SDS-PAGE、凝胶扫描、紫外吸收技术对牛白血病病毒抗原组份研究的应用

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)自六十年代产生以来,已成为蛋白质核酸研究的重要技术手段。特别是近年来,在此技术基础上产生的探针技技、印迹技术及指纹图技术已成为分子生物学领域不可缺少的研究手段。自1984年以来,我们应用SDS-PAGE结合凝胶扫描、紫外吸收法对牛白血病病毒(BLV)的抗原组份、各组份的分子量、相对百分含量及绝对含量进行了测定研究。通过对99批BLV抗原样品近千次测试结果表明,该技术在抗原组份研究中具有重要意义和实用价值。它可以为抗原的质量检测提供重要的理化参数,也可以为指导抗原的生产和制备工艺以及进出口的商品抗原的质量评价提供了一种     

应用紫外分光光度计对口蹄疫病毒纯化抗原的检测分析

应用紫外分光光度计对口蹄疫病毒纯化抗原的检测分析肖昭彭张强杨福荣（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）由ＲＮＡ和蛋白外壳组成，其中核酸占１／３，蛋白占２／３。ＦＭＤＶ经细胞培养后，有很多细胞蛋白及杂质，在理化分析、免疫化学...     

不同浓度羊脑组织抗原对超免疫马抗狂犬病血清效价及神经变态反应的影响

８０年代初，我所就开始用羊脑组织狂犬病毒抗原超免疫马生产抗狂犬病血清。但由于使用的抗原浓度较大，超免疫马神经变态反应发生率达１０％～１５％，马匹损耗很大。为此，在保证抗原最佳免疫原性的情况下，为降低神经变态反应发生率，在基础免疫后，我们通过第１，第２...     

抗原的结构与功能

外源物质进入动物机体,体内吞噬细胞就会发起进攻,吞噬和消灭这些异物。参与这一过程的最重要的细胞是嗜中性白细胞(以下简称为NP)和巨噬细胞(Mф)。NP最先移到异物侵入部位。如果NP能够消灭全部异物就不会引起免疫应答,因为经NP消化后就不会留下能够去刺激免疫系统的物质。本文就抗原的特征及抗原传递方面的基础内容概述如下。 嗜中性白细胞由于多种原因不总是能够完全对付侵入的异物。当异物嵌入到死组织堆中,吞噬细胞就无能为力。有些抗原,如流产布氏杆菌(Brucella abortus)可对NP具有毒性作用。这些细菌在其自身灭亡之前可将嗜中性白细胞杀死。由于NP上述的限制作用,动物机体把Mф作为第二道防御线以抵抗异物的进一步侵入。Mф移动比NP要慢得多,但活     

抗原表位鉴定方法的研究进展

抗原表位作为具有重要生物学和免疫学的功能基团是制备单克隆抗体、疫苗研制、诊断试剂和药物开发等方面研究的靶标物质.对抗原表位的深入发掘和研究有助于新型药物开发、研发诊断制剂及方法和设计新型疫苗.随着分子信息学、基因组学和蛋白质组学等交叉学科的快速发展,针对预测和筛选不同抗原表位发展了一系列全新的抗原表位方法和模型,极大简...     

多头绦虫抗原特性的研究——原头节及其排泄分泌抗原的免疫原性

应用多头蚴原头节可溶性抗原和将原头节进行体外短期培养后获得的排泄分泌（ＥＳ）抗原，以４ｇ／Ｌ抗原量与等体积的白油－司班佐剂乳化后，按每次２ｍＬ剂量对试验羔羊进行３次免疫。于最后一次免疫后２周，攻击感染２５００个多头绦虫虫卵，攻击后２２５ｄ剖杀各组羔羊。结果感染对照组羔羊全部感染了多头蚴，所含原头节为圆形或椭圆形，大小为０．３９０～０．４１０ｍｍ×０．３９５～０．４１５ｍｍ。原头节可溶性抗原及其ＥＳ抗原免疫组有２／３羔羊获全保护；１／３羔羊未能获保护，但其多头蚴包囊的大小、原头节数目及大小均小于感染对照组。     

猪囊虫B抗原的研究进展

近年来,有关科技人员对猪囊虫抗原进行了研究。认为猪囊虫抗原成分十分复杂,头节和囊壁混合的匀浆液中含有20余种蛋白质,其中有8种以上的抗原性成分。Flisser(1980)把猪囊虫的头节和囊壁匀浆粗提后,通过免疫电泳对116份阳性血清所产生的沉淀线进行分析。结果表明,pH8.6等电成分B抗原可同84％阳性血清反应,在被阳性血清识别频率方面,居诸抗原之首。用从猪体收获的囊虫提取物接种小鼠时,B抗原也是被超免鼠血清最频识别的抗原。因此,在猪囊虫病的免疫学研究中,B抗原是十分引人注目的。 (一)B抗原的提纯 Guerra等人(1982)对B抗原提纯作了研究。首先是将去囊液的     

己烯雌酚人工抗原的合成研究

采用三步反应合成了己烯雌酚人工抗原 ,为己烯雌酚酶免疫检测技术的进一步研究奠定基础。试验结果证实 ,己烯雌酚及其衍生物存在着顺反异构转化现象 ,酸碱处理是降低交联前衍生物中顺式体比例的有效方法 ;经三步合成 ,成功地制备出了人工抗原 ;人工免疫原及包被原的最适结合比例分别为 1∶2 8和 1∶7。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——六钩蚴排泄分泌抗原及原头节可溶性粗抗原的SDS-PAGE

本文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)首次对细粒棘球绦虫六钩蚴排泄分泌(ES)抗原的多肽组分进行了分析并同时对牦牛源棘球蚴原头节可溶性粗抗原的多肽组分进行了分析。应用10％凝胶,采用垂直板型电泳、考马斯亮蓝R-250染色进行SDS-PAGE的结果表明,六钩蚴ES抗原至少由14种多肽组分组成,分子量范围270～17.5KD,其中主要组分6种。原头节可溶性粗抗原至少由25种多肽组分组成,分子量范围230～17KD,其中主要组分13种。本项研究为功能性抗原的进一步分析、分离奠定了基础。     

高浓度口蹄疫病毒抗原的稀释试验

用预备试验初选的 4种稀释剂a、b、c、d ,对经浓缩培养法繁殖的牛、猪O型口蹄疫病毒进行稀释 ,使其与普通毒 (对照 )浓度相当。然后将其与普通毒一起在不同温度下放置不同时间后 ,测定TCID50 ,并对测定结果进行方差分析和多重比较。结果显示 ,4种稀释剂稀释的病毒TCID50 存在显著差异 ;a和b稀释的病毒TCID50 之间无显著差异 ,但均显著高于c和d稀释的病毒TCID50 ;a和b稀释的病毒与普通对照毒的TCID50 也无显著差异。表明 ,a和b均可用于稀释口蹄疫病毒抗原 ,考虑到成本 ,宜选用b。     

青海蟾蜍血清蛋白质成分的电泳分析

通过对青海蟾蜍血清进行蛋白质醋酸纤维薄膜电泳分析 ,发现生活在高海拔地区的青海蟾蜍与东北蟾蜍的血清蛋白质种类、相对含量和电泳泳动度都基本一致 ,这为两地蟾蜍在药用资源上的互用提供了参考依据     

昆明小鼠蛋白质营养需要的研究

昆明小鼠蛋白质营养需要的研究景志忠，王自强，戈银生，严吉红，刘玉玲，张永兴，高世杰，李启祥，瞿惠玲（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）（甘肃省科学技术委员会）（甘肃省畜牧局）营养是生命体赖以存在的物质基础，而蛋白质含量是营养高低的重要标志。随...     

弓形虫排泄分泌抗原研究的新进展

简要介绍了弓形虫排泄分泌抗原的制备及其组分,对近几年国内外排泄分泌抗原在免疫功能及应用方面的研究进展加以综述,并对其在疫苗研制上的成果和前景进行了探讨,旨在为弓形虫病疫苗的研制提供参考。     

循环抗原与弓形虫病的诊断

近几年的研究表明,弓形虫(Toxoplasma gondii)循环抗原(Circulating anti-gens,CAg)在弓形虫病的血清学诊断中有着重要的意义。特别是弓形虫感染早期、急性期或活动期以及免疫损伤和免疫缺陷(如AIDS)病人的感染。检测弓形虫CAg作为临床血清学诊断的依据已经愈来愈受到研究人员和临床医生的重视。本文以现有的资料结合笔者的体会就弓形虫病诊断所面临的问题和CAg的诊断学意义等予以评述。     

抗原表位预测方法的研究进展

概述了B细胞线性表位、B细胞构象性表位、CTL表位及Th表位等抗原表位预测方法的研究进展,并对每种表位预测方法的预测结果进行了比较,旨在为从事抗原表位研究的人员提供理论参考.     

Dot-ELISA检测犬瘟热病毒抗原的研究

用建立的三抗体夹心法Dot-ELISA检测犬瘟热病毒(CDV)抗原,其抗原最低检出量为1.15μg/mL(0.57625ng/点),经与常规ELISA对104份自然感染犬的血液白细胞样本,60份眼结膜分泌物样本,73份脾、肝、淋巴结等脏器样本进行检测,检出的阳性率分别为92.31%、66.67%、83.56%和90.72%、63.29%、81.86%;两种方法检出的总阳性率分别为83.54%(198/237)和80.17%(190/237),总阳性符合率为95.96%,表明两者呈高度正相关(r=0.92,P＜0.01).Dot-ELISA和AGID对样本检测总阳性符合率为24.89%,呈差异极显著(X2=340.89,P＜0.01).经电子显微镜观察验证比较,三抗体夹心法Dot-ELISA检测的可信度为94.74%.     

蓝舌病病毒灭活抗原的研究

蓝舌病是危害养羊业最严重的一种世界性传染病。其病原为蓝舌病病毒,属于呼肠弧病毒科环状病毒属。截止目前该病毒发现22个血清型。这种多型性对诊断和防制本病带来一定的困难。经过多年的研究,许多国家在本病的诊断方面取得了显著成绩。多种血清学诊断方法研制成功,群特异性(group-specificity) 方法(琼脂扩散试验、改良补体结合试验、免疫荧光方法、酶联免疫吸附方法)和型特异性(type—specificity)方法(中和试验、红血球凝集抑制试验等)在生产中得到推广应用。但上述方法中有时使用活的病毒,对无蓝舌病的国家是一种潜在性的危险。为此,开展了病毒免疫活性的灭活方法的研究。本文介绍了几种灭活方法对比实验内容,并研制成一种可供诊断用的灭活病毒,为制     

供人和动物消费的合成蛋白质

本文作者所工作的单位是选择半知真菌中的一科作为合成蛋白质的材料。其所以不选择酵母是因为酵母的核酸含量很高,其核酸的特殊组成指明,这类物质只有在下述两种情况下可以应用: 第一、酵母中含硫氨基酸的比例很低,必需补充蛋氨酸才能获致满意的生物学价值。未     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究——原头节排泄分泌抗原的免疫原性

本文首次在绵羊阐明了细粒棘球绦虫原头节排泄分泌(ES)抗原及原头节可溶性粗抗原的免疫原性。应用体外培养技术制备原头节ES抗原,用超声波粉碎法制备原头节可溶性粗抗原。将抗原与等体积弗氏不完全佐剂乳化后经肌肉及皮下分两次免疫绵羊,最后一次免疫后14天攻击感染细粒棘球绦虫虫卵1000枚,攻击感染后7个月剖检试验羊。结果表明,原头节ES抗原在绵羊诱导的免疫保护力(减囊率)达92.07％,原头节可溶性粗抗原为74.89％。本实验还观察了血清抗体应答、T细胞应答与免疫保护之间的关系。     

紫外吸收光谱在研究兽药中应用的概况

兽用药品检查中紫外吸收光谱法的应用已经达到与比色法相似的普及程度。除了以测定药物的紫外吸收作为定性鉴别的一种依据外,药物的紫外吸收系数与沸点、熔点、比旋度、折射率等也同样被看成是控制药物纯度的常规物理常数之一。与红外吸收光谱法比较,紫外吸收光谱法具有单色度高和灵敏度高的优点,因此,用于药物的含量测定更为广泛。对一般纯的物质,只要用适宜的溶剂,制成适当浓度的溶液,在特定的波长直接测定吸收度或吸收