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ABC-Dot-ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒 总被引:2,自引:0,他引:2
建立了ABC-Dot-ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的方法,其最佳反应条件是包被液为0.05 mol/LpH 9.6的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(CBS),兔抗IBV IgG的最佳工作浓度为180,抗原的最佳浓度为1800,封闭剂选用0.01 mol/L pH 7.4含30mL/L白明胶的PBS,B-AgG和ABC-HEP的最佳工作浓度为1200.用ABC-Dot-ELISA与琼脂扩散试验(AGP)比较检测255份自然发病鸡和20份人工感染雏鸡的口咽拭子、气管、肺、肾,前者的检出率远高于后者. 相似文献
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通过生物学特性研究 ,验证了分离自沈阳地区的SY毒株确实为 1株鸡传染性支气管炎病毒。病毒中和试验表明 ,SY血清型不同于参考毒株T、H52 、M41及国内其他流行株如HD、XB、DB等 ;S1基因序列分析表明 ,SY核苷酸序列及推导的氨基酸序列与参考毒株Beau、M41、H12 0 、N1 62、Gray、6/ 82和Ark99等毒株的同源率都低于 80 % ,进化关系与各参考毒株也相距甚远 ,糖基化位点出现 3个新位点 ,氨基酸疏水性区域也存在差异。 相似文献
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叙述了国内外对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)呼吸道病变型、肾病变型及腺胃病变型的研究和分类;IBV的复制及纤突蛋白S;S1基因变异和重组;IBV分子生物学诊断技术;IBV核蛋白免疫的研究等. 相似文献
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近年来北京某些养鸡场发生鸡传染性支气管炎。鸡龄多为15~30天的鸡群,死亡率在20%左右,大多数发病鸡都曾用传支H_(120)毒株进行过免疫,也未能控制该种疫病的发生。中国兽药监察所中海动物保健科技公司从某鸡场送检病料中分离出1株病毒,这株病毒能在鸡中连续传代,其毒价可达EID_(50)≥10~(-6·5)。用第5代鸡胚毒回归鸡体,可出现明显的临床症状,并于5~6天内死亡,剖检可见明显的肾脏肿大,肺脏病变不明显,与野外自然发病鸡的病变大体一致。据文献报道材料、流行病学、临床观察和病理变化分析,怀疑某鸡场发生的鸡传染性支气管炎为肾型。 相似文献
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针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)N基因片段设计并合成了1对引物,将构建的重组质粒作为阳性标准品,成功建立了检测IBV核酸的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法。结果显示,该方法的线性关系好,标准曲线的相关系数达0.998 3;最低可以检测到1×101 copies/μL的核酸模板;与常见禽源病毒新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒、马立克氏病病毒均不发生交叉反应,重复性试验的变异系数小于3%。应用建立的方法对人工感染IBV的20只试验鸡的40份气管和肾样品中的病毒核酸进行检测,结果显示,攻毒后第5和第7天肾中病毒含量高于气管,证实了临床表现与病毒载量之间的关系。结果表明,建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于IBV的病原检测及定量分析。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其致病性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
《中国兽医科学》2019,(7)
本研究从江苏省某鸡场疑似鸡传染性支气管炎(IB)的病料中,利用SPF鸡胚尿囊腔接种的方法分离出1株传染性支气管炎病毒(IBV),命名为CK/CH/JS/TZHY48。经RT-PCR检测,该株IBV的S1基因全长1 638 bp。遗传进化分析显示,分离株属于基因Ⅵ型,与常规疫苗株H120和H52的同源性较远。分离株对鸡胚有明显的致矮小化作用;对新城疫病毒有显著的干扰作用。动物回归试验结果显示,该分离株对7日龄SPF鸡的发病率为100%,致死率为40%,发病鸡出现气管啰音,甩头流鼻涕等呼吸道症状;病死鸡的剖检病理变化主要表现为肾苍白肿大,花斑肾,有大量明显的白色尿酸盐沉积,气管环出血。本研究可为IBV的遗传进化、致病机制以及免疫防控提供参考。 相似文献
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用建立的斑点免疫金银染色(DotIGSS)法检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗原,确定兔抗IBV血清工作浓度为1∶400,SPA胶体金探针的工作浓度为1∶80,该法对纯化IBV抗原的最低检出量为0.4314ng/点。用DotIGSS与斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)同时检测15只人工感染IBV鸡的气管、肺、肾病料,IBV阳性检出率均为100%;对32份疑似IBV感染鸡病料检测,IBV阳性检出率分别为34.5%和31.0%,阳性符合率为93.3%(P>0.05)。 相似文献
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天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎( GIB) ,并分离出IBV JB9702 株,HA 效价为212,EID50 为10 -6.81/0 .2 m L。病毒干扰试验中,IBVJB9702 + NDV LaSota接种鸡胚HA 效价为24~6 ,LaSota 接种鸡胚HA 效价为210~11 ;用IBV JB9702 病毒液1∶10 稀释后感染经IBV H120 弱毒疫苗免疫雏鸡,发病8/10 ,死亡3/10 。 相似文献
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用RT PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)SC株S1基因 ,连接到 pMD 18 T载体上 ,克隆后进行了核酸序列分析 ,证实SC株S1基因与基因库中收录的国外毒株H12 0和M 4 1的同源性较低 ,分别为 81.1%和 80 .0 % ,而与国内JX990 1株的同源性达到 91.3% ,初步证实国内存在IBV新毒株。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒分子变异机理和免疫机理的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
为阐释鸡传染性支气管炎病毒(avian infectious bronchitis virus,IBV)的高变异特性及其原因,从IBV的不同病变型、分子变异及免疫机理几方面概述了IBV的研究进展,提出了IBV基因组突变、免疫压力和不同毒株基因组间的同源重组所导致的病毒血清型、基因型和组织嗜性的改变是造成免疫失败的主要原因。 相似文献
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甘肃省河西地区部分鸡场 (户 )自 1997年陆续发生以蛋用鸡输卵管囊肿为主要特征的疾病 ,经流行病学、临床症状、剖检变化及实验室检验 ,确诊为传染性支气管炎 (IB)。1 发病情况养鸡场 (户 )蛋用鸡进入产蛋期 ( 2 0— 38周龄 )后陆续出现个别鸡腹部膨大及呼吸道症状 ,发病数随蛋用鸡周龄的增加而逐渐增多。据调查 ,某养鸡户饲养蛋用鸡 40 0 0余只 ,因本病死亡、淘汰 487只 ,随机取 15只鸡病料进行IB琼脂扩散试验 (AGP) ,其阳性率为 10 0 % ,发病率为 12 .2 %。在调查的 5批鸡群中 ,用新城疫 (ND)、减蛋综合征 (EDS)及IB联苗进… 相似文献
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采用RTPCR方法扩增了12株鸡传染性支气管炎病毒中国分离株的全长S1基因,并进行了序列分析。通过与GenBank中登录的其他IBV参考毒株S1基因序列比较,进行了系统进化分析。结果表明,12株分离毒株属于同一个进化群的2个不同进化亚群。其中11株分离株与国内一些分离株亲缘关系最近,属于同一进化亚群,而广西分离株GX041则与欧洲毒株4/91亲缘关系较近,属于另一亚群。这些结果说明,中国各地的流行毒株变异较大,实际免疫中要根据流行毒株的特性选择合适的疫苗株来进行。 相似文献