抗Le~a和抗Le~b血清的研制

利用进口抗Le~a、Le~b血清筛选OLe(a+b-)和OLe(a-b+)型人,测定其唾液中Le~a和Le~b型物质含量,择其型物质含量高者唾液,用家兔和山羊免疫,合格后采全血,分离血清,用O、A、B型红细胞吸收、除去种属及α和β等凝集素。再用O型Le非相应型红细胞吸收,精制出含不完全抗体的抗Le~a和抗Le~b血清。该血清对Le相应型红细胞均产生明显凝集反应,而不发生非特异的交叉凝集反应。经过盲测鉴定,17份红细胞的Lewis型测定完全准确。制备的抗Le~a和抗Le~b血清在效价和特异性方面达到了引进的同种血清水平,填补了我国抗Le~a、抗Le~b血清制造的空白。     

检验A、B、H血型物质指示红细胞的研制

采用单克隆抗Ａ、抗Ｂ、抗Ｈ抗体致敏人Ｏ型红细胞 ,所获得的检验人体液 (斑 )的Ａ、Ｂ、Ｈ指示红细胞 ,为检验人体液斑迹的ＡＢＯ血型提供了一种新的试剂。在制备过程中 ,抗体载体的选定、致敏所需抗体的浓度和致敏环境的酸碱度都直接影响指示红细胞的凝集效价。经过反复实验探索 ,选择出了理想的条件。1　材料与方法1 1　人Ｏ型红细胞的醛化取多人份混合的人Ｏ型红细胞 ,用生理盐水充分洗涤后 ,将压积红细胞用 4℃预冷 ,含 0 5%戊二醛的ＰＢＳ缓冲液稀释成 10 %的悬液 ,作用 30ｍｉｎ后 ,2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 2 0ｍｉｎ ,弃上清液 ;将压…     

抗人N单克隆抗体的制备及其特性的研究

用ON型人红细胞免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得分泌IgM类抗人N单克隆抗体杂交瘤细胞株(ON_1D_3)。其培养上清液抗体效价为128～256,诱生小鼠腹水的抗体效价为8192;与Panel A红细胞反应呈抗N特异性;检测273名成人红细胞,只特异性凝集N(?)MN型人红细胞,不凝集M型红细胞。与猴等9种动物红细胞无交叉反应;酶修饰试验结果表明,ON_1D_3识别的抗原决定簇是唾液酸依赖性的。     

抗H单克隆抗体与抗H血清在法医检验应用中的比较

<正> 作者用抗H单克隆抗体和抗H多克隆血清与红细胞H抗原的亲合力和不同检材抗原的检出效果进行了比较,现将结果报告如下.1.亲合力的测定比较分别取HMcAb和抗HPcAb各一滴置于载玻片上与等量的10%O型红细胞生理盐水悬浮液混合,室温下肉眼观察红细胞开始凝集的时间和凝集成1mm凝集块的时间.(表1).     

单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞的研制及应用

<正> 本文报道根据反向间接血凝(RPHA)原理,用单克隆抗A、抗B、抗H抗体分别在合适的pH值醋酸盐缓冲液中,致敏醛化人“O”型红细胞,制得单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞。用来检验人体液斑的ABH血型物质。单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞对相应分泌型人唾液的凝集效价为8192倍、4096倍     

分泌抗人类血型-H抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株建立及初步应用

应用杂交瘤技术,建立了两株分泌抗 H 的单克隆抗体细胞株 H_(2-6)H_8和 B_(2-5)D_9。经体外培养半年以上,生物学性状稳定。两株细胞分泌的抗体属 IgM 类,特异性识别 H 型物质,与几种常见动物的红细胞无交叉反应。培养上清液和腹水的抗体效价最高分别达1024倍和1.28×10~5倍,可用在中和试验、免疫斑点法中,在实际办案中应用理想。     

单克隆抗M、抗N抗体的研制及初步应用

用人血型糖蛋白 A 和人红细胞分别免疫 BALB/C 小鼠。用被免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,在37℃、5%二氧化碳培养箱中孵育10～15天,然后用 OM 和 ON 型指示红细胞分别检测培养上清液的凝集情况,筛选出能分泌高特异性和高效价抗 M 和抗 N 抗体的细胞株,并建立了 GM_4H3、GM_4H_4、N_2A_3和 N_2D_(10)细胞株。这些细胞株可持续分泌免疫球蛋白 G 类抗 M、抗 N 抗体。应用这些抗体,通过血凝法、解离法和 ELISA 斑点法,可进行血及血痕的 MN 分型。在血型检验中,优于多克隆抗 M、抗N 血清。     

恒河猴ABO血型的研究

本文应用A型、B型、AB型血清，及抗－A与抗－B单克隆抗体对113只猕猴的ABO血型进行了测试。结果表明：在恒河猴（Macacamulatta）红细胞表面及血清中均未证明有类人凝集原和凝集素存在。但可根据其唾液中类人ABH型物质存在的情况判定该动物的类人血型。本实验检出的血型表型频率分别为：A型17．70％；B型52.21％；AB型20.36％；O型9.73％。该结果与国外报道的血型分布频率有差异。     

抗人A型红细胞单克隆抗体的研制及初步应用

本研究在用人A型红细胞悬液免疫BaIb/C小鼠脾细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞融合屡次失败的情况下,改用实体瘤分离出的骨髓瘤细胞进行融合,终获成功。融合后筛选出分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞株:3B_2、2H_2、8C_3细胞株。这些杂交瘤细胞可持续分泌抗A单克隆IgM类抗体。     

抗人红细胞凝集素血清的应用研究

本文通过吸收抑制试验证明了抗人血红蛋白沉淀素血清中存在的那种能凝集人类红细胞的凝集素,实际上就是用人的红细胞免疫家兔而产生的抗人红细胞凝集素.为考察抗人红细胞凝集素血清对血痕种属的鉴识能力,本文用此抗血清作解离试验,对不同稀释度的新鲜人血痕、室内存放的久暂不一的人血痕和15种动物血痕进行了检测.得到的结果是,新鲜人血痕稀释至1/1000仍呈阳性;500例室内存放的人血痕中,存放时间在11年以下的448例全部能够准确测出;存放12-16年的52例人血痕中,有33例能够测出,余19例呈阴性;15种动物血痕全部呈阴性.     

分泌抗人红细胞膜单克隆抗体细胞株的建立

以人的红细胞膜为抗原，采用选择性免疫抑制的程序，免疫BALB／C小鼠。经免疫的小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用血凝法筛选出3株分泌抗人红细胞膜种属特异性单克隆抗体的杂交瘤，即M1A7C4．M3A5B7和M3D9F1。连续传代2个月及复苏冻存半年的杂交瘤，仍能稳定地分泌抗人红细胞膜单克隆抗体。初步鉴定证明：该抗体具有稳定的种属特异性，可鉴别人与其它动物，特别是猴的红细胞，不与己知的血型特异性成分交叉，可凝集成人及脐带血的红细胞。     

血痕载体对ABO血型检验的影响

在一些刑事案件中,由于受到案发现场与当时环境所限,有时还缺乏对血痕规范化提取的认识和把握,从而致使现场提取的血痕所用载体种类各异,不仅给检验过程带来了诸多不必要的麻烦,而且对检验结果的判定也会造成不同程度的影响。本文就检案过程中经常遇到的检材载体作一初步对比分析。1　检　材随机抽取既往办案过程中保留存放下来的检材138份:其中医用纱布为载体的检材77份;化纤类为载体的检材2 7份;脱脂棉为载体的检材16份;卫生纸为载体的检材18份。2　试剂及方法血清采用公安部物证鉴定中心制备的标准抗A、抗B、抗H血清。指示红细胞采用新…     

人类A、B抗原单克隆抗体的研制和初步应用

作者用人类A、B型红细胞及A、B型分泌型唾液免疫8周龄的BALB/C小鼠,用经免疫的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,用血凝法筛选出分泌抗A抗体和抗B抗体的细胞株各3株。经一年多的传代,仍然能稳定地分泌抗A、抗B抗体,抗体特异性专一,培养上清液效价能达到2048倍,并初步应用于血液及体液(斑)的检验。     

用单克隆抗体进行混合斑ABO血型的研究

本文用TNE缓冲液浸泡提取混合斑中的精子和阴道上皮细胞,用高效价单克隆抗A、抗B血清进行吸附,加入含2.5％鸡白蛋白的红细胞指示悬液进行红细胞粘连试验。结果,精子和阴道上皮细胞能与相应的红细胞粘连,可同时判定混合斑中精子和阴道上皮细胞的血型。     

荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。     

检验ABH血型物质红细胞的研制——检验B血型物质红细胞的制备

<正> 目前,在法医物证检验中,ABH 血型物质的检验占物证检验的大部分。为寻求一个灵敏度高,操作简便的方法,我们将抗 B单克隆抗体结合在醛化人“O”型红细胞表面(红细胞致敏),利用该红细胞检验 B 血型物质获得了初步成功。经反复试验,证明此方法具有灵敏、快速、准确、简便而易于掌握等优点。现将其制备方法及特点报告如下.     

关于毛发血型检验中解离温度及指示红细胞的选择

本文对毛发ABO型测定时的解离温度及指示红细胞的选择进行了探讨。试验结果表明,在40℃条件下解离25min,结合抗体的释放与指示红细胞的凝集力均不受影响。用多人混合血液配制指示红细胞与效价为1∶128标准血清反应,便可获得满意的结果。     

单克隆抗M、抗N抗体的制备和应用

<正> 把用生理盐水洗涤5次的新鲜人ON型红细胞和纯化的血型糖蛋白A分别免疫BALB/C小鼠,用免疫的脾细胞同SPZ/O骨髓瘤细胞进行融合。37℃培养10～15天后,用ON型和OM型红细胞检测每个培养孔里培养基上清的凝集情况,建立了分泌高特异性和高效价的抗M和     

人类ABH抗原种属特异性研究

人类 ABH 红细胞血型抗原种属特异性从30年代起就有学者用人血清多克隆抗体和动物免疫多克隆抗体进行研究。他们发现某些动物的红细胞也有 ABH 抗原。这些动物的ABH 抗原能与多克隆抗体中部分抗体结合。根据对多克隆抗体 ABH 抗体的吸收情     

用浓缩唾液制备抗A、抗B血清的吸收精制方法

<正> 用浓缩1/2容量的ASe和BSe人唾液,采用多用途、多部位,并逐渐增大剂量的方法免疫大耳白兔,每4次为一个免疫程,可制备出1024倍以上的抗A、抗B血清.但所得抗血清除有抗A、抗B凝集素外,还含有大量与各型红细胞发生凝集的非特异性凝集素.经反复试验,先用人血粉吸收,然后用少量唾液吸收,可以除去非特异性凝集素,制备出特异性好的抗A、抗B血清,具体方法如下.