猪瘟酶标抗体和荧光抗体诊断猪瘟的比较试验

荧光抗体技术始子四十年代,在1969年和1970年间,法国巴斯德研究所专门就荧光抗体技术在兽医上的应用召开过两次国际性会议。目前荧光抗体技术已广泛用于细菌、病毒、原虫的鉴定,传染病的快速诊断,肿瘤抗原的研究等。继荧光抗体之后,在六十年代,医学工作者即开始用酶代替荧光素标记抗体,作生物组织抗原的鉴定和定位,从而创造了酶标记抗体新技术。近年来,国内亦开展了这方面的研究。笔者应用猪瘟酶标抗体和荧光抗体诊断猪瘟作了对比试验,现将其结果介绍如下。     

应用免疫酶组化法及兔体交互免疫试验诊断猪瘟

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病,是对养猪业危害最大的传染病之一。本病的早期诊断对于及时地采取预防措施,以制止疫病的传播蔓延并迅速扑灭猪瘟,具有重要意义。典型猪瘟的诊断一般可根据流行病学调查、临床观察、血清学诊断和病理解剖变化,结合...     

酶联免疫吸附试验对猪瘟抗体的监测

猪瘟 (CSF)是危害养猪业最严重的传染病之一 ,自 2 0世纪 5 0年代末我国应用猪瘟兔化弱毒(CSFV)疫苗免疫预防以来 ,有效地控制了其大面积的暴发流行。但近年来温和型、非典型性CSF的发生和免疫失败 ,仍然相当普遍 ,且仔猪的感染呈上升趋势 ,已成为猪病防制中最棘手的问题之一。因此 ,为了查清甘肃省规模养猪场CSF强毒感染状况及检验CSF疫苗的免疫效果 ,笔者应省内某 4个较大规模养猪场的要求 ,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自上述 4个猪场的 5 93份猪血清进行了检测。1　材料和方法1.1　诊断试剂　CSF强毒、弱毒单克隆纯化酶联…     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟病毒抗体的试验

本实验室曾研究报道了应用HRP-SPA-ELISA检测猪瘟病毒抗体的方法[见曾医大学学报7(4),391～396,1987],在此基础上,我们进一步探索适于基层兽医单位推广应用的血清学手段,建立了斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测猪瘟病毒抗体的方法。试验结果表明,该法敏感性高、特异性强,与兔体中和试验及HRP-SPA-EIISA呈极其显著的正相关。     

用酶标法诊断102例疑似猪瘟及免疫猪中和抗体的检测

猪瘟是威胁养猪业最严重的传染病。我县近十年来狠抓预防工作,实行高密度(95％以上)免疫注射,并推广应用猪三联苗。近年来,生猪年死亡率下降至2％以下,其中猪瘟死亡率为0.1％。为了进一步控制和消灭猪瘟,作者对疑似猪瘟病进行了实验室诊断,对免疫猪的抗体效价亦进行检测,以期为完善在农村条件的免疫程序和改进预防措施提供依据。     

猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验对猪瘟血清抗体的检测

应用猪瘟强毒单克隆抗体酶联免疫吸附试验 (ELISA)对青海省 4个县的免疫猪场 62 9份猪血样进行检测。结果 ,检出抗体阳性 42份 ,平均阳性率为 6.68%。提示经猪瘟疫苗免疫猪群感染了猪瘟强毒。     

酶标记免疫吸附试验

酶标记技术是在标记抗体(荧光标记、同位素标记)试验和组织化学基础上发展起来的一种新技术。1966年Nakane和Avra-meas等首先应用酶标记的抗体和细胞抗原发生反应,再用细胞化学染色法显示出病毒抗原在细胞内的位置。其后,Miles和Hales首先在免疫测定中用酶代替同位素。直到1971年Van Weeman和Schuurs,以及En-gvall和Perlman才分别详细地介绍了酶免     

应用萤光抗体法诊断猪瘟

目前许多国家,已应用萤光抗体法诊断猪瘟。这是一种特异性较高、并具有实用价值的诊断方法。日本应用的萤光抗体法分为两种:一种是从病猪脏器采取组织(最好是扁桃腺)涂抹标本或在冻结切片标本上进行萤光抗体染色;另一种是采取病猪的脾和扁桃组织作成乳剂接种子猪肾细胞,在1～2天内进行细胞染色。这两种方法,被广泛应用的是第二种,一般被称做组织培养萤光抗体法,主要是用培养细胞进行诊断。这种方法易于鉴别,准确性高,     

混合血清中和抗体测定法用于猪瘟免疫监测

1985年6月,我们对中和抗体监测做了改进,采用混合血清测定猪瘟抗体,既省时省力,又扩大了监测面。 (一)材料 1.试验猪:选群众自养的免疫过2次的猪15头(分成3组),免疫过1次的猪5头为1组;另选群众自养的未免疫猪2头,作为对照组。试验猪均为50～80日龄的仔猪。 2.试验兔:为1.5～2公斤体温恒定的健康家兔。 3.猪瘟兔化弱毒:系农牧渔业部南京药械厂提供的猪瘟兔化弱毒单价苗,1984年6月5日出厂,批号为110-2,经兔传代复壮而得。使用前用敏感家兔测定其最小感染量(MID)     

猪瘟疫苗的人工授精免疫试验

本试验结果表明,用 6头份猪瘟疫苗和精液混合后对发情母猪人工授精免疫效果较好,监测至132日龄,血清抗体滴度仍在保护价以上。用这种方法免疫不影响受孕率、受胎率和产仔率。 (一)材料与方法 1.试验猪:由江陵县岑河镇牲猪品改站提供大约公猪1头;母猪6头,其中2头新花母猪、2头经产母猪(均为地方品种监利猪)、2头大约母猪。 2.猪瘟疫苗:湖北省兽医生物药厂生产的冻干组织苗和细胞苗。 3.诊断液:由湖北省兽防站提供农业部成都兽医药械厂生产的猪瘟血球凝集抗原及稀释液。 4.精液:由岑河镇品改站饲养的公猪现采现用。     

应用荧光抗体技术诊断猪瘟病例

1990年4月,我区某猪场养猪108头,突然发病25头,死亡13头,经用抗生素和磺胺类药物治疗无效。病猪主要表现为精神萎顿,食欲减退,行动缓慢无力,体温40℃,鼻镜干燥,眼圈发红。病初便秘,后期腹泻,在耳根、胸腹部皮肤有出血斑点,病倍一般7～15天,多发生于7～9月龄的猪。     

应用淀粉酶试验诊断猪瘟

应用淀粉酶试验诊断猪瘟祁小红（甘肃省武威市畜牧兽医技术服务中心７３３０００）１９９４年２～５月，武威市一些乡镇流行猪瘟，发病、死亡猪无年龄、性别和品种差异。经调查，病猪群均未作过猪瘟、猪丹毒及猪肺疫免疫。由于条件所限，不能进行猪瘟的特异性试验诊断，我...     

用猪瘟兔化弱毒中和试验检测猪瘟抗体

1984年9月在中国兽药监察所主持下,部属有关药厂参加,在我厂进行猪瘟兔化弱毒毒种安全试验时,发现注苗后21天的免疫猪,采血分离血清,用100个感染剂量的猪瘟兔化弱毒作兔体中和试验(兽医生物药品制造及检验规程方法,下简称规程法)检不出中和抗体。为此,我们对这一问题作了进一步的试验。现将试验结果报告如下。     

应用猪瘟酶标技术普查诊断猪瘟病的报告

为了加快消灭猪瘟的步伐,我区于1982年,全面开展普查猪瘟病的实验诊断。在不同类型的88个公社,收集筛选病料216头,制片648张,作猪瘟酶标抗体试验(直接法),检出的阳性和可疑病料,再作兔体交互免疫试验。现将其结果报告如下: (一)主要试验材料和试液的配制     

国外试验猪瘟气雾免疫获良好效果

苏联曾用35～40公斤的猪作猪瘟的气雾免疫试验。方法为将兔化猪瘟疫苗1(克):1(毫升)稀释于盐水中,并加入1％的甘油。喷雾免疫在特别安排的房舍中进行。喷出的雾滴大小约18μ,雾滴在空气中的浓度为每立升空气中含有0.1～0.2mg。使猪吸入雾滴4～7分钟。试验用36头猪,平均吸入的雾滴等于6.6～40.0mg的干燥疫苗。用12头猪行肌肉射疫苗作     

初生仔猪哺乳前猪瘟免疫试验

(一)试验方法与步骤 1.1983年3月于成都市某种猪繁殖场,应用农牧渔业部成都药械厂生产的猪瘟兔化弱毒苗,按常规稀释,对5头母猪初生的27头仔猪,在未吸乳前,于每只小仔猪耳后肌肉注射1毫升疫苗。注苗后3小时再让其吸吮初乳。各窝未注苗仔猪21头亦同时吸乳(为对照),观察25天以上(均未发现异常反应)。疫苗批号8302,出厂日期1983年1月。     

三联抗原酶免疫试验诊断血吸虫病的方法简介

近年来,在血吸虫病研究中,我们设计了一种由尾蚴、成虫及虫卵三者切片组成的联合抗原酶免疫染色法,兹简介如下。(一)材料和方法1.成虫—虫卵—尾蚴三联抗原切片的制备:(1)组织块制备:①用1500条日本血吸虫尾蚴感染家兔,45天后剖杀取肝脏,将其剪成约0.5cm~3的小块,用生理盐水洗净。②取一正常小鼠心脏,用手术刀剖开,在心脏片中划数条槽;将感染家兔时预留的(固定或未固定)尾蚴约50条用滴管滴在心脏内包裹,再用线捆扎。③另取一正常小鼠心脏,用同样方法剖开,内放3～5条血吸虫成虫包裹捆扎。     

猪瘟ELISA抗体与免疫保护力的相关性研究

用攻毒试验对猪瘟ELISA抗体与免疫保护力的相关性进行了研究,结果表明,80倍稀释血清ELISA OD值>0.3的疫苗注射猪,攻毒100％保护;0.30≥OD值>0.20的疫苗注射猪,攻毒75％保护;OD值≤0.20时,若为非疫苗注射猪(母源抗体),则攻毒不保护;若为疫苗注射猪,则仍有少数可以保护。从而进一步证实,应用HRP-SPA-ELISA不仅可以评价疫苗免疫效果,而且可以监测群体免疫水平,估测群体保护率。     

广西部分种猪场猪瘟抗体监测和免疫效果分析

猪瘟是严重威胁养猪业发展的重要疫病之一 ,多年来 ,广西壮族自治区各级兽医业务部门一直把猪瘟的免疫作为全区畜禽疫病防制的重点 ,使该地区猪瘟的暴发流行基本得到控制。但零星发生的猪瘟特别是免疫种猪的隐性感染带毒现象仍然存在 ,给养猪业造成严重的经济损失。为摸清广西种猪场猪瘟免疫的确切效果 ,笔者在 1999～ 2 0 0 0年对全区内部分种猪场进行了猪瘟抗体监测。1　材料与方法1.1　血清样品　为采自全区 2 8个种猪场猪瘟免疫期内的猪血清 ,共 10 65份 ,其中种母猪 482份、后备母猪 2 0 6份、种公猪 84份、断奶仔猪 2 93份。1.2　诊断…     

酶标记免疫吸附试验(续)

(七)酶结合物 通过化学或免疫学方法使酶与蛋白质或小分子有机化合物(半抗原)结合,称为酶的交联或酶标记,结合的产物称酶结合物。理想的结合是既保持酶和抗体的生物学活性,又有较高的酶分子结合比率。目前酶标记抗体的方法有戊二醛法和高碘酸钠法。这里只介绍高碘酸钠法(Nakane等,1974)。