牛、羊血γ-球蛋白预防新生羔羊腹泻试验

为了探索γ-球蛋白制剂对新生羔羊腹泻的预防效果,我们于1985年4～5月,在青海省河卡种羊场和青海省三角城种羊场应用γ-球蛋白制剂对新生羔羊进行预防腹泻的试验。并取得了良好的效果。 (一)材料与方法 1.材料:试验动物为青海省河卡种羊场牧业二队的青海半细毛羊(简称河卡羊)和三角城种羊场二大队的青海细毛羊(简称三角城羊)的新生羔羊.共316只。γ-球蛋白制剂是青海畜牧兽医学院和青海海南肉联厂所共同研制的γ-球蛋白注射液,药物批号分别是850402、850403、850407,浓度为5％,含γ-球蛋白达96％以上,由羊血清中提取。     

牛的血型

牛血型的分类研究在动物中是最详细的。用免疫学方法,可将血液的有形成分分为红细胞抗原型、白细胞抗原型、血小板抗原型和同种异型。所谓同种异型是血清成分抗原变异型的总称。用电泳方法,可将血液蛋白质(包括酶)和乳蛋白质分为血液蛋白型(红细胞蛋白型和血清蛋白型)和乳蛋白型。此外,还可以按照牛血球对家兔抗牛红血球血清的凝集性分为高低两型。这里我们主要介绍作为遗传标记因子意义较大的红细胞抗原型和血液蛋白型。     

羊血Υ-球蛋白制剂预防新生羔腹泻的效果

γ-球蛋白制剂在防治畜禽疾病、尤其是防治幼畜腹泻方面的作用,已被国内外很多学者所证实。本文作者于1986年在青海省河卡种羊场进行了γ-球蛋白制剂预防新生羔腹泻的生产试验,取得了良好效果。 (一)材料和方法 1.试验动物:为青海省河卡种羊场牧业1大队的青海半细毛品种羊的新生羔,共709只。试验开始时,将每日每群(共6群产羔母羊)所产的羔羊随机分为注射γ-球蛋白制剂的试验组(简称试验组)和不注射的对照组(简对照组)。从1986年4月13日产羔开始到5月13     

镉对鸡免疫功能影响的研究

本实验检测了给镉45ppm鸡的外周血液ANAE~ 淋巴细胞百分率、B-淋巴细胞形成EAC花环百分率及血清γ-球蛋白含量、血清IgG含量。实验结果表明:在整个实验期间ANAE~ 淋巴细胞百分率减少,B-淋巴细胞EAC花环形成百分率、血清γ-球蛋白含量及血清IgG的含量呈下降趋势。说明镉对鸡的细胞免疫和体液免疫均有抑制作用,其抑制程度与接触镉的时间长短有关。细胞免疫对镉的毒性较体液免疫敏感。     

猪血清IgG提取方法的比较

目前在兽医研究工作和诊断中,对纯化免疫球蛋白Ig的质量提出了更高的要求,因此寻求一种操作简单、高效、实用的Ig提纯方法是很有必要的。为此,我们用葡萄球菌A蛋白(SPA)菌体法,饱和硫酸铵盐析法、DEAE——纤维素柱层析法纯化猪血清IgG,并加以比较,结果报告如下,供同行借鉴。 (一)材料与方法 1 饱和硫酸铵盐析法:盐析法是根据蛋白质在纯水和各种盐类溶液中的相对溶解度不同而进行的。当介质中盐份增加时,就会影响水分子与蛋白质分子极化部分的相互作用而减     

牛环形泰勒焦虫补反抗体测定

据资料报道,补体结合反应(CF)是动物和人感染原虫后出现的一种比较特异性的血清学反应。 ( 1966)用环形泰勒焦虫红细胞型虫体作抗原。检测了实验感染环形泰勒焦虫牛的补反抗体,对补反阳性牛进行攻蜱试验,结果表明阳性牛具有对该病的免疫力。P.Hooshmand-Rad等(1971)利用环形泰勒焦虫组织培养物作抗原成功地测定了牛体注苗后血液中的补反抗体。关于这方面的资料国内尚未见报道。本实验以人工培养     

中国兽医科技1986年(总第101～112期)目录

西北五省(区)家畜内科学第二届学术讨论会论文选辑雏鸭锰缺乏症的调查研究…………………………………………………………………祁周约等(4—3)。宁夏南华山马场家畜黄花棘豆中毒的调查…………………………………………………陶定章等(4—5)低温乙醇法和盐析法提取牛、羊血清Y     

牛血铜锌超氧化物歧化酶生产新工艺

超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD,EC1.15.1.1)是一种广泛存在于生物体内的含铜、锌、锰和铁的金属酶。它催化超氧自由基O_2~-转变为O_2H_2和O_2的歧化反应,在防御生物体免受超氧自由基损伤,抗辐射,抗肿瘤及延缓机体衰老等方面具有重要作用。Cu、Zn-SOD存在于需氧生物的细胞浆中,1969年McCord和Fri-dovich首次在牛红细胞中发现SOD以来,国内外学者已经建立了多种从动物血液中提取纯化SOD的方法。然而,实验室制备方法并不完全适用于大规模生产,比如热变性除血红蛋白,1～2升血液,     

北京鸭Ⅱ型干扰素基因分子克隆与序列分析

应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激培养的北京鸭脾淋巴细胞提取的总RNA中扩增得到北京鸭Ⅱ型干扰素(1FN-γ)基因(DuIFN-γ2).序列分析表明,DuIFN-γ2基因长度与报道的鸭IFN-γ基因(AF087134)长度一致,为497个核苷酸,共编码145个氨基酸的成熟蛋白,推测其分子量约17 ku.两者核苷酸水平的同源性为99.6%,有2个位置发生非同义变异,其氨基酸序列的同源性为98.6%;与其他禽类的同源性为67.0%-68.0%,与人的同源性为34.4%.     

实验感染山羊伊氏锥虫病血清蛋白组份动态变化的研究

用伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)腹腔接种8只健康山羊,定期采血,分别用双缩脲法和醋酸纤维素薄膜电泳法分析血清总蛋白及其各组份的动态变化。结果表明:血清总蛋白含量感染前后及与对照组相比差异不显著(P>0.05)。而血清蛋白中的各组份的比例实验前后具有明显地变化。各组份均具有明显的动态变化;血清白蛋白(A)呈明显的下降趋势(P<0.001);β球蛋白亦呈明显的下降趋势(P<0.001);γ球蛋白呈明显的上升趋势(P<0.001)。被感染的8只山羊在57天的血液压滴镜检中未见虫体,但第33天采血接种小白鼠,可使其发病死亡,血液压滴镜检有大量锥虫。     

鸡IFN-γ基因在大肠杆菌中的表达及表达产物对鸡的免疫保护

将鸡干扰素-γ(ChIFN-γ)成熟肽基因编码区序列亚克隆到原核表达载体Pqe30上,并转化大肠杆菌M15感受态细胞.经诱导后,以镍金属亲和层析法对表达蛋白进行纯化,采用SDS-PAGE与Western-b1ot对表达蛋白进行鉴定.结果显示,经诱导的转化子在体外获得了高效表达,表达蛋白约占菌体蛋白的23%.0.5 ng/Ml以上的重组ChIFN-γ(rChIFN-γ)能显著抑制鸡新城疫病毒对细胞的侵染与伤害;但是,细胞先感染病毒后,再以不同剂量rChIFN-γ作用于细胞,则不具有对细胞的保护作用,说明rChIFN-γ对细胞的保护是通过调节机体免疫能力、干扰病毒入侵实现的.1 ng/ML的rChIFN-γ可显著提高新城疫疫苗的免疫效价,具有较强的免疫协同作用.表明,原核表达的rChIFN-γ具有显著的生物学活性.     

牦牛IFN-γ基因的表达及其产物的生物学活性分析

用植物血凝素和脂多糖诱导牦牛外周血淋巴细胞,提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术克隆了牦牛IFN-γ(YakIFN-γ)基因,然后设计了1对表达引物,从pGEM-YakIFN-γ载体上扩增YakIFN-γ成熟蛋白基因,将牦牛IFN-γ基因与表达载体pET-30a连接,构建了重组表达质粒pET-30-YakIFN-γ。用IPTG诱导表达的可溶性表达产物经镍柱亲和纯化,用纯化的重组YakIFN-γ蛋白进行了MTT、抑制肿瘤细胞增殖和细胞病变抑制的生物学特性研究。结果显示,成功克隆和表达了YakIFN-γ基因;序列分析表明:克隆的YakIFN-γ基因序列与GenBank上登录的黄牛IFN-γ基因序列的同源性为99.0%。SDS-PAGE分析和Western-blot检测证实,获得了高纯度的重组YakIFN-γ蛋白。重组YakIFN-γ(rYakIFN-γ)对伪狂犬病病毒的活性单位为2.2×103U/mg。表明表达并纯化的rYakIFN-γ蛋白具有较高的生物学活性和干扰病毒复制的活性。     

γ-干扰素调节猪耳廓血管微循环作用机制的iTRAQ技术分析

应用蛋白质组学技术(i TRAQ)分析仔猪耳廓血液γ-干扰素(IFN-γ)变化过程中的差异表达蛋白,探讨IFN-γ在耳廓微循环中的机制和作用。通过3次生物学重复试验,共鉴定出224种显著差异表达蛋白质,与对照组相比,其中122种蛋白的表达量上调,102种蛋白的表达量下调。生物信息学分析提示这些蛋白主要参与脱氧核糖核酸酶活性调控、血小板激活和聚集等过程。代谢通路分析显示,这些蛋白主要参与核糖体、剪切体和内质网蛋白等多种信号通路,涉及调控细胞骨架、细胞黏附性及细胞因子转录等多种生理活动,初步鉴定核因子κB在IFN-γ的调控中发挥了重要的作用。用生物高通量技术检测了IFN-γ注射后差异表达蛋白质在仔猪耳廓微循环中的表达,为疾病监控和治疗提供新型的生物标志物和靶向药物作用位点奠定了基础。     

一种新的IgG结合物——链球菌蛋白G

链球菌蛋白G是A、C、G群链球菌的细胞壁内存在的一种表面蛋白。它具有与哺乳动物IgG结合的能力,由于G群链球菌的这种蛋白与IgG的结合能力最强,因此得名蛋白G。虽然早在1973年Kron-avall用致敏绵羊红细胞检测A、C、G群链球菌与γ球蛋白反应时就发现有26％的菌株能与γ球蛋白反应,但真正系统广泛地研究蛋白G的理化特性及实际应用,还是80年代的事情。现在已基本肯定蛋白G比葡萄球菌A蛋白(SPA)对IgG的结合更为优越,是一种新的更有效的IgG结合物,在免疫学研究方面将有可能取代SPA。     

猪囊虫特异抗原的提取和应用的研究

将细颈囊尾蚴和棘球蚴的粗抗原超免家兔,从抗两种粗抗原的兔血清中提取γ球蛋白与CNBr活化的Sepharose 4B偶联制成免疫吸附柱进行亲和层析,排除猪囊虫粗抗原中与细颈囊尾坳和棘球蚴的共同抗原,得到纯化的猪囊虫特异抗原SACC。用SACC进行斑点试验(DIA)诊断猪囊虫病,结果表明,SACC不仅具有较强的特异性(99.62％),而且其敏感性(98.30％)与粗抗原的敏感性(98.86％)比较也没有明显降低。经免疫电泳分析也证明SACC是猪囊虫的特异性抗原。     

基于牛布氏杆菌重组外膜蛋白的混合抗原间接ELISA方法的建立

为建立布鲁菌的快速检测方法,通过引物设计、PCR扩增、表达载体构建、SDS-PAGE和Western-blot分析对牛布鲁菌3种外膜蛋白OMP19、OMP22、OMP28基因进行原核表达,利用亲和层析法纯化3种重组蛋白,将3种重组蛋白混合作为包被抗原,经重复性、灵敏度和特异性试验建立了布鲁菌抗体检测间接ELISA,并对300份牛血清样品进行检测应用,同时使用进口的商品化试剂盒进行平行检测。结果显示,成功构建了p Cold-TF/OMP19、p Cold-TF/OMP22和p Cold-TF/OMP28原核表达载体,诱导后分别表达大小分别为69、74和80 ku的可溶性且具有良好反应原性的重组蛋白r OMP19、r OMP22和r OMP28。基于此3种重组蛋白混合抗原建立的间接ELISA具有良好的重复性和特异性,其灵敏度达1∶1 600。临床样品检测试验结果显示,与进口试剂盒总符合率高达96%(288/300),其中阳性符合率为93.5%(58/62),阴性样品符合率为96.64%(230/238)。将3种重组外膜蛋白联合作为包被抗原进行牛布鲁菌抗体检测,为我国牛布鲁菌病的诊断检测技术相关研究提供了新的思路和参考。     

He-Ne激光照射实验性驴膝关节浆液性关节炎的研究

本实验选用化学方法诱导驴产生浆液性膝关节炎为实验模型,用HeNe激光照射实验组膝关节,测定发病前、后血液和滑液的某些成分变化。实验结果表明,实验组滑液碱性磷酸酶(ALP)活性在病后第16天显著高于对照组(P<0.05),血清酸性磷酸酶(ACP)活性下降均差在病后第7天和第16天显著低于对照组(P<0.05),血浆皮质醇在病后第16天显著高于对照组(P<0.05),滑液总蛋白含量在病后第16天显著高于对照组(P<0.05),滑液β-球蛋白在病后第13天,增加的均差显著高于对照组,滑液γ—球蛋白在病后第16天显著高于对照组(P<0.05),滑液白细胞总数在病后第16天显著低于对照组(P<0.05),滑液淋巴细胞在病后第16天显著高于对照组(P<0.05),滑液多形核白细胞在病后第13天显著低于对照组(P<0.05),滑液单核/巨噬细胞在病后第13天显著高于对照组(P<0.05)。     

基于抗原蛋白Fiber-2及细胞因子佐剂的Ⅰ群4型禽腺病毒亚单位疫苗的开发

为了开发一种抗I群4型禽腺病毒(FAd V-4)的亚单位疫苗,选择I群禽腺病毒血清4型流行毒株衣壳蛋白Fiber-2作为保护性抗原蛋白。利用昆虫细胞-杆状病毒系统生产Fiber-2蛋白,通过Westernblot检测重组蛋白的表达情况,利用双向琼脂扩散法检测重组Fiber-2的免疫原性。为了增强亚单位疫苗的免疫保护效果,添加鸡源白细胞介素2(chIL-2)和鸡源γ-干扰素(ch IFN-γ)作为免疫佐剂,与重组Fiber-2单独或混合使用,制备多种形式的亚单位疫苗,并进行动物攻毒保护试验。重组蛋白的Western-blot鉴定结果显示,63 ku处出现Fiber-2蛋白目的条带;双向琼脂扩散试验结果显示,重组蛋白效价达到1∶128,表现出良好的反应原性。动物攻毒保护试验结果显示,单独使用Fiber-2免疫SPF鸡,在50 μg/只的剂量下,可为SPF鸡提供100%的保护效果,以chIL-2和chIFN-γ为免疫佐剂,与重组Fiber-2联合免疫SPF鸡,可显著增强Fiber-2在低剂量(10 μg/只)下的免疫保护效果,上述结果表明重组Fiber-2联合chIL-2和chIFN-γ细胞因子佐剂所制备的亚单位疫苗在抗I群4型禽腺病毒感染领域具有良好的应用前景。     

青海省三角城种羊场绵羊棘球蚴感染调查报告

我们于1974年12月1～15日,利用羊场屠宰牛、羊贮备冬肉之时,对绵羊棘球蚴感染作了调查。蒙场领导和群众的大力支持,在短时间内,调查工作得以迅速完成,然后动员全场干部、牧工、家属、中小学生广泛讨论,最后集中大家意见,拟订羊场绦虫蚴病(棘球蚴病、多头蚴病和细颈囊尾蚴病)的综合性防制措施。     

屠宰牛取血方法的改进

屠宰牛取血方法的改进赵福堂（兰州军区后勤部马场管理局农牧研究所山丹７３４１０４）牛血液是提取某些生物制品的重要原料，如水解蛋白、纤溶酶、凝血酶、血红素、血球素、超氧化物歧化酶等都可从牛血液中获得。但通常屠宰牛时，采用“三管齐断”的方法，可使血液产生泡...