单克隆抗体技术诊断地方性牛白血病的研究

目前,用于牛白血病诊断的方法很多,但尤以血清学试验检测特异性抗体是诊断BLV感染最实用、经济、快捷和高度敏感的方法,如免疫扩散试验(ID)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)等方法已被广泛应用。但研究结果表明,并非所有BLV感染的抗体阳性牛均发展成为肿瘤,其发病率低于感染牛中的5％(Burng等1980),因此在BLV感染率低的地区,可以将抗体阳性牛屠杀,以达到净化牛群的目的,而在BLV感染率高的地区这样做造成重大经济损失。目前,国外已使用单克隆抗体技术诊断地方性牛白血病。     

牛白血病及其诊断

牛白血病是以淋巴细胞的异常增生为主要特征的肿瘤性疾病,牛最多发。据报告,欧洲全区,南北美洲及亚洲一部分地区的国家,均有本病发生。一般认为,本病的分布几乎遍及全球。根据Bendixen的研究,牛白血病大致分为流行型(地方型)及散发型两种。流行型是由牛白血病毒(BLV)引起的传染病,多发地区的北美及欧洲,近年对本病的研究十分     

民主德国牛白血病防治措施

除了布氏杆菌病外,牛白血病给民主德国一些地区的畜牧业生产造成极大损失。每年损失达2,400万马克,且有增长的趋势。为了避免这种损失,要采取防治措施,阻止白血病的进一步传播和保护至今尚未怀疑的牲畜,以便逐步建立无白血病的畜群。 民主德国根据防治肺结核和布氏杆菌病的经验,准备采取适当的措施防治牛白血病。现     

牛白血病琼脂免疫扩散诊断的研究

牛白血病是以淋巴细胞的异常增生为主要特征的肿瘤性疾病。我国自1976年发病以来,疫情且有扩大蔓延的趋势。为制定防制措施,作者自1981～1983年间,使用国内自己分离的病毒制备的混合抗原,在7个农牧场对1466头奶牛进行了琼脂免疫扩散诊断的试验研究,获得了较为满意的结果。     

禽流感的诊断技术与防制措施

禽流行性感冒 (ａｖｉａｎｉｎｆｌｕｅｎｚａ ,ＡＩ)简称禽流感 ,是由正黏病毒科流感病毒属Ａ型流感病毒引起的禽类传染病。高致病性禽流感 (ＨＰＡＩ)被国际兽疫局 (ＯＩＥ)列为Ａ类传染病。禽流感病毒 (ＡＩＶ)可感染几乎所有野生禽及家禽 ,且和其他动物的流感有紧密联系 ,甚至威胁着人类的健康[1] 。ＡＩ的暴发和流行 ,给养禽业造成了巨大的经济损失。所以 ,世界各国对ＡＩ的早期诊断和防治都很重视。近年来随着诊断技术的不断改进和发展 ,血清学试验技术和分子生物学技术在ＡＩ的快速诊断、流行病学调查、免疫监测以及病原学研究等方面…     

青海省牛结核病监测情况及防制对策

结核病是由分枝杆菌引起的一种人畜共患的慢性传染病 ,其病原有 3种 ,即结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、禽分枝杆菌 (牛分枝杆菌对乳牛的致病力最强 ,黄牛次之 )。各型分枝杆菌会交叉感染不同的宿主 ,其中牛分枝杆菌的易感染宿主尤为广泛 ,人常因饮用未经消毒的结核病牛所产的乳汁 ,或接触病牛及其污染物而被感染。有资料显示 ,目前全球约有2 0 0 0万结核病人 ,其中我国就有 6 0 0多万患者。据1 999年卫生部门调查 ,城市儿童患结核病的病例明显高于农村 ,这不能不让人联想到与饮用不安全的牛奶有关。由此可见 ,控制和净化乳牛结核病是关系人民群…     

猪伪狂犬病的诊断及防制

伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起一种人畜共患的急性传染病 ,成年猪感染后症状轻微 ,很少死亡 ,但感染母猪可将病毒传给胎儿 ,引起流产和死产。仔猪发病率和死亡率高达 10 0 %。1　发病情况1999年 8月 ,某新建猪场引进 63头妊娠母猪。当时猪场基建还未完成 ,这批猪在建设施工条件下饲养 ,10月初有 18头母猪顺利产下 168头仔猪 ,仔猪生长状况良好。 10月 16日有1窝 (共 9头 ) 6日龄仔猪发病 ,主要表现严重腹泻 ,并出现神经症状 ,72ｈ全部死亡。接着其它哺乳仔猪出现类似发病情况 ,其中最小的为 2日龄 ,最大的为 18日龄。 6周内有 48窝共 3 15头…     

单克隆抗体探针在地方流行性牛白血病诊断中的应用研究

应用3批牛白血病病毒(BLV)糖蛋白(gp)抗原的单克隆抗体(MAB)探针(Probes),分别对1172头奶牛淋巴细胞样品进行了BLV抗原检测;还用琼脂免疫扩散(AGID)和酶联免疫吸附(ELISA)试验对这些奶牛的血清样品进行BLV抗体检测,作为MAB探针检测试验的回归对照。结果是3批探针对BLV洁净牛群抗原检测全部阴性;BLV污染群的1072头奶牛淋巴细胞样品的BLV抗原检测阳性率分别为39.1％,39.2％和39.3％;检出符合率达99.5％(McNemar检验P>0.05)。AGID和ELISA试验对BLV抗体检出阳性率分别为32％和41.1％。抗原和抗体检出的符合率在洁净群为100％;在污染群中分别为82.6％和84.5％。其结果经统计学分析证实,MAB探针检测BLV抗原是一种非常特异、敏感、稳定的检测技术。     

牛地方流行性白血病液相蛋白芯片检测方法的建立

应用xMAP液相芯片技术原理,以原核表达的重组牛白血病病毒gp51蛋白为抗原,建立了检测牛白血病病毒抗体的LiquiChip液相蛋白芯片检测方法,并进行了特异性、敏感性、重复性与稳定性试验。结果表明,该方法对牛白血病病毒阳性血清检测阳性,对其他常见牛病毒阳性血清检测阴性,表明特异性好;液相蛋白芯片方法对牛白血病病毒抗体的检测敏感性可达119.7ng/μL,对多份牛白血病病毒阳性血清的检测结果显示该方法的检测敏感性与商品化ELISA试剂盒无显著差异;对3份牛白血病病毒阳性血清进行4次重复检测,批内、批间的变异系数均低于10%。所制备的偶联微球芯片保存3个月,其检测结果无显著差异。采用该方法对169份临床牛血清样品进行检测,检出阳性率达57.4%,该检测结果与瑞典进口ELISA试剂盒检测结果的符合率为94.67%。本方法为牛地方流行性白血病的进出境检疫、疫病监测和流行学调查研究提供了一种特异、敏感的新型快速检测技术。     

牛支原体肺炎PCR诊断方法的建立及初步应用

参照GenBank中牛支原体脂蛋白P48基因序列,设计并合成特异性引物Mb-F/Mb-R,建立了牛支原体PCR检测方法,并在扩增条件优化的基础上,对该方法的特异性和灵敏度进行了分析,进而应用建立的方法完成了疑似牛支原体肺炎临床病料的检测。结果显示,建立的PCR方法对牛支原体的核酸样品能扩增出534 bp的特异性目的片段,而对无乳支原体、丝状支原体、大肠杆菌、绿脓杆菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、黏质沙雷氏菌、变形杆菌等牛常见条件病原微生物核酸样品均未见明显的扩增条带,且其可检测出的牛支原体DNA最低浓度约为0.000 002 875μg/mL。对临床样品的检测结果显示,该方法的检出率与与病原分离的符合率为100%。上述结果表明,本研究成功建立了牛支原体PCR检测方法,可用于临床上牛支原体肺炎的快速诊断。     

牛白血病病毒前病毒DNA荧光PCR检测方法的建立及应用

为快速检测牛外周血淋巴细胞中的牛白血病病毒(bovine leukem ia vir,uBsLV)前病毒DNA,选取BLVenv基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过优化反应条件建立检测牛白血病前病毒DNA的荧光PCR方法,并对该方法进行敏感性、特异性和重复性评价及实际样本的验证检测。结果显示,该方法具有很高的特异性和重复性,最低检出限为每个反应可检出3个拷贝数的阳性标准质粒对照。在175头BLV抗体阳性牛中,用该方法共检出127头BLV感染牛。在262头BLV抗体阴性牛中,用该方法检出2头BLV感染牛,该方法与套式PCR之间检测结果的符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的方法可用于BLV感染牛的确证。     

牛白血病病毒结构蛋白及抗原活性分析

对从FLK/BLV带毒细胞系培养上清提纯的病毒粒子经SDS-PAGE分析,发现主要有11种蛋白组分,其分子量分别为12kd、15kd、24kd、28kd、30kd、45kd、52kd、62kd、70kd、83kd、92kd。其中30kd、52kd、62kd、70kd为糖蛋白;Western Bloting实验表明,BLV主要有8种抗原活性组分,分别是P_(15)、P_(24)、P_(28)、gP_(30)、gP_(52)、gP_(62)、gP_(83)和gP_(92)。     

貂与狐狸犬瘟热的诊断及防制

犬瘟热是由副黏病毒科、麻疹病毒属的犬瘟热病毒引起的犬科、鼬科、浣熊科及多种野生动物的高度接触性、急性败血性传染病 ,主要侵害易感动物的呼吸系统、消化系统和神经系统。本病广泛分布于世界各国 ,近年来国内外报道 ,貂和狐狸的发病有扩大蔓延的趋势。随着病毒变异株的出现 ,更加剧了该病扩大蔓延的趋势 ,严重影响了特种养殖业的发展。 2 0 0 4年 4月 ,山东省潍坊某养殖场的貂与狐狸大面积暴发犬瘟热 ,发病率达 5 0 % ,死亡率达 2 0 %。发病动物眼和鼻流出浆液或黏液性分泌物 ,并出现呕吐和腹泻症状。剖检可见肺出血 ,肠道卡他性或出血…     

兰州地区猪瘟的流行情况及防制措施

猪瘟是一种急性、热性传染病。急性型病例呈败血病变化;病期较长的在发病后期常有猪霍乱沙门氏菌或巴氏杆菌等继发性感染,使病猪肠道（主要是大肠部分）和肺发生剧烈炎症及坏死。本病一年四季发生,不分猪种、年龄、性别都可感染。１流行情况近２ａ来,猪瘟在兰州地区常...     

牛羊肝片吸虫病早期诊断方法的研究进展

牛羊肝片吸虫病在一些地区流行广泛,常引起大批家畜死亡,造成严重的经济损失。长期以来,诊断该病主要依靠粪便虫卵检查法,但动物在感染后2.5～4个月才开始排出虫卵,且检出率不高,因此,无法进行本病的早期诊断。近年来,国内外学者用免疫学等方法进行肝片吸虫病的早期诊断,取得了可喜的进展。     

牛白血病病毒对绵羊感染及传代试验的研究

牛白血病是以淋巴细胞异常增生为主要特征的肿瘤性疾病。我国江苏、上海等地区发现此病。作者为了明确牛白血病病毒的病源性,自1980年以来进行该病毒对绵羊感染及传代试验,应用临床诊断、血液学和血清学诊断确定为牛白血病病牛,或经电镜观察在淋巴细胞培养物中见有C型病毒的牛的病料,作为牛白血病病毒材料接种绵羊。经三年来的试验,取得了一定的进展。     

断乳仔猪暴发猪瘟和副伤寒的诊断及防制

20 0 0年 9— 10月 ,柳江某猪场发生以断乳仔猪急性死亡、体温升高、皮肤出血和腹泻为主要特征的疾病 ,死亡仔猪 12 6头 ,约占该批仔猪的 5 0 %。经了解发病情况 ,进行临床症状、病理剖检及病原学检查 ,综合诊断为猪瘟病毒和副伤寒沙门氏菌混合感染。1　发病情况某猪场饲养有繁殖母猪 136头 ,哺乳仔猪采用高床网上培育 ,断乳后 ( 2 8— 35日龄 )移至地面平养 ,同时接种猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联弱毒冻干苗。 2 0 0 0年 9月下旬 ,发现 1窝刚断乳仔猪中突然死亡 2头 ,同窝仔猪大部分体温为 40 .5—42 .0℃ ,少数腹泻 ,畜主随即将全窝仔猪扑杀…     

牛传染性鼻气管炎间接ELISA诊断方法的建立

以牛肾细胞系(MDBK)培养牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)Bartha Nu/67株,经超速离心纯化病毒,再经超声破碎处理后作为诊断抗原,建立了检测牛血清IBRV抗体的间接酶联免疫吸附试验。该ELISA的判定标准为:血清D490 nm值大于0.369的判为阳性,小于0.295的判为阴性,在0.295与0.369之间的为可疑。特异性和重复性试验结果表明,该方法特异性高、重复性好。与法国进口ELISA抗体诊断试剂盒比较,其符合率为96.3%;与中和试验比较,符合率为95.8%,且敏感性更高。应用该诊断方法调查了我国部分地区IBRV的感染情况,结果显示,这些地区的IBRV感染率为67.1%。     

鸡非典型新城疫并发传染性腔上囊病的诊断及防制

鸡新城疫 (ＮＤ)是由副黏病毒引起的鸡的一种高度接触性传染病 ,发病率和病死率均较高 ,对养鸡业危害较大。通常人们将引起急性死亡、发病率高、致死率高、具有典型消化道病变及神经症状的ＮＤ称为典型ＮＤ ,将发病率低、致死率低、症状不典型的ＮＤ称为非典型ＮＤ ,后者主要发生于免疫鸡群。非典型ＮＤ发病率一般在 10 %～ 30 % ,致死率一般在 15 %～ 4 5 %。现在 ,由于集约化养殖场、养殖专业户饲养管理、防疫水平提高 ,典型ＮＤ的暴发流行已很少见 ,而非典型ＮＤ的发生则较普遍 ,且常与传染性腔上囊病 (ＩＢＤ)前后或同时发生。ＩＢＤ是…     

规模化猪场发生温和型猪瘟的原因探讨及防制措施

规模化养猪场因具备一定的隔离条件,并有较完整的疫苗免疫程序和消毒制度,一般不会出现急性或亚急性猪瘟病例,然而温和型猪瘟时有发生,尤其在断奶后７～１５ｄ的仔猪群发病较多,常在出现症状后２０～４０ｄ陆续死亡,死亡率达３０％～６０％。康复猪生长发育迟缓,对...