×10)混合后进行耳静脉注射。对发病初期的猪用药1次,体温即可恢复正常,可以吃少量食物,到第3天食欲基本如常。病重的猪只注射1次后,紫斑症状退掉,开始退烧并能进食,治疗2～3次痊愈,治愈率达95％以上。对本病的预防可用乙胺嘧啶片,每12.5kg服2片(0.1g),连用3次,可起到预防和治疗的效果。     

猪弓形虫病的诊治

20 0 3年6～10月间,江西省赣州市部分猪场的猪出现大批死亡,其主要特征是病猪体温升高,耳、颈、腹部及四肢内侧皮肤呈蓝紫色,死亡率达6 0 %。经疫情调查、对病死猪剖检及实验室检验,确诊为猪弓形虫病。1　流行情况和临床症状自2 0 0 3年6月中旬某猪场发生猪不明原因死亡后,陆续又有12个养猪场发生疫情。发病猪场存栏猪12 4 6头,发病2 86头,死亡134头,各种年龄的猪均可受到感染而发病,大多数病猪精神沉郁,厌食,体温升高至4 1～4 2℃,有的母猪发生流产、死产。随机抽查4 2头发病成年猪和仔猪,主要表现呼吸困难,耳、颈及腹部四肢内侧皮肤呈蓝紫…     

Dot-ELISA诊断猪弓形虫病的研究

本文报道了应用硝酸醋酸混合纤维素薄膜作载体进行Dot-ELISA试验诊断猪弓形虫病的试验方法的建立。试验中,封闭液、洗涤液和稀释液采用levy等(1987)方法并加以改进,加入EDTA并提高了反应温度,使得在“快诊膜”做成后35分钟内完成整个试验。此外,还做了不同载体、不同底物和不同反应时间对试验结果的影响试验。通过对160头份猪血清进行Dot-ELISA、PPA-ELISA和IHA检测,其阳性检出率分别为38.13％、30.63％和23.75％。且不与猪囊虫、猪旋毛虫病和猪瘟发生类属反应。初步证实了Dot-ELISA优于PPA-ELISA和IHA。具有快、敏、特、简等优点,便于在基层推广应用。     

猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的抗原性分析

猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的制备国内外都曾有过报道,但对用作诊断抗原的猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的抗原性的研究较少。我们应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫电泳(IE)对猪囊尾蚴排泄分泌蛋白进行了分析,并用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)评价了其抗原性。(一)材料与方法1.材料:(1)粗制囊液抗原:从新鲜囊尾蚴中抽取,3500r/min离心30分钟,保留上清液,低温存放。(2)排泄分泌抗原:48、96、105、204小时的囊尾蚴孵育液:48、96、105的头节孵育液,均     

用弓形虫代谢分泌抗原制备间接血凝诊断试剂的研究

用弓形虫代谢分泌抗原 (E/SA)致敏绵羊红细胞制备间接血凝诊断试剂 ,进行人和动物弓形虫病血清抗体检测 ,并用弓形虫虫体抗原致敏的红细胞间接血凝诊断试剂进行对照试验。结果表明 ,在弓形虫阴性、阳性血清检测中 ,弓形虫E/SA间接血凝诊断试剂与弓形虫虫体抗原间接血凝诊断试剂的符合率为 10 0 % ;在人工感染兔血的检测中 ,E/SA致敏的间接血凝诊断试剂比虫体抗原致敏的间接血凝诊断试剂的阳性检出时间提前 2d ,显示弓形虫E/SA间接血凝诊断试剂具有早期诊断和生前诊断的应用价值     

循环抗原与弓形虫病的诊断

近几年的研究表明,弓形虫(Toxoplasma gondii)循环抗原(Circulating anti-gens,CAg)在弓形虫病的血清学诊断中有着重要的意义。特别是弓形虫感染早期、急性期或活动期以及免疫损伤和免疫缺陷(如AIDS)病人的感染。检测弓形虫CAg作为临床血清学诊断的依据已经愈来愈受到研究人员和临床医生的重视。本文以现有的资料结合笔者的体会就弓形虫病诊断所面临的问题和CAg的诊断学意义等予以评述。     

猪暴发性弓形虫病的诊治

山东省临沂市某猪场饲养种猪 2 5头 ,生长肥育猪 378头。2 0 0 0年 9月 2 7日生长育肥猪突然发病 ,发病率高达 43 % ,死亡率为 16 %。根据临床症状、病理剖检、实验室检查确诊为猪弓形虫病。1　临床症状病猪精神沉郁 ,食欲减退以至废绝 ,多数粪便干燥 ,少数排黄色稀粪 ,眼结膜充血、肿胀、黄疸 ;多数病猪卧地不起 ,少数呈犬坐姿势 ,腰部瘫软 ,后肢麻痹 ,运动失调 ;体表淋巴结 ,尤其是腹股沟淋巴肿大 ;体温 40 .5— 42 .0℃ ,呈现稽留高热 ;呼吸困难 ,多数呈腹式呼吸 ,70次 /ｍｉｎ左右 ,鼻镜干燥 ,有的流少量鼻液 ,并出现咳嗽和呕吐。病情严…     

肥育猪弓形虫病的诊治

肥育猪弓形虫病的诊治１９９６年１０月，某商品猪场１６６０多头肥育猪暴发了猪弓形虫病，经用复方磺胺嘧啶治疗后均痊愈。临床症状猪食欲减少，体温４０．０～４２３℃，呈稽留热型；少数猪呈腹式呼吸，驱赶躺卧猪有５％左右出现咳嗽；少数猪腹股沟淋巴结肿胀。剖检变...