热力、化学药品和消毒剂对猪水泡病病毒的作用

曾试验酸、碱、氧化剂、去垢剂以及其他化学药品和消毒剂对猪水泡病病毒的作用。稀释于硬水中的病毒能被硝酸、硫酸、醋酸、甲酸、氢氧化钠、过醋酸、高锰酸钾、苯磺酸或氢氧化钠和次氯酸钠所灭能。除硫酸、高锰酸钾和次氯酸钠外,这些化学药品和消毒剂在有猪粪存在的情况下也有效。像酸与去垢剂,酸与氧化剂或者碱与氧化剂之类的化学药品与消毒剂的结合比单个成份更为有效。 在5℃和pH7.54,这种病毒能存治164天而不丧失其滴度,但在pH2.88和10.14,病毒的滴度于164天时损失6个对数单位。悬浮于乳汁中的病毒在60℃于两分钟内灭能,悬浮于猪粪浆中的病毒在64℃于两分钟内灭能。在有1％氢氧化钠存在的情况下,悬浮于猪粪浆中的病毒滴度在5℃于1小时之内降低5.4个对数单位,在40℃于10秒钟之内降低6.1个对数单位以上。曾将这些结果与其他肠道病毒和口蹄疫病毒所获得的结果进行比较,并对能够应用热力、化学药品和消毒剂灭能的各种条件加以讨论。     

DEAE_(32)纤维素色谱法纯化EDS-76病毒的研究

应用DEAE_(32)纤维素色谱法纯化EDS-76病毒的方法是:采用起始缓冲液(0.01molpH7.2PB)充分平衡柱床和病毒样品,加样后以0.01mol pH7.2 PB,0.05mol NaCl缓冲液洗柱,再以0.01mol pH7.2 PB,0.30mol NaCl缓冲液洗脱并收集病毒。电镜观察证实,所获得的病毒样品具有较高的浓度和纯度,病毒颗粒无囊膜、球形二十面体对称,大小均一,直径约80nm。     

通过血清学和核糖核酸(RNA)杂交的方法比较猪水泡病病毒和科赛奇B_5病毒

通过病毒的中和、免疫扩散试验及病毒RNA杂交研究猪水泡病病毒(SVDV)与科赛奇B_5病毒的关系,经过三个方法发现两种病毒之间有明显的差异。从几个国家分离的猪水泡病病毒的关系是很密切的,但也有差异。最近分离的科赛奇B_5病毒之间也是相似的,但发现它们与原始型(Faulkner)毒株有明显的差异。SVDV与Faulkner 毒株的关系比与最近分离的科赛奇B_5病毒更为密切。我们对于最近出现猪水泡病的关系的观察意义进行了讨论。     

猪水泡病病毒的若干物理-化学特性

用仔猪肾初代细胞培养物滴定时,VSK病毒的产斑率约为≤0.9×10~(-3)。将繁殖于猪肾细胞培养物上的病毒用氯仿处理,吸附,差式离心及密度梯度离心,加以浓缩并提纯。 曾发现了下列物理参数:病毒属于等积的(Isometrical)RNA病毒,其直径为25.1±1.0毫微米。对氯仿、乙醚及pH有抵抗力。沉降系数为156±3S,氯化铯中的密度为1.33±0.1克/毫升。在小核糖核酸病毒科中它属于肠道病毒属,根据对pH的不同敏感性及氯化铯中的等密度可与口蹄疫病毒相区别。     

犬细小病毒JS12株VP2基因的分子特征及其在大肠杆菌中的表达

从犬细小病毒病免疫预防失败病犬体内分离到1株犬细小病毒(CPV),命名为CPV-JS12株。病毒可凝集猪的红细胞,对乙醚不敏感,pH3不能灭活病毒,pH10可使病毒失去感染性,56℃作用60min病毒仍有活性,80℃作用30min可灭活病毒。序列分析时CPV-JS12为CPV-2a亚型,VP2基因全长1755nt,编码584aa,与国外CPV毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在98.9%~99.6%和98.3%~99.7%之间,与国内和周边地区毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在99.0%~99.7%和97.9%~99.7%之间;16个中国分离株处在不同组,CPV-JS12株与韩国毒株DH426处在同一分支上,亲缘关系较近。对CPV-JS12与免疫毒株VP2蛋白的立体结构分析比较,发现有9处氨基酸残基变异,其中6处位于衣壳蛋白表面,5处位于抗原表位区。将VP2基因在大肠杆菌中表达,重组VP2蛋白的分子质量为67.0ku,主要以包涵体的形式存在;Western-blot分析中重组VP2蛋白可与CPV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组VP2蛋白为抗原建立的CPV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。     

猪水泡病病毒的电子显微镜观察

近年,国内某些地区流行的猪水泡病的病原体,经初步研究证明,是属于微小核糖核酸病毒。可是本病毒的某些生物学特征与其它几种呈水泡性症状的病原体,诸如口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒、猪水泡疹病毒等,却有程度不同的差异。 有关以上几种病毒的形态,在国外先后均有电子显微镜研究的报导。1968年也曾报导过在意大利流行的一种新的水泡性病毒的特征,电子显微镜观察说明是直径30～32毫微米的略     

病毒受体及其研究进展

介绍了病毒受体的基本生物学特性,重点阐述了噬菌体展示、免疫共沉淀及酵母双杂交等病毒受体研究方法,综述了几种重要动物病毒细胞膜受体的研究进展,并对病毒受体研究的发展前景进行了展望。     

猫杯状病毒的分离鉴定及其对理化因素抵抗力的研究

采集南京某宠物医院处置的疑似患猫杯状病毒病的家猫的鼻咽拭子,将其处理液接种于CRFK细胞,进行连续传代培养,出现特征性细胞病变。通过对该分离株进行形态学观察、PCR鉴定、间接免疫荧光试验,证明该分离株为猫杯状病毒(FCV),遂将其命名为FB-NJ-13。用RT-PCR分段扩增病毒基因组并将序列提交至GenBank(登录号:KM111557)。序列分析显示,该毒株与国内外参考毒株核苷酸序列的同源性在76.2%~79.6%之间。同时研究了该病毒对温度、酸碱、有机溶剂、干燥和紫外线照射等理化因素的抵抗力。结果显示,50℃30min或70℃5min即可灭活该病毒;该病毒在pH值为3的酸性环境中和pH值为10的碱性环境中不稳定;它对乙醚和氯仿不敏感;紫外线照射2.0h以上,可将该病毒有效灭活。上述研究结果为揭示我国FCV的分子生物学特征和遗传进化规律提供了重要的科学依据。     

浅谈兽医病毒

根据国际病毒分类委员会(ICTV)的病毒分类和命名法,本文重点在动物病毒方面,介绍RNA病毒11个科25个属及3个亚科和DNA病毒6个科18个属及5个亚科,还述及病毒科的主要形态和特性,属内主要病毒成员引起传染病的特征,病毒在机体内的增殖部位,采取什么病料最适宜,以及病毒所适应之细胞等内容。供同行在临床实践、教学和科研中参考,因篇幅所限,有关病毒的分子量、沉降系数、浮密度等从略,诊断方法亦只能重点介绍。人类等病毒只提一笔。     

聚焦电泳和T_1寡核苷酸指纹在口蹄疫病毒研究中的应用

近几年来,随着分子生物学的迅速发展,在口蹄疫病毒研究中运用先进的聚焦电泳和T_1寡核苷酸指纹图,分析病毒核酸和蛋白,使我们对病毒基因组结构和抗原结构有了更深入的了解。 (一)聚焦电泳 聚焦电泳(Electrofocusing或Isoelectric focusing)是一种特殊的聚丙烯酰胺凝胶电泳,适用于病毒蛋白质分析。在凝胶中加入两性电解质载体(Ampholine),产生pH递度。用~(35)S蛋氨酸标记病毒感染细胞提取物,进行电泳,由于蛋白质等电点不同,因此在凝胶的不同部位聚焦,经放射性自显影后,形成不同的蛋白区带。也可在聚焦电泳     

几种畜禽的病毒持续感染

一、病毒持续感染 多年以来,病毒学研究者和临床医师主要注意急性发热病毒性传染病,例如脊髓灰质炎、流行性感冒、天花和麻疹等,它们潜伏期短、常继以急性症状,终于痊愈,推测病毒从体内消除。这类重要病毒感染由于疫苗接种,现渐渐扑灭;人们注意力则转移到病毒在宿主体内持续几个月甚至数年的传染病,常不管体内是否已产生抗体。这种持续感染虽然不引起严重急性疾病,但是由于它们长期存在,在免疫抑制患者中的活化,以及伴有慢性免疫性疾病或肿瘤,具有重大的现实意义。     

猪传染性水泡病病毒的浓缩、提纯及同位素标记

我们在研究猪传染性水泡病(以下简称水泡病)病毒的物理化学特性,探讨用P~(32)标记的病毒诊断本病的方法过程中,曾采用几种途径对水泡病病毒进行浓缩和提纯,也对该病毒用P~(32)进行了标记试验。现将这些基本方法总结于后。     

关于科赛奇病毒的一些资料

自从国外报导猪水泡病病毒与B5型科赛奇病毒的密切血清学关系以来,引起了兽医界对科赛奇病毒的浓厚兴趣,我们特根据下列几本书中的有关章节整理出这份资料,以供研究工作的参考,并希读者予以指正     

20面体立体对称病毒模型制作方法

20面体立体对称病毒是由20个等边三角形组成,因此它有20个面、30条边和12个角。但制作其模型,不必用20个等边三角形组成,可制作平面展开图,既省事,又正确。在病毒表面用大头针钉上塑料圆球,示意病毒壳粒,将病毒放入塑料袋中,示意病毒外的囊膜。把其作为教具,给初学病毒者建立起一个立体概念。制作方法如下。     

蓝舌病病毒基因重组概况

蓝舌病病毒(BT V)是呼肠弧病毒科,环状病毒属的分节段、双股RNA(dsRNA)病毒。其病毒基因组由10个分子量大小不一的dsRNAs片段组成,在SDS-PAGE上显示10条带。10个dsRNA片段分别编码7个病毒结构多肽,3个非结构多肽和2个未知多肽(地位和功能不清)。BTV是感染家养及野生反刍动物的虫媒病毒。目前,在世界     

非洲猪瘟病毒免提取核酸荧光定量PCR检测方法的建立

根据非洲猪瘟病毒(ASFV)保守的VP72基因序列,设计特异性引物和探针,经过优化反应体系中各组分及反应条件,建立了直接检测样品中ASFV的荧光定量PCR方法,并分析该方法的特异性和敏感性。结果显示,该直扩荧光定量PCR方法只对ASFV有特异性扩增,对其他几种相似疾病病原的灭活抗原,如猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒、口蹄疫病毒、印第安纳型水泡性口炎病毒、新泽西型水泡性口炎病毒、猪流行性腹泻病毒等检测均呈阴性。敏感性试验结果显示,对10倍梯度稀释的非洲猪瘟病毒灭活抗原的检测敏感性可达1×10~(-6),与OIE推荐的传统的荧光PCR的检测敏感性相当。3个ASFV稀释度样品的组内和组间重复的变异系数均小于5%。该方法无须提取核酸,可在60 min内完成对样品的检测,检测快速、灵敏,结果准确,结合便携式荧光PCR仪,为野外或现场的非洲猪瘟病毒快速检测提供了一种切实可行的方法。     

猪传染性水泡病传代细胞甲醛灭能苗的研究

一、材料和方法 (一)病毒(强毒):本强毒是1974年采自漯河冷冻厂病猪水泡皮,磨碎接种乳鼠,用鼠毒五代接种传代细胞。细胞病变明显,且有规律。 (二)供生产病毒的细胞培养:我们的试验都是用IB-RS-2系猪肾传代细胞进行的。引自农林部兽医药品监察所。 1.培养液:以Hanks液加0.5％乳蛋白水解物为基础液,另加N_(16)液8％、牛血清10％、青霉素每毫升含100单位,链霉索含100微克,用灭菌碳酸氢钠调整pH为7.0左右。维持液含牛血清3％,pH为7.4左右,其他相同。     

组织培养细胞被支原体污染的检查法和消除法

被支原体污染的组织培养细胞 最早发现支原体污染病毒研究中常用细胞株的是Robinson氏等。在日本曾由尾形氏等调查了国内几个研究所的细胞株,查明约有80％以上被支原体污染。由于支原体能消耗大量的精氨酸(arginine),因此,有些病毒在已污染的细胞上培养时不生长。此外,由于有些支原体能引起细胞的转化(transformation),在研究肿瘤病毒时,有可能造成在判断致癌结果时发生错误。因此,虽然做的是病毒一细胞的试验,结果却成了病毒—支原体—细胞的试验了,使试验结果的分析成为十分复杂。在日本使用的细胞株中,支原体的污染率详见表1。     

蓝舌病病毒灭活抗原的研究

蓝舌病是危害养羊业最严重的一种世界性传染病。其病原为蓝舌病病毒,属于呼肠弧病毒科环状病毒属。截止目前该病毒发现22个血清型。这种多型性对诊断和防制本病带来一定的困难。经过多年的研究,许多国家在本病的诊断方面取得了显著成绩。多种血清学诊断方法研制成功,群特异性(group-specificity) 方法(琼脂扩散试验、改良补体结合试验、免疫荧光方法、酶联免疫吸附方法)和型特异性(type—specificity)方法(中和试验、红血球凝集抑制试验等)在生产中得到推广应用。但上述方法中有时使用活的病毒,对无蓝舌病的国家是一种潜在性的危险。为此,开展了病毒免疫活性的灭活方法的研究。本文介绍了几种灭活方法对比实验内容,并研制成一种可供诊断用的灭活病毒,为制     

浅谈兽医病毒(续)

(九)布尼安病毒科(Bunyaviridae)本科病毒颗粒呈球形,直径90～100nm,螺旋状对称。基因1为负股RNA,分3个节段,遗传机制类型为—RNA→ mRNA。有囊膜,对乙醚等有机溶剂敏感。膜上有8～10nm突起物。病毒在细胞质内增殖。 布尼安病毒主要是从节肢动物分离到的一大群虫媒病毒,这群病毒至少有10个血清群,以前统称谓虫媒病毒布尼安群。ICTV最新决议新设布尼安病毒科,本科病毒有四个属,即布尼安病毒属(Bunyavirus),内罗毕病毒属(Nairovirus),白蛉热病毒属(Phlebovirus)和乌库病毒属(Unkuvirus)。在兽医地位中较为重要的布尼安病毒属内有赤羽病毒,又称阿卡斑病毒。已有JaGAr39、OBE1,NBE_8