转移因子纳米脂质体的制备及其体内吸收情况的观察

采用逆相蒸发法制备转移因子脂质体(TFL),以包封率为优化指标,正交试验优选最佳配方;电镜下观察TFL形态,紫外法检测包封率和渗透率;并用电镜观察用药后小白鼠小肠的吸收情况。结果,确定的最佳制备工艺为:卵磷脂与胆固醇的摩尔比为2∶1,转移因子(TF)浓度为6 mg/mL,吐温-80为1 mL,有机相与水相的体积比为4∶1。电镜下大部分TFL粒径小于100 nm,分布均匀,包封率高达49.5%,4.5个月后的渗透率为52.4%。采用优选工艺制备的转移因子纳米脂质体具有一定的稳定性,而且小肠内吸收良好。     

头孢噻呋钠纳米脂质体的制备及表征

优选头孢噻呋钠纳米脂质体的处方工艺并对其理化性质进行考察,为奶牛乳房炎的治疗提供参考.以无水乙醚为助溶剂,磷酸缓冲液(PBS,pH=6.3)为水化剂,采用逆向蒸发-薄膜分散法制备头孢噻呋钠纳米脂质体.以头孢噻呋钠与卵磷脂质量比、卵磷脂与胆固醇质量比、无水乙醚与PBS的体积比为考察因素,包封率为评价指标,采用L9(34)...     

阳离子脂质体的制备及其与禽流感病毒HA基因作用的研究

用超声波法制备了ＤＣｃｈｏｌ阳离子脂质体,研究了阳离子脂质体与禽流感病毒（ＡＩＶ）保护性抗原血凝素（ＨＡ）基因重组质粒ｐＳＶＨ７复合物的特性。电子显微镜观察表明,阳离子脂质体与ｐＳＶＨ７形成复合物后,脂质体发生聚集、膜融合,脂质体直径变大,并出现了多层结构脂质体;通过检测脂质体在２４８ｎｍ处的吸光度变化,研究了脂质体与ｐＳＶＨ７质粒复合物形成及膜融合的动力学过程,脂质体ＤＮＡ复合物是在最初１～１５ｍｉｎ内形成的,其主要作用是静电吸引力,ＮａＣｌ和ＳＤＳ也能引起阳离子脂质体的融合。     

吡喹酮脂质体的研制

以氢化豆磷脂和胆固醇为膜材 ,采用逆相薄膜蒸发法制备了吡喹酮脂质体 (PZQ Lip)。经电镜和光镜检测显示 ,PZQ Lip粒径大部分为 2～ 5 μm ,并以大单层脂质体为主 ;3批PZQ Lip的平均包封率为 71.8%± 2 .2 % (n =3 ) ,平均含药量为 8.9%± 0 .2 % (n =3 ) ;用建立的反相高效液相色谱法 (RP HPLC)检测PZQ时 ,简便、准确 ;绝对平均回收率按照低、中、高 3个浓度水平 ,依次为 99.7%± 1.4%、99.8%± 1.7%、99.5 %± 1.8%     

利福平脂质体在小鼠体内的组织分布

用微生物测定法对利福平脂质体在小鼠体内各组织中的药物浓度进行测定,研究了给药后组织中的药物浓度及分布情况,并将其与游离的利福平作比较.结果表明,小鼠单剂量静脉注射10 mg/kg体重游离的或脂质体利福平后,测定5 min及0.5、1.0、1.5、2.0和6.0 h各组织中药物浓度,以肾(游离型)和脾(脂质体型)浓度为最高.与游离的药物相比,利福平脂质体明显提高了在肝、脾、肺、血清中的药物分布,降低了在肾中的分布,表明利福平脂质体具有器官靶向作用.     

硫酸乙酰肝素的组成及其对病毒感染的影响

硫酸乙酰肝素(HS)是一类由多个二糖重复单元组成的线性硫酸化异构多糖,广泛存在于哺乳动物细胞表面和细胞外基质中。HS大分子通过相互作用识别并结合呈正电荷特性的病毒粒子,增强其对宿主细胞的感染能力,因此HS可作为病毒感染靶细胞的特异性受体。已有研究证实,HS参与口蹄疫病毒(FMDV)等多种病毒的吸附和入胞过程,在病毒感染中发挥重要作用。本文概述了HS的组成及其对病毒感染的影响,以期为HS的研究提供参考。     

猪用生长激素脂质体对大白鼠的促生长活性试验

对大白鼠分别腹腔注射猪用生长激素 (PST)和PST脂质体 ,第 7、14、2 8d称重 ,试验组与对照组之间差异显著 (P <0 .0 5 ) ,表明PST和PST脂质体对大白鼠具有促生长活性 ;同时显示 ,PST脂质体具有显著的缓释作用 ,缓释期可达 7d以上。     

阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响

对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 ,使疫苗的免疫原性增强     

过硫酸氢钾复合粉的杀菌效果试验

为考察过硫酸氢钾复合粉的体外杀菌活性及有机物、pH值、温度对其杀菌效果的影响,采用悬液定量杀菌试验进行了实验室观察。结果显示,0.312 5～2.5 g/L的过硫酸氢钾复合粉消毒液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、多杀性巴氏杆菌和猪链球菌均有杀灭作用,2.5 g/L过硫酸氢钾复合粉消毒液与试验菌作用5 min,杀菌率均为100%。能量试验结果显示,过硫酸氢钾复合粉对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低合格浓度为5 g/L,对多杀性巴氏杆菌和猪链球菌的最低合格浓度为1 g/L;较高温度和酸性环境可以显著增强过硫酸氢钾复合粉的杀菌效果,而高含量的小牛血清可以在一定程度上抑制消毒剂的杀菌活性。结果表明,过硫酸氢钾复合粉具有极强的杀菌效果,提高过硫酸氢钾复合粉的浓度和作用温度、延长作用时间或降低pH值可以增强其杀菌作用。     

普拉沙星片剂的制备及含量测定

为了制备性状稳定、含量均匀的普拉沙星片剂,采用单因素试验和响应面设计试验筛选最优处方和最佳制备工艺,并通过建立高效液相色谱的含量测定方法,检测普拉沙星片剂的含量。结果显示,普拉沙星片剂的最优处方为每100 g含有普拉沙星15 g,预胶化淀粉50 g,聚乙二醇4000 15 g,乙基纤维素10.2 g,牛肉香精6 g,滑石粉3.3 g,硬脂酸镁0.5 g;最佳制备工艺为粉末直接压片法,经此法制得的片剂的硬度、片重差异、脆碎度和崩解时限均符合要求;建立的含量测定方法专属性强、精密度好、准确度高。结果表明,本研究使用的处方合理,工艺可靠,含量测定方法科学,制备的普拉沙星片剂表面光洁、性状稳定、含量均匀。     

超声作用对绵羊胎儿成纤维细胞转染效率的影响

为研究超声波对经脂质体介导的绵羊胎儿成纤维(sheep fetal fibroblasts,SFF)细胞转染效率的影响,用不同频率的超声波在不同时间内辐射经脂质体介导的SFF细胞,转染48h后收集细胞,用RT-PCR检测目的基因,台盼蓝染色检测细胞活性。转染后用G418挑选转基因单克隆细胞,计算转染率。结果显示,对细胞、质粒和脂质体的混合液共同超声辐射(时间60s,超声频率为2.5MHz)后转染,转染率要明显高于未超声辐射的细胞和先转染后超声辐射的细胞,并且细胞的存活率较高。结果表明,超声辐射不仅能改变细胞质膜的通透性,还能够提高脂质体介导的基因转染效率,增强基因介导的特异性和靶向性。     

靶向enJSRV env基因shRNA真核表达质粒的构建及其干扰效率的测定

为探讨绵羊内源性反转录病毒(enJSRV)在绵羊胚胎发育过程中的作用,利用脂质体将pEGFP-C1空载体转入绵羊绒毛膜滋养层细胞中,测定其转染效率。同时构建抑制enJSRV env基因的RNA干扰质粒,并将其转染到能稳定表达enJSRV env基因的绵羊绒毛膜滋养层细胞中,通过荧光定量PCR检测其干扰效率。结果显示,重组干扰质粒enJRSV-env-shRNA-1、enJRSV-env-shRNA-2、enJRSV-env-shRNA-3、enJRSV-env-shRNA-4、Negative-shRNA构建成功。Lipofectamine LTX脂质体体积为6.0μL,转染混合物体积为100μL,转染48h组的转染效率最高,为42.37%。与正常对照组细胞的enJSRV-env mRNA表达量相比,转染靶基因干扰质粒的各组绵羊绒毛膜滋养层细胞中enJSRV-env mRNA表达量分别下调了73.56%、66.82%、33.66%和18.16%。筛选出了一个干扰效率最高的RNA干扰质粒enJRSV-env-shR-NA-1,为以后包装慢病毒及进行动物试验来揭示enJSRV的生殖生物学作用奠定了坚实的基础。     

三种兔瘟疫苗的制备及其免疫效力比较

制备三种兔瘟灭活疫苗 ,经对试验兔进行免疫对比试验 ,三种疫苗免疫的兔均在 7d后产生抗体 ,其抗体水平差异不明显 ,经攻毒试验 ,免疫组受到完全保护 ,对照组全部死亡。结果表明 ,三种疫苗都有很好的免疫保护作用     

恩诺沙星注射混悬剂的研制及药物含量测定

以恩诺沙星和林可霉素为主药 ,以多因素正交设计优选配方 ,采用分散法制备了复方恩诺沙星注射混悬剂 ,并用紫外 可见分光光度计测定了恩诺沙星含量。结果显示 ,按照优选条件制备的混悬剂样品具有通针性好、不结块、易重分散的特点 ,可方便注射给药。所制备的恩诺沙星浓度分别为 40mg/mL和 80mg/mL的混悬剂样品 ,经 180d室温下储存 ,药物含量无明显改变。     

氟苯尼考琥珀酸钠的制备及其在家兔体内的药代动力学特征

用DMAP法制备氟苯尼考琥珀酸钠(Fl-SNa)。将6只家兔分别单剂量肌肉注射氟苯尼考和Fl-SNa,然后采用高效液相色谱(HPLC)法检测血药浓度;用DAS2.0药代动力学程序计算药代动力学参数。结果显示,成功制得Fl-SNa;给家兔单剂量注射氟苯尼考和Fl-SNa后,主要的药代动力学参数Cmax分别为8.863mg/L±0.254mg/L和7.363mg/L±0.085mg/L,tmax分别为1.0h和2.0h,AUC0-∞分别为28.851mg/L.h±0.494mg/L.h和39.187mg/L.h±0.413mg/L.h。结果表明,Fl-SNa达峰时间延长,峰浓度降低,生物利用度大大提高。证明高效液相色谱法准确、灵敏,适用于氟苯尼考血浆浓度的测定;制备的Fl-SNa与氟苯尼考相比生物利用度显著提高。     

唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的制备及其对禽流感病毒的吸附作用

利用氯仿除脂、乙醇除蛋白的方法从牛初乳中提取唾液酸寡糖,并在酸性条件下,以水为介质将其与壳聚糖进行酸碱反应,合成具有良好水溶性的唾液酸寡糖一壳聚糖复合物.经筛选,优化的反应条件为:壳聚糖、唾液酸寡糖质量之比为3:50,温度控制在25℃,反应时间为48 h,所得唾液酸寡糖-壳聚糖复合物的接枝率、接枝效率、产率分别为50%、3%、8.5%.用所得的唾液酸寡糖-壳聚糖复合物对禽流感病毒做血凝抑制试验(HI),结果显示,当唾液酸寡糖-壳聚糖复合物浓度为20～62.5μg/mL时,其对禽流感病毒H5、H7、H9三种亚型抗原引起的血凝均有显著抑制作用.表明,唾液酸寡糖-壳聚糖复合物对禽流感病毒有明显的吸附作用.     

环形泰勒虫子孢子悬液的制备及其对黄牛的感染试验

通过动物感染试验获得环形泰勒虫感染阳性蜱 ,采用标准方法制备环形泰勒虫子孢子悬液 ,并用此悬液感染试验牛。结果 ,试验牛感染后 1 5d血液中出现虫体 ,并表现为稽留热 ,最高体温 42℃以上 ,最高染虫率可达 75 % ,最终死亡     

吉他霉素在猪体内的药代动力学特征及残留检测方法的研究

对7头健康猪按随机交叉设计经单剂量(2.5×104U/kg)内服吉他霉素原药及其微囊制剂进行了药代动力学试验。血浆样品经磷酸氢二钾溶液碱化、无水乙醚提取后,采用HPLC法测定血药浓度。结果表明,药时数据均符合一级吸收二室开放模型,主要药代动力学参数为:原药t1/2ka=0.23h±0.05h,t1/2β=6.43h±2.38h,tmax=0.65h±0.17h,Cmax=6.97μg/mL±1.40μg/mL,AUC=19.98mg/(L.h)±8.16mg/(L.h);微囊制剂t1/2ka=0.55h±0.16h,t1/2β=10.63h±3.73h,tmax=1.25h±0.23h,Cmax=7.97μg/mL±1.63μg/mL,AUC=36.24mg/(L.h)±6.15mg/(L.h)。吉他霉素原药在猪体内吸收较快,但其微囊制剂分布更广泛并消除较缓慢。对猪肌肉、肝和肾等添加吉他霉素标样后均采用0.2%偏磷酸-甲醇萃取后过SCX小柱用甲醇抽提吹干,脂肪加标样采用正己烷除脂后用甲醇反萃取减压蒸干。采用HPLC法测定组织浓度。结果,各组织在0.05～6.4μg/g范围内线性关系良好(r0.999),吉他霉素在各组织中回收率均大于65.38%,批内及批间变异系数分别小于5.56%和4.60%,检测限为0.05μg/g。结果表明,此方法重复性好、灵敏度高,可用于猪组织中吉他霉素残留的检测。