培养基质量与制备环境的关系

(一)材料与方法 1.生理溶液:灭菌Hank’s滤液100ml。灭菌干燥的脱脂棉签15支,用涂抹法采样备用。 2.培养基:无菌制备绵羊脱纤血30ml,再以无菌手续制备以1:2营养(牛)肉汤作基础的鲜血琼脂平板(SBAP)若干付,V_1/V计加血量7％、W/V计加琼脂1.6％,经15磅30分钟蒸汽消毒灭菌,终末pH7.6,专留10付作启皿采样用。     

兔中耳炎的诊断和治疗

细菌学诊断 ①采取新鲜脓性分泌物作病料涂片,以Loeffler氏美蓝液染色,发现典型的两极着色小杆菌,即可初步确诊。②培养:接种病料于血液琼脂上,孵育24h后,发生不溶血的稍透明的小菌落,制成涂片,染色,镜检,发现革兰氏阴性,两极着色的小杆菌,即可确诊。③动物试验:将被检病料或脑组织磨细用灭菌生理盐水作1:5～1:10稀释,给小白鼠皮下注射0.2ml,于48h内死亡,剖检内脏器官呈败血症病理变化。如果给家兔鼻腔内滴注0.2％～0.5％煌绿液2～3滴,如为巴氏杆菌带菌者,则在滴注后18～24h出现化脓     

弯杆菌性肠炎的病理生理学

空肠弯杆菌(Campylobacter Jejuni)于1957年首次指出与肠道疾病有关。由于它在公共卫生上的重要性,促使研究工作者进行了许多阐明其病原学特征及所致疾病的研究。现仅就近年来弯杆菌性肠炎的病理生理学研究进展情况概述如下。 (一)病原菌的性质 空肠弯杆菌在分类上属于螺旋菌科,弯杆菌属。本菌革兰氏染色阴性,呈多形性,对数期培养物呈弧形或螺旋性杆状,老龄培养物则以圆球形为主。本菌藉助其一或多根两端鞭毛而有迅速移动的运动力。在微需氧环境(5～10％氧,3～10％二氧化碳)中于42℃生长最佳。可在许多基础培养基包括布氏杆菌琼脂和缪勒—亨通琼脂上生长,但欲获得最佳的分离需添加营养补充物,如溶解的全血、硫酸亚铁、次亚硫酸氢钠、丙酮酸钠等。最近,Tenover等(1985)应用一种原来用于培养淋球菌的化学上特定的改良培养基,发现58％的空肠弯杆菌分离物至少对一种氨基酸是营养缺陷型,并且研究出一种可用于空肠弯杆菌流行病学研究的生长定型法。     

贵州遵义地区耕牛“烂脚病”的研究——镰刀菌菌料饲喂水牛试验及其毒素的鉴定

贵州遵义地区耕牛“烂脚病”,经调查,霉稍草人工发病试验、病原分离与鉴定、含菌饲料饲喂试验及其毒素提取鉴定,确认耕羊“烂脚病”是由镰刀菌毒素中毒所致。 (一)病原分离与规定 被检样品系采自绥阳、湄潭、遵义三个病区的发病牛采食之霉稻草,共20份。 样品用肥皂水搓洗,自来水冲净,无菌水洗涤5次,然后以70％酒精棉球拭干。剪成1.5～2厘米小段,混合后随机取小段,等距离点植于Czapek—DOX琼脂平板上,26℃温箱中培养4～5天,钓取可疑镰刀菌菌丝移植于PSA琼脂平板上,培养15天,镜检其纯度,如不纯则进行单孢分离。     

耕牛“黑水泻”镰刀菌毒素——脱氧雪腐镰刀菌烯醇的分离与测定

从耕牛“黑水泻”病区筛选的禾谷镰刀菌8134(Fusarium graminearum),接种于灭菌的玉米粉培养基中,于28℃培养2周后,提取培养物所获粗毒素1 ml(相当于4g菌玉米),抑制豌豆发芽率为100％,1.65ml粗毒素致家鸽于50分钟内发生剧烈呕吐;猪食入150g菌培养物于1小时后出现强烈呕吐和拒食。基于以上生物活性测定指标,将此玉米培养物用乙酸乙酯提取,硅胶柱层析和硅胶CF薄层纯化,获得了与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxyniv alenol CBD1)标准品薄层分析数据相同的毒素结晶。     

山羊血琼脂和血清琼脂培养细菌的效果试验

在兽医微生物检验用血液琼脂或血清琼脂培养基的制备中，多采用牛、马、绵羊或兔血。笔者曾用山羊血或血清琼脂培养基培养巴氏杆菌，取得了满意的培养效果。为了判定山羊血在培养基中的应用价值，又以大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和葡萄球菌为试验菌，进行了试验。１　试验材料１．１　试验菌　大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌，均由山东农业大学动物科技学院中心实验室提供。１．２　营养琼脂　上海试剂厂生产，批号９６０７０２；新鲜猪胃和鲜牛肉由茌平县肉联厂提供。１．３　羊血　选健康山羊和绵羊，无菌操作自颈静脉采…     

甘露醇治疗驴妊娠毒血症

笔者以甘露醇为主药组成新的配方治疗驴妊娠毒血症,收到较好的效果。具体方法 ①20％甘露醇500ml,25％葡萄糖1000ml,生理盐水1000ml,维生素C 50ml,20％安钠咖30ml,每天上午静脉注射1次。②下午用5％碳酸氢钠500ml静脉注射。另用维生素B_(12)20ml作肌肉注射,1日2次。连用2天后,患畜症状减轻逐渐恢复正常,治疗5天后痊愈。     

鸡马立克氏病血清学诊断

材料方法 ①标准抗原、标准阳性血清:系冻干制剂,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供。②被检血清:抽样采自4个鸡场共242份血清。③器材:巴氏滴管、烧杯、培养皿、打孔器。④方法:制底膜:用蒸馏水配制的0.3％的稀琼脂溶液,水浴加温使充分融化后,加入培养皿。每个直径8.5cm的培养皿大约加3ml琼脂液。置37℃恒温箱中充分干燥后备用。铺琼脂:用含8％氯化钠的磷酸盐缓冲液(0.01ml     

孕母猪初生仔猪口服大肠杆菌K_(88)ITB双价工程疫苗免疫效力对比试验

用K_(88)ITB工程活疫苗(1)给怀孕母猪组于预产期之前3周,每头口服500亿活菌;(2)给初生仔猪组于出生后24小时,每头口服25亿活菌。试验结果:免疫的怀孕母猪组与初生仔猪组的仔猪腹泻发病率分别比对照组的下降了46.5％和40.9％;两免疫组的仔猪死亡率分别下降了29.4％和25.6％。说明K_(88)疫苗给怀孕母猪接种,更实用且免疫效果更佳。     

猪传染性水泡病传代细胞甲醛灭能苗的研究

一、材料和方法 (一)病毒(强毒):本强毒是1974年采自漯河冷冻厂病猪水泡皮,磨碎接种乳鼠,用鼠毒五代接种传代细胞。细胞病变明显,且有规律。 (二)供生产病毒的细胞培养:我们的试验都是用IB-RS-2系猪肾传代细胞进行的。引自农林部兽医药品监察所。 1.培养液:以Hanks液加0.5％乳蛋白水解物为基础液,另加N_(16)液8％、牛血清10％、青霉素每毫升含100单位,链霉索含100微克,用灭菌碳酸氢钠调整pH为7.0左右。维持液含牛血清3％,pH为7.4左右,其他相同。     

布氏锥虫伊氏亚种体外培养的研究——用小鼠腹腔巨噬细胞作滋养层培养布氏锥虫伊氏亚种

用小鼠腹腔巨噬细胞作滋养层,以HEPES缓冲的添加20％兔或马血清、0.1％葡萄糖、0.2mmol 2-巯基乙醇、2mmol丙酮酸钠、0.1mmol次黄嘌呤(用马血清时)、青霉素(100IU/ml)和链霉素(100μg/ml)的含MEM非必需氨基酸的MEM培养液体外培养布氏锥虫伊氏亚种获得成功。连续培养60天,培养虫体绝大多数仍保持细长形态,并对小鼠有很高感染性。文内还就实验方法和结果结合文献对一些问题作了讨论。     

应用DM_(423)治疗鸭下痢

DM_(423)(促菌生、止痢灵)是上海松江兽医生物药品厂分厂生产的活菌粉剂(每克含菌5～10亿个)。笔者用DM_(423)对柳州市郊羊角山乡某专业户1月龄左右的1000只病鸭,分为5个组(每组200只)进行治疗试验。结果:DM_(423)组,给药后72小时疗效达100％;而青、链霉素组止痢效果为90.05％;敌菌净组为90.25％,痢特灵组为90.2％;土霉素组为90％。     

保定1号对鹿科、熊科动物的保定效果观察

笔者于1985年初将保定1号应用于鹿科、熊科动物,多次实践证明该药具有作用快、用量小、使用方便、安全范围大,并有专一性解救药等优点,对这些动物的保定效果确定。 (一)材料和方法 1.试验动物:梅花鹿14只、黇鹿1只和棕熊1只。 2.药物:由北京科技协作中心精细化学分部提供。保定1号,每ml含新保灵1.85mg和盐酸氯丙嗪15mg,为灭菌水溶液;回苏1号浓度为2％,是新保灵的专一性解救药,本制剂、4ml回苏1号可使1ml保定1号保定的动物迅速恢复。 3.方法:依剂量、体重准确吸取药量,用麻醉枪注射于臀部肌肉。动物倒地后进行呼     

127株不同来源的猪丹毒杆菌的分型鉴定

目前,按照Kuosera的分型系统,根据菌细胞壁的可溶性耐热抗原,将猪丹毒杆菌分为27个血清型(含亚型),命名为1、1a、1b、2、2a、2b、3………22型和N型。最近,徐克勤等(1984)又报告一种由健康猪扁桃体分离的不同于(国际标准血清型的新株,初步定为23血清型。我们用国际分型方法,通过琼脂扩散试验对127株不同来源的猪丹毒杆菌作了血清学分型,现将结果报告如下。     

应用酶联免疫吸附试验检查牛羊布氏杆菌病

为了将酶联免疫吸附试验(ELISA)更有效地应用于牛、羊布氏杆菌病的诊断,我们对该方法所用的抗原、酶标抗体、检测程养基,37℃培养72小时。将耶氏09接种于普通琼脂培养基,于25℃培养36小时。用灭菌生理盐水将三种培养物洗下,于60℃水浴中1小时杀死。用胰酶消化法提取可溶性成分,定量分装,     

刚果嗜皮菌对几种理化因素的抵抗力试验

嗜皮菌病是一种人畜共患的皮肤传染病,世界各地均有发生,近年来已经证实我国甘肃、四川、青海等省也有本病流行[1、2]。但是,迄今还未见到有关刚果嗜皮菌对理化因素的抵抗力的报道,也缺乏实验室内理想消毒方法的根据。有鉴于此,特进行本试验。 材料与方法 (一)菌种 1.刚果嗜皮菌:系本所1981年11月12日冻干保存的甘孜牦牛刚果嗜皮菌,菌号811F_5。用灭菌无离子水溶解后接种于F5A肉汤中,37℃下培养增菌,将0.1毫升菌液接种于4.4毫升F5A肉汤中,37℃培养,涂片镜检,确认为本菌的72小时培养物,供试验用。 2.大肠杆菌:系本所外检组惠赠,作对照菌用。     

奶牛粪便中空肠弯杆菌的检测

空肠弯杆菌属于胚胎弯杆菌空肠亚种。关于从猪、鸡(腹泻患者)等粪便中分离出该菌的报道较多,但目前尚未见到从奶牛粪便中分离出该菌的报告。为了解空肠弯杆菌在奶牛体内的带菌情况,作者采集133头奶牛粪便,进行了细菌学调查。 (一)材料与方法 1.样品来源:在长春市及农安县的两个牧场,用无菌棉拭子从奶牛肛门直接采样133份。 2.培养基:①分离培养基:上海市卫生防疫站生产的空肠弯杆菌选择性琼脂为基础,每100ml加5～10％脱纤维羊血,50％卵黄盐水10ml;每100ml上述培养基中加入多粘菌素B250μg、万古霉素1.5mg、磺胺增效剂0.5rug,摇匀后倾注平板。②所用其他培养基均为自     

禽脑脊髓炎病毒琼扩抗原的制备及其在评价鸡群抗体水平中的应用

以标准的禽脑脊髓炎（ＡＥ）病毒ＶＲ毒株和分离的野毒株分别感染ＳＰＦ鸡胚，取其病料组织制成琼脂扩散抗原。在含２０％ＮａＣｌ和０．５％苯酚的０．８％琼脂凝胶中，用这种抗原以琼脂扩散试验检测ＡＥ抗体，结果稳定，特异性强，方法简便迅速。     

试用过氧乙酸治疗猪疥癣病

笔者试用0.5％过氧乙酸水溶液治疗猪疥癣,疗效可靠,方法简便。 配制方法 在一个500ml玻璃烧杯中加入冰醋酸(含纯98％)100g,过氧化氢(38％)50g,沿烧杯壁缓慢加入浓硫酸(98％)4.5g,用玻璃棒搅拌均匀,室温下放置一昼夜,然后转入大的容器,再加入4500ml蒸馏水和1500ml乙醇(95％)即成0.5％的过氧乙酸溶液。 试治方法 治疗前应清除病猪身体表面的污物和痂皮,剪去有病部分的毛,用温肥皂水洗净,再括去软化了的痂皮,待晾干后用棉棒沾上药液在患处涂擦,每天1～2次,连续3～4天即可痊愈。     

枝原体的生物学性状

(一)溶血性 枝原体一般都有溶解豚鼠血球的性质,特别是肺炎枝原体有很强的溶血能力。在含3％血球的琼脂培养后,于冰箱中放置一夜,即在菌落周围出现溶血。肺炎枝原体和肺枝原体等为B型完全溶血,其他型枝原体溶血反应迟缓,而且是d型不完全溶血。使用的血球以豚鼠的最好,家兔的最差。溶血素是向琼脂扩散的毒素,是能通过透析膜的低分子物质。在氧分压下降和菌量生长过多时不能发生溶血反应,因此,氧化反应与溶血反应是有某些关联的。经56℃加热或用紫外线杀死的枝原体无溶血能力。最近弄清了溶血球就是过氧化