AmpFISTR Sinofiler快速PCR扩增初探

<正>本文实验选择AmpFISTR Sinofiler试剂盒作为研究对象,对如何缩短PCR扩增时间进行了初步探讨。1材料与方法1.1主要材料AmpFISTR Sinofile试剂盒,QIAGEN Fast CyclingPCR试剂盒,9947A DNA模板(100pg/μL),均为美国AB公司产品。     

D21S11稀有等位基因落入相邻基因座1例

正1案例1.1简要案情建立基因档案,送检血液样本一份。1.2初次检验采用Chelex-100法提取DNA,Amp FSTR~SinofilerTM试剂盒(美国AB公司)进行PCR复合扩增,扩增体系和热循环反应按试剂盒说明书进行,扩增产物在3130xl遗传分析仪(美国AB公司)电泳,Genemapper ID v3.2软件分析结果。D21S11基因座表现为纯合子,D7S820基因座显示为5/8/11三带型,     

X-STR分型在特殊二联体亲子鉴定中的应用1例

1 案例 1.1简要案情 两名男子委托本鉴定所对他们与1名女孩是否存在亲生血缘关系进行鉴定. 1.2检验过程 本鉴定所采集3人指血,Chelex-100法提取DNA,采用PowerPlex(R) 21系统(美国Promega公司)检测20个常染色体STR基因座以及1个性别基因座,采用Investigator Argus X-12试剂盒(德国QIAGEN公司)检测12个X-STR基因座,以上扩增均在9700型基因扩增仪(美国AB公司)上完成,扩增体系和条件均按照使用说明书操作,扩增产物在3130遗传分析仪(美国AB公司)上进行毛细管电泳,用GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型.     

男性Y染色体Amelogenin Y、DYS570及DYS576缺失1例

正1案例1.1简要案情某水域发现1具高度腐败未知名尸体,法医初步判断死者为男性,提取死者肋软骨进行DNA检测。1.2检验方法使用AutoMate Express~(TM)核酸提取系统(美国Thermo Fisher Scientific公司)及配套试剂进行DNA提取,使用Power Plex~? 21系统(美国Promega公司)和GlobalFiler~(TM) PCR扩增试剂盒(美国Thermo FisherScientific公司)进行常染色体STR复合扩增。     

河南汉族人群16个Y-STR基因座遗传多态性

<正>1材料与方法采集208名河南汉族无关男性个体的血样,用Chelex-100法提取。采用Yfiler试剂盒(美国AB公司)对16个Y-STR基因座进行PCR扩增。PCR产物在3130XL型遗传分析仪(美国AB公司)上进行毛细管电泳,GeneMapper ID v3.2软件进行基因分型。等位基因频率用直接计数法。基因多样性(gene diversity,GD)按照公式GD=n(1-ΣPi2)/(n-1)[1]计算,其中n为检测的样本数,Pi为第i个等位基因的频率。     

微量PCR反应体系在两种试剂盒中的应用

美国AB I公司的Profiler PlusTM试剂盒和Identifi-lerTM试剂盒在当前法医DNA检案中应用广泛,但价格昂贵。本实验利用5μl体系进行PCR扩增取得满意效果,降低了检验成本。1材料与方法1.1材料法医DNA检案中常规检材,血痕、精斑、烟蒂和毛发(带毛囊)各20份。Profiler PlusTM试剂盒和IdentifilerTM试剂盒(AB I,USA)。1.2方法1.2.1 DNA提取上述检材采用Chelex-100法[1]提取模板DNA。取9mm2血痕加入5%Chelex-100150μl,56℃2h;精斑经两步法视镜检精子量多少酌情加入5%Chelex-100 150~250μl,PK 10μl(2mg/m l),DTT 10μl(1mol/L…     

DYF387S1基因座检出三等位基因1例

正1案例资料1.1简要案情2015年8月7日凌晨,某地发生一起盗窃案。采集嫌疑人血样、烟蒂、鞋子等样本送检。1.2 DNA检验采用Chelex-100法提取嫌疑人黄某某血卡的DNA,QIAcube工作站(QIAGEN公司)提取纯化现场鞋子上的脱落细胞,采用Y-filerTM Plus复合扩增试剂盒(AB公司,美国)进行PCR扩增,3500x L(AB     

两种纯化试剂盒对人体脱落细胞检材STR检出率比较

正随着DNA检验技术的普及和发展,办案人员应用DNA技术的意识不断增强,采集人体脱落细胞进行DNA分析应用逐渐广泛。采用常规提取方法难以获得高质量的DNA模板,影响后续的STR分型。本研究分别采用QIA DNA Investigator试剂盒(德国QIAGEN公司)、PrepFiler~?Express BTA Forensic DNA Extraction试剂盒(美国AB公司,下文简称为PrepFiler~?Express BTA试剂盒)对129份不同载体上人体脱落细胞检材进行检验,评估两种方法的     

PowerPlex(R)16HS试剂盒在陈旧血样DNA检验中的应用

PowerPlex 16 HS系统是对16个STR基因座进行联合扩增试剂盒,对PCR抑制物的耐受性较强,适于直接扩增。本文作者在公安部的打拐专项行动中,采用该试剂盒,对保存近10年的300份陈旧血样进行DNA检验,取得了较好的效果。1材料与方法1.1主要仪器与试剂PowerPlex(16 HS试剂盒(Promega公司,美国),BSD 600半自动取样机(BSD公司,澳大利亚),9700扩增仪、3130XL遗传分析仪(ABI公司,美国)。     

亲子鉴定检出染色体三倍体1例

<正>1案例资料1.1简要案情受检者为孕妇、疑父和孕妇腹中胎儿。孕妇22岁,怀孕24周。签署知情同意书后,采集孕妇和疑父外周静脉血、胎儿羊水样本用于鉴定分析。1.2 DNA分型检测Chelex-100法提取DNA,采用Power Plex?21试剂盒(美国Promega公司)进行复合扩增,扩增产物用3500XL基因分析仪(美国ABI公司)进行DNA分型检测。应用Identifiler~(TM)试剂盒(美国     

D12S391、D6S1043在西藏藏族和四川汉族人群中的遗传多态性

<正>由美国AB公司开发的华夏PCR直接扩增试剂盒已经广泛应用于全国公安机关DNA数据库的检验工作,该试剂盒是依据中国人群的遗传信息,将Identifiler试剂盒中TPOX、TH01两个STR基因座换为D12S391、D6S1043。本实验通过使用华夏PCR直接扩增试剂盒,对西藏自治区藏族人群和四川汉族人群中1079名无关个体进行STR分型,统计了D12S391、D6S1043     

多手段联合亲子鉴定1例

1案例 某地公安机关送检一案件中可疑父母血样和死者（男性）肋软骨,要求进行亲子鉴定：用Chelex-100法提取可疑父母血样和死者肋软骨DNA．分别用美国AB公司Identifile^TM。试剂盒、Yfile^TM试剂盒和北京基点认知技术有限公司Goldeneye^TM 16BTDNA身份鉴定试剂盒复合扩增,扩增产物用3100遗传分析仪进行电泳分离,得到STR分型结果：     

常染色体InDel基因座判定疑难单亲鉴定1例

<正>1案例资料1.1案例来源王某,28岁,要求对其与女儿进行亲权鉴定。1.2检验方法DNA提取采用常规Chelex-100法提取基因组DNA。STR分型采用Goldeneye?20A试剂盒、AGCU EX22试剂盒及AGCU 21+1试剂盒在AB公司9700型PCR仪扩增,进行常染色体的STR分型检测,采用Investigator DIPplex kit(Qiagen,     

甘肃东乡族人群15个STR基因座遗传多态性

正采用AmpFlSTRSinofiler PCR扩增试剂盒,对164例甘肃省临夏市东乡族无关个体进行15个STR基因座的遗传多态性调查,获取了相关的群体遗传学信息,为该地区东乡族人群法医学个体识别和亲权鉴定提供基础数据。1材料与方法164例甘肃省临夏市东乡族无关个体FTA卡血样,其中男性135例,女性29例,全部来自日常案件。采用AmpFlSTRSinofiler PCR扩增试剂盒(美国AB     

哈尔滨(地区)人群CSF1 PO-TPOX-TH01基因座的基因频率调查

参照美国Ｐｒｏｍｅｇａ公司的方法 ,复合扩增ＣＳＦ1ＰＯ、ＴＰＯＸ、ＴＨ0 1基因座 ,并对 3个基因座的基因频率分布进行调查。1　材料和方法1 1　材料血样取自哈尔滨 (地区 )人群的无关个体。采耳血制成干血纱。1 2　方法1 2 1　引物　Ｐｒｏｍｅｇａ公司的ＣＴＴ复合扩增系统试剂盒提供。1 2 2　ＤＮＡ提取　用Ｃｈｅｌｅｘ〔1〕方法提取血纱ＤＮＡ。1 2 3　ＰＣＲ复合扩增　采用ＧｅｎｅｐｒｉｎｔＳＴＲｓｙｓｔｅｍＣＴＴ试剂盒 (ＰｒｏｍｅｇａＵＳＡ ) :2 5μｌ 10×ｂｕｆｆｅｒ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌｐＨ9 0 ,50 0ｍ…     

混合样本拆分检索法用于阴道拭子DNA分型检验

正1案例资料1.1简要案情江某,女。某年2月14日,被发现溺死与河中。经现场勘查怀疑他杀,办案单位提取死者阴道拭子。1.2分型检验死者阴道拭子通过二步法提取、磁珠法(国产博坤磁珠试剂盒)纯化,以Identifiler试剂(美国AB公司)进行PCR复合扩增,产物用ABI-3130XL序列分析仪进行电泳分离和激光扫描分析,     

DXS101基因座稀有等位基因的确认1例

<正>1案例1.1简要案情因申报户口需要,母亲张某与孩子要求进行亲子鉴定,采集指血备检。1.2检验过程与结果1.2.1初次检验使用DNA IQ TM试剂盒(美国Promega公司)提取两人血样DNA,采用AGCU X-12试剂盒(无锡中德美联公司)进行PCR复合扩增,PCR反应体系和循环参数均按照试剂盒说明书设置。使用3130XL型遗传     

X-STR联合常染色体STR用于亲缘关系鉴定1例

1 案例1．1简要案情某年7月27日夜,某乡镇家庭作坊失火。消防救援后,发现3例烧焦炭化的尸体,2例疑似为姐妹,1例疑似为姐姐的儿子．提取各尸体肋软骨和姐妹的父亲鲁某血样要求进行亲缘关系鉴定比对。1．2检验按行业标准GA／T383—2002中Chelex 100法提取基因组DNA,分别用AGCU、X-12、AGCUEx22、AGCU 21＋1（无锡中德美联生物公司）和Identifiler、Sinofiler试剂盒（美国AB公司）,采用10μL体系按照试剂盒说明书进行PCR扩增,扩增产物在3130遗传分析仪（美国AB公司）上毛细管电泳检测,用Gen—eMapperlDv3．2软件进行基因分析。     

SNP辅助判断3个STR基因座突变亲子鉴定案件1例

1案例1.1案情因户口申报需要,自称孩子父亲的男子(被检父)和孩子(男孩)要求做亲子鉴定,经询问孩子母亲已去世。采集二人指血备检。1.2检验过程1.2.1STR检验采用Chelex-100法提取DNA,先后采用HumDNA Typing试剂盒(深圳华大法医科技有限公司)、GoldenEye_22NC试剂盒(基点认知公司)、GlobalFiler试剂盒(美国AB公司)、GoldenEye_26Y试剂盒(基点认知公司)、HumDNA Typing(炎黄Y)试剂盒(深圳华大法医科技有限公司)进行STR检验。     

261例山东汉族人D6S1043、D12S391基因频率调查

本文应用STR复合扩增技术扩增,调查了261份山东汉族人群D6S1043、D12S391基因座的分布,获得相关遗传学数据,报道如下。1材料和方法261份无关个体血样,系本实验室日常办案积累。所有血样均采用chelex-100法提取DNA。按Sinofiler（AB公司,美国）试剂盒说明书进行复合扩增,反应体系为10μL,其中混合液4μL,引物2.2μL,金标Taq酶0.2μL,模板DNA适量,加去离子水至l0μL,置于9700扩增仪中扩增。