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目的比较Chelex-100法和硅珠法两种DNA提取法,在签字笔上附着微量脱落上皮细胞分型中的应用效果。方法 17名志愿者每人使用14支签字笔,每支笔每天使用20min,为期1个月,平均分为两组,分别保存1、3、5、7、14、21和28d,同时运用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取签字笔上遗留微量脱落细胞中的DNA,用Identifiler复合扩增系统在AB I 3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型,同时采集上述17名志愿者口腔拭子作为对照。结果以基因座检出个数为指标,使用后签字笔保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均有统计学意义(P0.01);口腔拭子保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论对于微量检材,应用硅珠法提取的DNA分型效果明显优于Chelex-100法,具有较高的应用价值,而在检材量比较多时区别不明显。 相似文献
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车辆上脱落细胞STR检验 总被引:2,自引:1,他引:1
目的对汽车方向盘及变速杆把手上的皮肤脱落细胞进行STR检验研究。方法用EZ-tape采集车辆方向盘及变速杆上的脱落细胞,Chelex-100法与磁珠法结合提取DNA,延长保温时间。定量后调整PCR反应体系,适当增加PCR循环数,增加PCR产物量及延长进样时间进行电泳检测,使用GeneMapperIDV3.2软件进行STR分型。同时,对比使用多重置换扩增技术对提取的DNA进行全基因组扩增。结果对33份车辆方向盘和变速杆上脱落细胞的检测,其中19份检出全部基因座的基因分型结果,9份检出部分基因型,5份未检出DNA分型结果。而利用多重置换扩增技术未获得满意图谱。结论本研究建立的脱落细胞收集、DNA提取、PCR扩增及检测方法适合于车辆上脱落细胞的检验,其结果优于使用多重置换扩增技术获得的分型。 相似文献
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目的对汽车方向盘及变速杆把手上的皮肤脱落细胞进行STR检验研究。方法用EZ-tape采集车辆方向盘及变速杆上的脱落细胞,Chelex-100法与磁珠法结合提取DNA,延长保温时间。定量后调整PCR反应体系,适当增加PCR循环数,增加PCR产物量及延长进样时间进行电泳检测,使用GeneMapperIDV3.2软件进行STR分型。同时,对比使用多重置换扩增技术对提取的DNA进行全基因组扩增。结果对33份车辆方向盘和变速杆上脱落细胞的检测,其中19份检出全部基因座的基因分型结果,9份检出部分基因型,5份未检出DNA分型结果。而利用多重置换扩增技术未获得满意图谱。结论本研究建立的脱落细胞收集、DNA提取、PCR扩增及检测方法适合于车辆上脱落细胞的检验,其结果优于使用多重置换扩增技术获得的分型。 相似文献
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目的建立脱落细胞负压吸附方法,用于DNA检验中衣物等载体上人体脱落细胞的采集。方法检材包括由志愿者佩带1、5、10、20m in纱线手套,穿着5、10、20m in的内衣以及外套、鞋、帽子、头套、袜子、水杯、矿泉水瓶等。在吸尘器的进风口处连接特制的吸筒,一端覆盖具有拦截和静电吸附细胞能力的特制吸附膜,选择适当负压对各检材相应部位进行吸扫。收集吸附膜上的脱落细胞,采用Chelex-100法提取DNA,AmpFLSTR Identifiler复合扩增试剂盒扩增检测。结果上述检材用本文负压吸附法采集人体脱落细胞,经检验均获得清晰、完整的STR分型图谱,并与检材提供者的基因型一致。结论本文建立的脱落细胞负压吸附技术可有效吸附载体上的脱落细胞,适用于DNA检案实践。 相似文献
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指甲缝处于手指的末端,在受害者与犯罪嫌疑人进行抓挠、扭打等激烈抵抗或徒手搏斗的过程中,犯罪嫌疑人的皮肤组织或微量血液经常会被刮附遗留在死者的双手指甲缝内。准确提取到死者双手指甲缝内脱落皮屑细胞并送DNA实验室检出犯罪嫌疑人的DNA数据,将为案件侦破提供关键线索和科学 相似文献
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目的寻求提高微量口腔脱落细胞检材的DNA检验成功率的简便有效的提取方法。方法对不同载体上的100份微量口腔脱落细胞检材采用小体积Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用IdentifilerTM复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从25根饮料吸管上提取的DNA量在0.72~116.7.8ng,16个水杯杯缘提取的DNA量在2.15-142.5ng,31个饮料瓶(罐)口提取的DNA量在1~34.65ng,10根筷子上提取的DNA量在3.35~26.6ng,12个果核中提取的DNA量在0.294~21.4ng,6份吃剩的骨头中提取的DNA量在0.88~5.88ng。100份检材性别及9个以上STR位点分型成功率平均为59.38%。除了使用者的个人原因外,检材的提取送检方式、检材的质地、饮料的性质对提取的DNA量有显著影响,是否加蛋白酶K对提取的DNA量无显著影响。结论采用小体积Chelex-100法可对60%左右的微量口腔脱落细胞检材提取DNA进行STR分型。 相似文献
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批量提取微量DNA在案件检验鉴定中的应用3例 总被引:1,自引:0,他引:1
随着DNA检验灵敏度的提高,越来越多的案件需进行微量生物检材DNA的检验,本实验室应用96孔板批量提取微量生物检材DNA,大大提高了检案效率,在案件中发挥了重要作用。现介绍如下:1方法1.1 DNA提取取细轴棉棒用TES浸湿棉棒上棉签后擦拭送检物品(如绳索、胶带、打火机、螺丝刀等)上可能有脱落上皮细胞的部位, 相似文献
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目的研究一次性使用牙刷上脱落细胞的DNA提取和STR分型。方法对一次性使用牙刷的采集方法、采集部位、DNA提取方法、存放时间对STR分型的影响进行比对研究。结果割取法可获得较高浓度的DNA,30例中检出9个以上基因座达27例,与擦拭法存在统计学差异(P〈0.05)。Chelex-100法、DNA IQTM法检出9个以上基因座分别为26例、24例,STR分型结果无统计学意义(P〉0.05)。提取牙刷的前、后部三束刷毛检出9个以上基因座分别达27例、28例,STR分型结果无统计学意义(P〉0.05);放置1天、1周、1个月、3个月、6个月的时间后检出9个以上基因座分别为28例、27例、22例、12例、7例。结论割取法提取一次性牙刷上的脱落细胞进行STR分型效果良好;放置时间越长的牙刷,检出率越低。 相似文献
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目的 探讨遗留在签字笔上微量脱落细胞DNA分型的可行性以及保存时间对分型的影响.方法 17名志愿者每人使用7支签字笔,每支笔每天使用20 min,为期1个月,分别保存1、3、5、7、14、21和28 d,运用硅珠法提取签字笔上微量脱落细胞中的DNA,应用荧光标记PCR-STR技术进行DNA分型,同时采集上述17名志愿者口腔拭子作为对照,分析签字笔作为检材进行DNA分型的可行性以及保存时间对DNA分型的影响. 结果以基因座检出个数为指标,签字笔脱落细胞和口腔拭子的DNA分型结果随保存时间变化而产生的差异具有统计学意义(P<0.01).签字笔保存1、3、5、7、14、21和28 d后进行DNA分型检出的基因座个数与对应的口腔拭子DNA分型检出的基因座个数相比差异均有统计学意义(P<0.01).签字笔使用后保存1 d进行DNA分型.可明确判读12个以上基因座的占41.2%. 结论签字笔上附着的微量手指脱落细胞可作为一种法庭生物检材进行DNA分型,但其保存时间会影响DNA分型. 相似文献
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正近年来,犯罪现场物证呈现多样化、微量化的发展趋势。微量物证具有体积小、隐蔽性强、不易察觉、不易毁灭等特点~([1])。目前微量物证DNA检验工作的瓶颈主要在接触性DNA检材的发现和提取上,接触性DNA类生物检材因其DNA含量少、PCR抑制物多、DNA检验成功率低而成为法医DNA检验的重点和难点~([2])。本文结合实际工作中的3起案例,对果核上微量生物物证DNA的提取方法 相似文献
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1案例简介与检验结果2005年6月10日5时许,廊坊市安次区某养猪场发现丢失仔猪百余头,价值6万余元。被盗猪舍墙外有一伊丽莎白瓜棚,瓜棚内瓜秧倒伏,并有杂乱足迹与瓜皮。现场提取到5块有新鲜牙齿印痕的瓜皮。通过使用Chelex法提取瓜皮上咬痕处脱落上皮细胞DNA,采用Identifiler试剂盒进行复合扩增,经ABI310型基因分析仪电泳分型,有4块瓜皮获得满意结果(见图1、图2、表1),为本案提供了有力的证据。2讨论一般在吃瓜过程中,口唇及口腔粘膜与瓜接触面大,摩擦力大,脱落细胞易粘于其上,同时吃瓜过程中,唾液分泌增多,遗留于瓜皮上的脱落细胞相应增… 相似文献
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