鼠痘病毒分离和鉴定

鼠痘病毒分离和鉴定张伟，赵晓伟，唐竹萍，王和玉（江苏省实验动物中心南京２１００２９）鼠痘（Ｍｏｕｓｅｐｏｘ）又名小鼠传染性脱脚病，是由鼠痘病毒引起的一种急性传染病，感染小鼠死亡率极高。本病遍及全世界，美国曾在１９７９～１９８０年间报道有效严重的爆发流...     

鸡痘病毒自然分离株的某些特性

鸡痘病毒自然分离株的某些特性徐春厚吴凌房秀云邵红程葛（黑龙江八一农垦大学动物科技学院密山１５８３０８）鸡胚的绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）已广泛用于分离和增殖鸡痘病毒，在ＣＡＭ上鸡痘病毒可形成痘斑和嗜酸性包涵体。作者于１９９５年从牡丹江地区某种鸡场发病鸡群的鸡...     

绵羊溶血性曼氏杆菌的分离鉴定

本研究对疑似患有溶血性曼氏杆菌的病羊肺组织进行病原分离,并对分离菌株进行生化反应、动物致病性试验、PCR鉴定和药敏试验。结果表示,分离菌株为革兰阴性短杆菌且具有较强的致病性,经生化试验和PCR鉴定为溶血性曼氏杆菌,该分离菌株对大部分抗菌药物敏感,对红霉素和庆大霉素、磺胺间甲氧嘧啶耐药。本研究为溶血性曼氏杆菌病选择合理、正确的抗菌药物提供了一定的科学依据,并为进一步研究其耐药机制奠定了基础。     

绵羊肺腺瘤病毒内蒙古株的分离与观察

以内蒙古某羊场自然感染绵羊肺腺瘤病的病肺组织 4例和 3月龄绵羊胎肺 2例作为材料 ,对胎肺细胞进行了原代培养并接种绵羊肺腺瘤病毒悬液 ,进行了绵羊肺腺瘤病毒 (JSRV)的分离 ,同时采用电镜负染色技术和超薄切片透射电镜技术对上述样品进行了观察。结果表明 ,自然感染绵羊肺腺瘤病的 4例病肺组织中都有散在的病毒粒子 ,其直径为 10 0～ 12 5nm ,接种病毒悬液的胎肺细胞从第 2代到第 9代均出现细胞病变 ,但对绵羊胎肺培养的病毒悬液电镜负染色观察未发现典型的病毒粒子 ,而超薄切片透射电镜观察发现了病毒样粒子     

猪链球菌生化突变株的分离与鉴定

１９９７年８月,广东省某猪场的猪群发生一种传染性疾病,其特点是各种年龄的猪均可感染发病,但以哺乳期的仔猪多发;就整个猪群而言,发病率较低（约１０％左右）,但病死率则高达８０％以上;病理变化表现为严重的纤维素性胸膜肺炎、心包炎和腹膜炎,胸、腹腔有多量淡...     

两株气单胞菌的分离与鉴定

两株气单胞菌的分离与鉴定孔繁德黄印尧吴文忠（厦门动植物检疫局３６１０１２）陈琼（厦门市家畜检疫站）气单胞菌在自然界尤其是水中广泛分布，该菌不仅可引起鱼类、蛙类发生败血症，也可引起其他人工养殖的水生经济动物以及家禽（特别是水禽）发病死亡，造成巨大的经济...     

猫源弓形虫虫株的分离与鉴定

将猫的心、脑、舌用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理后接种小白鼠,经连续传代分离弓形虫虫株,用特异PCR方法对所分离的虫株进行了鉴定。分别从24只猫的样品中分离出8株弓形虫虫株,用弓形虫种特异的PCR方法对8个虫株进行鉴定,均得到弓形虫的特异条带;测序证明所扩增出的DNA片段确为弓形虫的核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS-1)部分序列。研究结果表明,将动物组织用盐酸-胃蛋白酶溶液消化处理后接种小白鼠是一种分离弓形虫虫株较为理想的方法,特异PCR方法能准确、快速地鉴定弓形虫虫株。     

猪瘟病毒GSLZ株的分离与鉴定

采集甘肃省兰州市某猪场疑似猪瘟样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种PK-15细胞并盲传至第12代,结果在盲传2代之后的细胞培养物中均可检测到猪瘟病毒(CSFV)E2基因.经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈约25 nm典型的CSFV病毒粒子,将其命名为GSLZ株.对E2基因核苷酸序列的分析显示,该分离株与标准参考毒株...     

鸽痘病毒的分离鉴定及4b基因序列分析

对广东省某规模化肉鸽养殖场暴发的疑似鸽痘进行了临床观察、病毒分离鉴定、动物回归试验和4b核心蛋白基因序列分析。成功分离得到1株皮肤型鸽痘病毒KP3-PPV。将KP3-PPV接种7日龄乳鸽后发现乳鸽从接种后第5天在翼膜接种部位开始出现黄色增生性结节,在接种后第18天在鼻翼、嘴角周围开始出现黄色增生性结节。扩增KP3-PPV的4b基因序列并进行比较分析,结果显示该分离株与南非FeP2株鸽痘病毒的同源性达100%,与2株企鹅痘病毒和火烈鸟痘病毒的同源性分别为99.36%、99.11%和98.05%,与鸡痘病毒的同源性为92.6%～93.09%,与其他禽痘病毒的同源性仅为76.03%～77.78%。本研究为鸽痘病理学研究、禽痘病毒间种属鉴定、鸽痘致弱疫苗开发提供了重要参考依据。     

绵羊瘤胃内厌氧菌的分离和鉴定

绵羊瘤胃内厌氧菌的分离和鉴定王良娟，马勋，靳万贵，秦学敏，周霞，王晓兰（新疆石河子农学院８３２００３）我们从绵羊瘤胃内分离出８株厌氧菌，用厌氧菌的ＧＡＭ肉汤培养物，进行气相色谱测定，根据各厌氧菌的革兰氏染色特性和培养物代谢产物的气相色谱法分析及生化反...     

绵羊体分离的一株弱毒弓形虫

随着我国人和动物弓形虫病研究工作的深入开展,已查知弓形虫血清抗体分布相当普遍,并从人和某些动物体分离出不同毒力的弓形虫株。1986年笔者从青海省互助县1只绵羊体分离出1株弓形虫,经鉴定为一弱毒株,命名为青海互助绵羊株(QHO)。     

鸭黄病毒AH01株的分离与鉴定

为查明2010年10月以来安徽望江等地的蛋鸭相继暴发的以产蛋量大幅下降为特征的传染病的病因,进行了病毒分离、特异性目的基因片段扩增和动物回归试验。结果显示,分离毒(命名为AH01株)能致死鸭胚和鸡胚,不具有血凝性。对病料和接毒鸭胚尿囊液进行RT-PCR,可扩增出基因片段,其核苷酸序列与鸭黄病毒BYD-1株的相似性为94.1%。用鸭胚分离毒接种300日龄蛋鸭,能够复制出产蛋量下降病例。分析表明,分离毒为鸭黄病毒,该病毒是引起此次鸭病疫情的病原。     

一株塞内卡病毒的分离与鉴定

2018年11月,河南南阳地区某养殖场发生了猪水疱病,经实验室检测确诊为塞内卡病毒(SVV)感染。选择SVV检测阳性的临床样品,处理后接种PK-15细胞,经多次传代培养,成功分离到1株塞内卡病毒,命名为HeNNY-1/2018株,并在PK-15细胞上对该毒株进行了空斑纯化和生长曲线的绘制。为进一步研究其遗传进化特点,采用RT-PCR技术扩增了其全基因组序列,并分别构建了基于VP1基因和全基因组的系统进化树。结果表明,分离株HeNNY-1/2018在感染后第24小时病毒效价最高为10~(7.6)TCID_(50)/m L。基因组核苷酸同源性分析显示,分离株HeNNY-1/2018与我国广西分离毒株GXHZH-1和美国毒株KS15-01呈现较高的核苷酸同源性,分别为98.0%和98.7%。进一步分子进化树分析显示,该毒株与2018年报道的广西地区的毒株处于较近的进化分支,而与我国早年间分离得到的其他毒株亲缘关系较远。本研究为河南地区塞内卡病毒流行状况提供了新的证据,也为下一步研究该病的诊断和防控提供了有力支撑。     

胎羊与成年绵羊原代肝细胞的分离培养与鉴定

为了获得稳定、可持续传代的绵羊肝细胞,采集110～120 d的绵羊胚胎肝和正常未怀孕成年绵羊肝,用胶原酶两步灌流法分离肝细胞;用PAS染色法和CK-18免疫荧光法鉴定细胞;用CCK-8测定肝细胞第6、12、24、36、48、60、72和96小时的D450值,绘制生长曲线.结果 显示,获得的绵羊原代肝细胞形态完整,贴壁良...     

黑龙江省鸭肝炎病毒HD-Ⅰ株的分离与鉴定

从黑龙江省某鸭场疑似鸭病毒性肝炎 (DVH )的发病雏鸭肝等组织中分离到 1株病毒HD Ⅰ株。经病理学检查、电镜观察、鸭胚中和试验、雏鸭保护试验、动物回归试验等鉴定为血清Ⅰ型鸭肝炎病毒 (DHV)。证实引起该鸭场雏鸭发病和死亡的主要原因为DVH所致。用DHV标准R85 95 2毒株多次强化免疫健康鸡 ,获得高效价的鸡抗鸭肝炎超免疫抗体。     

猪生殖与呼吸综合征甘肃株的分离鉴定

在对甘肃省某规模化养猪场发生的繁殖障碍和仔猪大量死亡的疫情诊断中,首次在甘肃省分离到1株猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),并进行了初步鉴定.证实猪生殖与呼吸综合征(PRRS)已在甘肃省存在,并在个别猪场暴发流行.     

陕A株伪狂犬病病毒的分离与鉴定

陕西省大荔县八鱼公社西营大队的耕牛于1978年2月底发生疫情。经过对疫情的调查与研究,已诊断为牛伪狂犬病(Pseudrabies)或称奥叶兹基氏病(Aujeszkys disease)。由于牛伪狂犬病在西北地区未见报道,陕西省仅初次发生,因此,有进一步分离培养病毒的必要。其二,为了准备应用福建省兽医生物药品厂制造的牛伪狂犬病疫苗,故有目的地通过闽A株伪狂犬病病毒的免疫血清鉴定陕A株伪狂犬病病毒,为今后有效控制此病提供可靠的依据。所以,将采取的病料进行了伪狂犬病病毒(以下简称PrV)的分离与鉴定。现将结果报告如下。     

犬细小病毒新疆株的分离与初步鉴定

犬细小病毒新疆株的分离与初步鉴定符子华，李淑霞，呼西旦，易中，胡尔玛西，王进成，刘军（新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐８３００００）（乌鲁木齐动植物检疫局）犬细小病毒（Ｃａｎｉｎｅｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＣＰＶ）是一种引起犬出血性肠炎或心肌炎的自主性细...     

绵羊睾丸支持细胞的分离鉴定及其在山羊痘病毒疫苗株培养中的应用

为研究绵羊睾丸支持细胞对山羊痘病毒的增殖特性,采用胶原酶Ⅳ和胰酶两步法分离绵羊睾丸支持细胞,通过倒置显微镜进行形态学观察、细胞染色鉴定以及特异性表达ABP蛋白鉴定,然后接种山羊痘病毒疫苗株。结果显示,分离的原代细胞24 h可长满单层,用0.05%的胰酶消化处理3次可得到纯度约为80%的睾丸支持细胞;油红O染色可观察到绵羊睾丸支持细胞的细胞质含有大量脂肪滴,细胞核可见双极小体;HE染色后细胞核为蓝色,细胞质呈红色或粉红色。ABP蛋白间接免疫荧光可观察到在绵羊睾丸支持细胞的细胞质和细胞核周围有绿色荧光,经显微镜下计数其纯度达80%以上。接种山羊痘病毒疫苗株后第4天有90%细胞产生病变,细胞变圆,细胞聚集成簇状,细胞收缩、细胞核出现空泡化。qPCR扩增Ct值为18.81,Ct值低于其他细胞传代数值。结论,本研究成功分离培养了绵羊睾丸支持细胞,该细胞能较好地培养山羊痘病毒疫苗株,对羊痘疫苗的生产有一定的现实意义。     

口疮病毒XC13株的分离鉴定

采用MDBK细胞对西昌市某山羊场疑似患有口疮的山羊病料进行分离培养,经动物回归试验、PCR、遗传进化分析等对分离毒株进行鉴定。结果表明,病料在MDBK细胞上产生致细胞病变;接种病料的山羊出现典型的传染性脓疱;PCR从分离毒株中扩增出F1L基因片段,该基因片段序列与口疮病毒(ORFV)参考株FJ-SL2、FJ-SL1的核苷酸序列的同源性分别为99.8%、99.5%,亲缘关系较近,遗传进化分析处于同一分支上。本研究从疑似口疮病料中成功分离鉴定出1株口疮病毒,遂将其命名为ORFV XC13。